鼠尾膠原蛋白的提取方法,，采用酸法與酶法相結合的工藝,，保持恒低溫無菌的環(huán)境,，利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,，簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,，并采用檸檬酸替代醋酸進行提純,。從提取原料到樣品生成過程中，進行多次真空冷凍干燥,，并經(jīng)進一步處理獲得含水率在3％以下的膠原蛋白微粉,；較后由滅菌、無菌包裝,，成品膠原蛋白粉末的純度在98％以上,。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性，提高了產(chǎn)率和生物相容性,，降低了成本,，適用于生物醫(yī)用材料，所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結構,。制備鼠尾膠原：吸去生理鹽水,，將尾腱稱重（0.5-1克）。昆明鼠尾膠原產(chǎn)品介紹

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,，pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和,。需要的溶液（均需要無菌,、預冷）10mg/L酚紅用于pH指示）0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一般不用),，雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結）立即混勻,。再加入100ul10PBS10培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試),。石家莊正規(guī)鼠尾膠原廠家推薦通常情況下骨質總量中的鈣,、鎂、磷等無機物質光占總量的百分之幾而膠原蛋白等有機物質卻要占超過80%,。

利用鼠尾Ⅰ型膠原構建與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料,。方法通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白，并重構成膠原纖維,。然后,，將重構后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2～6d，通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化,。結果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構成膠原纖維,，并且具有特征性的D-Band結構。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示：礦化2d后,，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,，膠原纖維部分礦化；礦化6d后,，膠原纖維內部完全礦化,，形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。結論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構成膠原纖維,，經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學成分和分子結構一致的仿生骨材料,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,，并且制作簡便,，成本低廉。

鼠尾膠原簡介：鼠尾I型膠原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,，純度達到95%以上,，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,，特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng),；也可用于制備三維膠原凝膠，使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長,。質量標準：1,、SDS-PAGE分析純度大于95%。2,、無菌檢驗結果為陰性,。3、本品2μg/cm2包被細胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細胞,，貼壁及生長正常,。4,、本品濃度1mg/mL，pH7.0時形成具有一定強度的三維膠原凝膠,，NIH-3T3細胞在三維凝膠內生長正常,、PC-12細胞在三維凝膠表面生長正常。一種基于鼠尾膠原蛋白：各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為5% 2% 1%,，余量的水,。

鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑，可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,，特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng),；也可用于制備三維膠原凝膠,，使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長,。制備鼠尾膠原方法：1、取大鼠尾巴洗凈,，75%酒精浸泡5分鐘,；2、手持尾巴,，用止血鉗夾住鼠尾的較高,，折斷尾骨后拉出尾腱；3,、將尾腱剪斷置于平皿中,，生理鹽水浸泡；4,、重復步驟2,、3，直至尾腱量夠用,；5,、吸去生理鹽水，將尾腱稱重（0.5-1克）,；6,、將尾腱置于平皿內剪碎，轉移至三角燒瓶中,；7,、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液,；8,、搖晃，使尾腱分散于醋酸溶液中,，4℃放置一星期,；9,、離心，4000轉/分,，10-15分鐘,；10、吸取上清,，分裝成小瓶,，4℃保存。鼠尾膠原醋酸溶解：建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。太原正規(guī)鼠尾膠原哪家好

將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡,。昆明鼠尾膠原產(chǎn)品介紹

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中,，調節(jié)pH=6.5,，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,，4°C沉淀10小時,，去除上清液，去除上清液,，絮狀溶液高速冷凍離心處理,，收集沉淀；2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,，成透明澄清黏稠溶液,，冰水浴中，調節(jié)PH=6.5;溶液依次通過陽離子交換樹脂,、陰離子交換樹脂進行脫鹽處理,；(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液，-40至-20°C預凍2?4小時,，然后真空冷凍干燥,，凍干產(chǎn)品經(jīng)進一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉，滅菌,、包裝,，得到成品膠原蛋白粉末。昆明鼠尾膠原產(chǎn)品介紹