一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,,成透明澄清黏稠溶液,;在冰水浴中,調(diào)節(jié)pH=6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,,4°C沉淀10小時,去除上清液,,去除上清液,,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀,;2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,,調(diào)節(jié)PH=6.5;溶液依次通過陽離子交換樹脂,、陰離子交換樹脂進行脫鹽處理,;(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,,-40至-20°C預(yù)凍2?4小時,然后真空冷凍干燥,,凍干產(chǎn)品經(jīng)進一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,,滅菌、包裝,,得到成品膠原蛋白粉末,。鼠尾膠原醋酸溶解:建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。成都鼠尾膠原哪家便宜
鼠尾膠原:含細胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞,,并放置于冰浴中。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要測定pH值),。加入760μL的細胞懸浮液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,,加入適當體積的細胞培養(yǎng)液,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。本品在室溫下pH中性時可迅速成膠,,在操作過程中要盡量保持低溫,。保存條件4℃保存,切勿凍存,有效期一年,。南昌鼠尾膠原哪里買加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。
鼠尾膠原的生物礦化和TEM觀察:果凍樣Ⅰ型膠原蛋白膠體初始浸泡在礦化液中時呈微白色,;礦化2d后,,膠體的顏色逐漸加深至乳白色;礦化6d后,,隨著羥基磷灰石晶體礦化長入膠原纖維內(nèi)部,,膠體顏色加深至純白色,并在膠體表面沉積了一層薄薄的羥基磷灰石鈣晶體,,予鑷子夾起,,其表層羥基磷灰石鈣晶體破碎散落。TEM表征顯示:礦化2d后,,Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔周期性條紋結(jié)構(gòu)逐漸模糊,,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維內(nèi)部,膠原纖維部分礦化,,沿著膠原纖維生長,,忖度變深;礦化6d后,,Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔D-Band結(jié)構(gòu)完全消失,,膠原纖維內(nèi)部可以看到黑色羥基磷灰石晶體,嵌入膠原纖維縱向生長,。當鼠尾Ⅰ型膠原纖維完全礦化時,,由于整條膠原纖維都被羥基磷灰石鈣晶體占據(jù),膠原纖維呈現(xiàn)黑色,,選區(qū)衍射斑圖符合羥基磷灰石表征,。
一種基于鼠尾膠原蛋白:1.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于凍干止血材料中,,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為5%2%1%,,余量的水。2.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,其特征在于鼠尾膠原蛋白來源于各品系SFP級大鼠鼠尾,。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于劑型為創(chuàng)可貼,。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,其特征在于劑型為噴霧劑。膠原蛋白是脊椎動物和無脊椎動物支持結(jié)構(gòu)的主要組成,。
鼠尾Ⅰ型膠原:組裝液的配置:1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL,,用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,倒入0.5mL自組裝液,,室溫放置20min,。予自組裝液自組裝24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中,,將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水、50%乙醇,、100%乙醇依次漂洗后進行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,滴入聚丙烯(PAA)至濃度350μg/mL,;滴加1mol/L的氯化氫,,調(diào)節(jié)酸堿度至7.4,然后緩慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氫二鈉),,約16滴/min,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,,并且制作簡便,,成本低廉,。鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié),。北京正規(guī)鼠尾膠原哪家便宜
酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,。成都鼠尾膠原哪家便宜
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:兩組培養(yǎng)皿中,,隨著過氧化氫濃度的增高,均可見細胞凋亡狀態(tài)明顯加重,,細胞存活率及細胞內(nèi)過氧化氫活力明顯下降,,細胞凋亡率及細胞內(nèi)丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,,呈劑量依賴性,。而在相同濃度過氧化氫誘導(dǎo)下,與對照組相比,,實驗組細胞凋亡狀態(tài)明顯減弱,,細胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高,,細胞凋亡率和丙二醛水平明顯減低,。表明鼠尾膠原對過氧化氫所致的心肌細胞氧化損傷具有保護作用,其機制可能與提高超氧化物歧化酶活力,,減少丙二醛產(chǎn)生及提高Bcl-2的表達有關(guān),。成都鼠尾膠原哪家便宜