凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法：1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,，立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,，再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻,。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm,，4℃，3~5min）,，移去上清液,。4.清洗細(xì)胞，充分洗凈殘留凍存液,。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,，使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中,。6.鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能：通常細(xì)胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成。武漢無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品特性：a.可直接放置于-80℃冰箱,，無需降溫,，節(jié)省時間和精力；b.即用型,，無需現(xiàn)配,，操作方便，可減少實驗中因操作引起的污染,；c.在多種哺乳細(xì)胞系中經(jīng)過性能驗證,，其復(fù)蘇率和活率達(dá)90%以上；d.可長期存儲于-80℃冰箱(5年以上),，取用方便,；e.采用成分明確的無血清配方，價格比常規(guī)自配細(xì)胞凍存液更為低廉,；保存溫度：2~8℃具體操作步驟：1,、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中細(xì)胞按常規(guī)方法消化，或分離獲得原代細(xì)胞后,，收集于離心管中,。2、使用離心機(jī)離心,，去除上清,，收集細(xì)胞沉淀,。3、根據(jù)細(xì)胞生長密度加入適量的細(xì)胞凍存液進(jìn)行重懸,，充分混勻(推薦凍存密度為1-2×106/ml),。4、將細(xì)胞懸液分裝至凍存管中,，直接放置于-80℃冰箱保存,。24小時后可移入液氮長期保存(可選)。唐山無血清細(xì)胞凍存液銷售廠家無血清凍存液用途：無血清細(xì)胞凍存液用于醫(yī)院樣本庫細(xì)胞樣本保存,。

無血清細(xì)胞凍存液與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液比較及優(yōu)勢：1.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液只適用于含血清細(xì)胞的凍存,，但并不適用于無血清培養(yǎng)的細(xì)胞，例如一些CIK細(xì)胞等,，而無血清細(xì)胞凍存液即適用于含血清細(xì)胞的凍存,，又適用于無血清細(xì)胞的凍存，是一種通用型細(xì)胞凍存液,，通用于各種動物細(xì)胞株,；2.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液含10%胎牛血清，因血清是動物源性成份,，因此病毒,、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險很高，而無血清細(xì)胞凍存液因不含血清,，只含DMSO,、葡萄糖等營養(yǎng)成份，較大降低了動物血清來源病毒,、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險,，確保凍存細(xì)胞的安全；3.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液含血清,，但動物血清成分復(fù)雜,，個體差異大，且生產(chǎn)來源不穩(wěn)定,，因此批次間質(zhì)量常常不穩(wěn)定,，這導(dǎo)致培養(yǎng)細(xì)胞的狀態(tài)也會受到影響，而無血清細(xì)胞凍存液成分和配比明確,，批次間差異很小,，能夠保證生長細(xì)胞狀態(tài)的穩(wěn)定性，細(xì)胞存活率高,。

細(xì)胞凍存注意事項：1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,，護(hù)目鏡。此項尤為重要,，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,，可導(dǎo)致炸列。2.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識,，在這里不作詳述,，但二甲基亞砜（DMSO）對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下,，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大,，因此，必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化,。如果復(fù)蘇溫度太慢,，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜（DMSO）選擇進(jìn)口產(chǎn)品,。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液,。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,，以減少對細(xì)胞的損傷,。無血清細(xì)胞凍存液可用于其他類型哺乳動物細(xì)胞的儲存。

無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品用途：1.無血清細(xì)胞凍存液可用于造血干細(xì)胞,、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲存,。2.無血清細(xì)胞凍存液可用于T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲,。3.無血清細(xì)胞凍存液可用于其他類型哺乳動物細(xì)胞的儲存,。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品原理：無血清細(xì)胞凍存液，含多種保護(hù)劑成分,。一些保護(hù)劑，易于穿透細(xì)胞,，避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,，同時另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞，但可以在冰晶形成之前,，優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,，降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,，無血清細(xì)胞凍存液,，為多種保護(hù)劑組合，在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),，較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率,。避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞。武漢無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹

在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),，較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率,。武漢無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹

細(xì)胞凍存注意事項：1,、細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時1ml細(xì)胞液要加10ml－15m培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附,。2,、復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中，分裝過多,，細(xì)胞濃度過低,，不利于細(xì)胞的貼壁。3,、加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大,，就會影響細(xì)胞生長,，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,，還有一個說法是1％,。所以如果你的凍存液的濃度是10％DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。武漢無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹