如何有效提高細胞轉染實驗效率：1.選擇高效的轉染方法不同轉染試劑有不同的轉染方法,，但大多大同小異,。轉染時應跟據具體轉染試劑推薦的方法，但也要注意,，因不同實驗室培養(yǎng)的細胞性質不同,，質粒定量差異，操作手法上的差異等,，其轉染效果可能不同,，應根據實驗室的具體條件來確定較佳轉染條件。2.確保所構建載體的質量,。轉染載體的構建（細菌載體,，質粒DNA，RNA,，PCR產物,，寡核苷酸等）也影響轉染結果。細菌載體對特定宿主細胞傳染效率較高,，但不同細菌載體有其特定的宿主,，有的還要求特定的細胞周期，如逆轉錄細菌需侵染分裂期的宿主細胞,，此外還需考慮一些安全問題（如基因污染）,。除載體構建外，載體的形態(tài)及大小對轉染效率也有不同的影響,，如前面提到的超螺旋及線性DNA對瞬時和穩(wěn)定轉染的影響,。如果基因產物對細胞有毒性作用，轉染也很難進行,，因此選擇組成或可調控,，強度合適的啟動子也很重要，同時做空載體及其它基因的相同載體構建的轉染正對照可排除毒性影響的干擾,。加入混合液,，將細胞放回培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一個小時。無錫細胞高效轉染試劑廠家批發(fā)價

轉染的注意事項：細胞鋪板密度用于轉染的較佳細胞密度根據不同的細胞類型或應用而異,。一般轉染時,，貼壁細胞密度為70%-90%，懸浮細胞密度為2×106-4×106細胞/ml時效果較好,。確保轉染時細胞沒有長滿或處于靜止期,。因為轉染效率對細胞密度很敏感，所以在不同實驗間保持一個基本的傳代步驟很重要,。鋪板細胞數目的增加可以增加轉染活性和細胞產量,。在三種不同密度進行細胞鋪板的比較表明鋪板密度較高的，CAT活性也較高,。得到較高活性所需的LIPOFECTAMINE試劑的量也相應增加了,。這些結果說明，對于轉染相同量的DNA所需的較佳陽離子脂質體試劑的量會因細胞密度而異,。唐山細胞高效轉染試劑價格轉染技術轉染是將外源遺傳物質導入真核細胞的過程,，是細胞和分子生物學研究的重要工具。

細胞轉染為什么不能加血清：不同的細胞及轉染試劑要求轉染的條件是不同的,。較好是在靠前次實驗前做一個預實驗,，比如：HeLa，293,，CHO,，COS7，MCF－7,，HepG2等細胞,，是否加血清，對不同的細胞是有不同的影響的,，有些細胞是可以有血清的,，有些加血清就會受影響,。轉染后在6小時左右較好換液且換為有血清的培養(yǎng)基，其一因為普通轉染試劑對細胞的毒性作用大,，其二可降低因血清的缺乏引起的細胞的死亡,。轉染時不加血清是防止血清的干擾作用，轉染后可適時加入,。加入過早會引起未轉染細胞的優(yōu)勢生長,，過晚會引起較多細胞死亡?？蓪崟r觀察1/5細胞變圓的時候加入血清

細胞轉染效率低下的幾個大坑：1.細胞污染細胞污染也是造成細胞死亡,，轉染效率低下的一大原因。首先,，轉染細胞用的質粒必須保證無菌,。而現在市場上的一般的質粒提取試劑盒都做不到較全無菌。毛博這里再貢獻一個獨門絕招：將提完質粒后或者提的較后一步,，用75％乙醇沉淀,，這樣就除菌了。2.質粒不行轉染用的質粒首先要保證數量,，一般為2μg以上,。質粒純度不夠或者含有細菌LPS或其他對細胞有毒害作用的物質，也會影響轉染效率,。這個時候,，就應該對質粒進行純化和濃縮。到時后,，根據細胞種類決定是否移除混合液,。

具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,，生成可信任的生理學相關數據,。2.操作簡便、節(jié)省時間,，只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,，再與質粒DNA共同孵育，即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可),。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作,。X-tremeGENEHPDNA轉染試劑簡介：X-tremeGENEHPDNA轉染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,，可用于轉染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉染細胞系,。優(yōu)勢：一般的瞬時轉染 方法多采用脂質體法。珠海細胞高效轉染試劑推薦廠家

震蕩后將試劑放在－20攝氏度保存，使用前還需震蕩,。無錫細胞高效轉染試劑廠家批發(fā)價

細胞轉染效率影響因素：1.細胞密度一般來說,，當細胞密度達到60%～80%時進行轉染可以取得較高的轉染效率，過低或過高都會影響轉染效果,。2.細胞生長狀態(tài)這點非常關鍵,，很多時候傳代次數太少或者太多都將導致細胞對轉染試劑敏感度的改變。因此,，為了提高轉染效率以及轉染穩(wěn)定性、降低細胞毒性,，應盡量使用適度傳代的細胞系,，并在不同次實驗時保持細胞傳代次數的一致性。3.細胞種類不同細胞種類的細胞在做轉染時所需要的轉染體系是不同的,，不能一種體系用在所有類型細胞的轉染實驗,。無錫細胞高效轉染試劑廠家批發(fā)價