外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡,,直徑約為30-200nm,密度在1.13-1.21g/ml,,具有杯狀形態(tài),、雙層膜結(jié)構(gòu),天然存在于血液,、尿液,、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中,。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞(免疫細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞),,都可以產(chǎn)生并釋放exosome,。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA,Exosome可通過細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞,,也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì),、mRNA、miRNA,、lncRNA,、circRNA,甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞,,參與細(xì)胞間通訊,。Exosome在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng),、血管生成,、凋亡、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作用,,不同細(xì)胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同,,可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物,也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病,。miRNA是一類22nt左右大小的非編碼分子,,它可以通過外泌體從一個(gè)地方轉(zhuǎn)運(yùn)到另外一個(gè)地方行使基因沉默功能。通過檢測(cè)外泌體中miRNA表達(dá)變化,,可以發(fā)現(xiàn)外泌體中miRNA特異性功能外泌體提?。夯诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)。南京外泌體提取試劑直銷價(jià)
外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200nm,,密度在1.13-1.21g/ml,,具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu),,天然存在于血液,、尿液、唾液,、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中,。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞(免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞,、干細(xì)胞),,都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA,,Exosome可通過細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞,,也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA,、miRNA,、lncRNA、circRNA,,甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞,,參與細(xì)胞間通訊。Exosome在免疫應(yīng)答,、炎癥反應(yīng),、血管生成、凋亡,、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作用,,不同細(xì)胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同,可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物,,也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病深圳正規(guī)外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)嚴(yán)重阻礙了我國在外泌體的研究和臨床應(yīng)用上的發(fā)展,。
外泌體(exosomes,Exos)是細(xì)胞分泌的一種膜囊泡,,因其可以將供體細(xì)胞的信息通過其攜帶的蛋白質(zhì),、mRNA、miRNA等傳遞到受體細(xì)胞,,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞之間的信息交流及物質(zhì)交換,,并且可以作為藥物載體轉(zhuǎn)運(yùn)藥物而引起科學(xué)家的普遍關(guān)注(Fig1)。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),,表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,,使其可以穿透許多生物膜,,提高藥物的運(yùn)輸效率和靶向性,可以穩(wěn)定存在于血液中,,納米級(jí)尺寸明顯增強(qiáng)藥物在瘤部位的滲透滯留效應(yīng)(permeabilityandretentioneffect,EPR),。目前,許多抗藥物,、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體,。但是由于沒有較好的外泌體分離純化和載藥的方法,使得其作為藥物載體的應(yīng)用受到限制,。
外泌體因諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)而被眾人知曉,,也因其作為生命信息傳遞者,,在體液中普遍存在及易獲得性等特點(diǎn)被譽(yù)為液體活檢"新貴",,成為疾病的精確診斷和治病研究的熱點(diǎn),尤其是在一些病癥研究領(lǐng)域[,。外泌體作為細(xì)胞間通信載體的作用現(xiàn)在已被普遍接受,。外泌體包含胞質(zhì)環(huán)境中富含的DNA,RNA,,蛋白質(zhì)和其它分析物,,研究表明,外泌體中的運(yùn)轉(zhuǎn)RNA和蛋白質(zhì)與一些病癥的生長密切相關(guān),,有望作為診斷標(biāo)志物,。研究發(fā)現(xiàn)Vps4A是一個(gè)外泌體的重要調(diào)控因子,與肝病的發(fā)生有著密切的關(guān)系,,Vps4A基因的表達(dá)下調(diào)肝病的發(fā)生及轉(zhuǎn)移相關(guān),。通過microRNA高通量測(cè)序發(fā)現(xiàn)Vps4A基因能導(dǎo)致外泌體分泌肝病相關(guān)的重要microRNA,與肝病的發(fā)生密切相關(guān),。外泌體提?。壕垡叶迹≒EG)為常用的多聚物,可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,。
外泌體的提取方法學(xué)規(guī)范,、統(tǒng)一定量及鑒定等。關(guān)于外泌體的提取有超速離心,、試劑盒,、超濾法、蔗糖密度梯度離心等,,然而各種方法均有其利弊,。超速離心法是目前外泌體相關(guān)文章中的主流方法,由于離心步驟繁瑣,,費(fèi)事費(fèi)力,,而且步驟多導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中容易污染,,且損耗量大,使得較終回收的外泌體不穩(wěn)定,。而且對(duì)于抽提細(xì)胞上清來說,,更是極為不請(qǐng)便,試想用提取300ml的上清需要6個(gè)50ml離心管,,無論是過濾還是后續(xù)的每一步的離心去沉淀,,都具有操作極其不便的缺點(diǎn),總之非常麻煩,。而超濾法存在外泌體會(huì)堵塞膜孔,,造成濃縮效率低,濃縮管重復(fù)利用差,,甚至堵塞在膜孔的外泌體還可能會(huì)粘連成團(tuán),,造成損失及較后的數(shù)據(jù)有誤差,對(duì)于后續(xù)實(shí)驗(yàn)也有影響外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),,表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,。金華正規(guī)外泌體提取試劑直銷價(jià)
根據(jù)外泌體表面的特異生物化學(xué)特性通過提取試劑的特異配方把外泌體從水相中沉降下來。南京外泌體提取試劑直銷價(jià)
外泌體可通過流式,、WB(檢測(cè)指標(biāo)有CD9,CD63,CD81),、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測(cè),,普遍應(yīng)用于藥物載體,、疾病診斷marker、精細(xì)醫(yī)療,、一些病癥治病等方面研究,。由于外泌體直徑小,樣本含量低,,提取十分困難,。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾離心法,、免疫磁珠抗體捕獲,、商用試劑盒等。但到目前為止,,仍沒有一種提取方法能同時(shí)保證外泌體的含量,、純度以及生物活性。外泌體是細(xì)胞間進(jìn)行物質(zhì)運(yùn)輸和信息交流的重要工具,,可以通過調(diào)節(jié)免疫功能促進(jìn)一些病癥的增殖,,血管新生和一些病癥轉(zhuǎn)移。與細(xì)菌傳染,,幫助細(xì)菌逃避免疫關(guān)系很大,,并與心血管疾病,,老年癡呆等疾病具有密切關(guān)系南京外泌體提取試劑直銷價(jià)