外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷：miRNAs是一類含有20～25個核苷酸的非編碼小RNA,，能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達(dá),，目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中，參與一些病癥的形成和演化過程,。單個miRNA可能通過壓制性復(fù)合物與多個mRNA結(jié)合,，從而阻滯整個生物通路,。因此，外泌體的miRNA具有成為NSCLC標(biāo)志物的優(yōu)勢,。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環(huán)游離miRNA的表達(dá),，與75例健康者相比，發(fā)現(xiàn)了兩種高表達(dá)的miRNA（miR-25和miR-223）,。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個miRNA的表達(dá)進(jìn)行了評估,，結(jié)果顯示，12個一些病癥相關(guān)的miRNA*在肺病患者中過度表達(dá),。Cazzoli等收集了30個血漿樣本,，發(fā)現(xiàn)4種外泌體miRNA（miR-378a、-379a、-139-5p,、-200b-5p）在肺病患者血清中明顯升高,，用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積（AUC）為0.908。外泌體提?。捍胖榉ň哂刑禺愋愿?、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點,。正規(guī)外泌體提取試劑直銷價

外泌體的提取方法：1,、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63,、CD9蛋白）,，用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合，即可將外泌體吸附并分離出來,。磁珠法具有特異性高,、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點,，但是效率低,，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實驗,，難以普遍普及,。2、多聚物沉淀法,。聚乙二醇（PEG）為常用的多聚物,，可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,，其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低,，雜蛋白較多（假陽性）,，顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物,，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等杭州正規(guī)外泌體提取試劑供應(yīng)商同時對超速離心機(jī)的設(shè)備要求以及操作程序的培訓(xùn)較大提高了提取成本,。

外泌體，是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),，直徑大約40-100nm。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),，但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物,。然而較近幾年,，人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,，能作為信號分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能,。這些發(fā)現(xiàn)點燃了人們對細(xì)胞分泌膜泡的興趣。較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用,，如免疫中抗原呈遞,、一些病癥的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等,。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。

所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,，且外泌體天然存在于體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究,。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細(xì)胞間通訊,，對外泌體的研究興趣日益增長,，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。1983年,，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。外泌體的分離純化一直是科研工作者關(guān)注的問題,，獲得高純度的外泌體對后續(xù)的研究至關(guān)重要。

大量關(guān)于一些病癥相關(guān)巨噬細(xì)胞的研究表明,，一些病癥相關(guān)巨噬細(xì)胞通過與一些病癥細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞間通訊,，與一些病癥進(jìn)展和轉(zhuǎn)移相關(guān)，然而對TAM與一些病癥細(xì)胞之間通信的研究限制于可溶性因子,，例如促炎細(xì)胞因子,，其中包括趨化因子、炎癥因子和生長因子等,。較近的研究證據(jù)表明,，外泌體是一些病癥微環(huán)境中不同細(xì)胞類型之間的重要通訊媒介,。外泌體將信息從一個細(xì)胞傳遞到另一個細(xì)胞并重編程受體細(xì)胞。目前大部分研究都集中在一些病癥細(xì)胞分泌的外泌體,，關(guān)于TAM衍生的外泌體及其對治病細(xì)胞的影響知之甚少,。TAM具有兩種相反的表型：M1亞型巨噬細(xì)胞具有抗一些病癥作用，M2型巨噬細(xì)胞具有致瘤作用活性,。TAM的表型由特定的一些病癥來源的趨化因子和外泌體調(diào)節(jié),。較近的一項研究表明，一些病癥來源的外泌體miRNA調(diào)節(jié)一些病癥促進(jìn)M2巨噬細(xì)胞的極化,。然而,，TAM衍生的外泌體對一些病癥進(jìn)展和轉(zhuǎn)移的調(diào)節(jié)尚未明確定義。目前,，TAM的外泌體概況仍然大部分未知,，并且TAM衍生的外泌體對于一些病癥進(jìn)展在功能上是否必需還未確定。外泌體（Exosome）發(fā)現(xiàn)于1986年,，是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體,。上海正規(guī)外泌體提取試劑廠家供應(yīng)

現(xiàn)已證實可以分泌外泌體的細(xì)胞有：肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、樹突狀細(xì)胞,、一些病癥細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等,。正規(guī)外泌體提取試劑直銷價

有研究發(fā)現(xiàn),，NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽性的占80%，而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽性的只占2%,，因而認(rèn)為外泌體的EGFR蛋白可以用作NSCLC與慢性肺炎鑒別診斷的生物標(biāo)志物,。Park等通過Sys-BodyFlu-id數(shù)據(jù)庫分析發(fā)現(xiàn)153種特異性胸腔積液外泌體蛋白質(zhì)，進(jìn)一步的Westernblotting分析顯示多種特異性胸腔積液外泌體蛋白參與EGFR信號傳導(dǎo)途徑以促進(jìn)一些病癥的發(fā)生的發(fā)展,，因此外泌體蛋白可能作為肺病診斷篩查的生物學(xué)標(biāo)記物,。外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷：近年來眾多文獻(xiàn)報道，肺病細(xì)胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質(zhì)并促進(jìn)肺病的發(fā)生的發(fā)展,，是早期診斷肺病的有效途徑,。正規(guī)外泌體提取試劑直銷價