除了讓細胞更好貼上去,，鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,，這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長環(huán)境，讓細胞在更真實地條件下進行生長,。當然,，除了這些，耗子尾汁還能做到很多事情，只需要打開網(wǎng)站——知網(wǎng)，輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,，例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品，制作止血海綿敷料等各種用途,。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,，老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料,。這類「耗子尾汁」通常用來鑒別耗子的基因型,，對于轉(zhuǎn)基因小鼠而言，如果無法通過毛色來分辨動物的基因型,，往往會選用經(jīng)典的PCR法,。通過蛋白酶K裂解，「剪尾,、加堿,、加熱」三連的方法都能制備一管（香噴噴）的「耗子尾汁」，從而獲取遺傳信息,。利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi),。廈門廣州鼠尾膠原

含細胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞，并放置于冰浴中,。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻,。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中（混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時需要測定pH值）,。加入760μL的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,，加入適當體積的細胞培養(yǎng)液,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。本品在室溫下pH中性時可迅速成膠,，在操作過程中要盡量保持低溫,。保存條件4℃保存，切勿凍存,，有效期一年,。廣州正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物，該模型是進行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復(fù)合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ),。

鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用：原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究,。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo),。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術(shù)檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達。

鼠尾Ⅰ型膠原：材料與方法：1.主要材料,、試劑和儀器鼠尾,、鹽酸、等滲氯化鈉溶液,、鈣液,、磷液均購自上海晶純生化科技股份有限公司。日立高新TEMHT770(日本日立公司),；多功能粉末X射線衍射儀,。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈，用75%的乙醇浸泡5min,。將尾巴剪開,，去掉皮毛，并剪成小段,，抽出銀色的肌腱,。將肌鍵剪斷置于平皿中，用無菌等滲氯化鈉溶液浸泡,。吸去等滲氯化鈉溶液,，將肌鍵置于平皿中剪碎，按每克肌鍵50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液,。搖晃,，將肌鍵分散于醋酸溶液中，4℃放置一周,，然后以2186×g離心20min,。在醋酸溶液的酸解下，肌腱水解成膠凍狀凝膠,，置于冰箱4℃保存,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便,，成本低廉,。開蓋在超凈臺上過夜晾干，也可以在室溫放置1小時后,。

鼠尾膠原簡介：鼠尾I型膠原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,，純度達到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸,。本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,，特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng)；也可用于制備三維膠原凝膠,，使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長,。質(zhì)量標準：1、SDS-PAGE分析純度大于95%,。2,、無菌檢驗結(jié)果為陰性。3,、本品2μg/cm2包被細胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細胞,，貼壁及生長正常。4,、本品濃度1mg/mL,，pH7.0時形成具有一定強度的三維膠原凝膠,，NIH-3T3細胞在三維凝膠內(nèi)生長正常,、PC-12細胞在三維凝膠表面生長正常。免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實所培養(yǎng)的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征,。蕪湖重慶鼠尾膠原

制備鼠尾膠原：搖晃,，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期,。廈門廣州鼠尾膠原

詳細步驟如下：1.75％酒精浸泡大鼠尾巴30min,；2.將尾巴剪開、去掉皮毛,，并剪成小段（3cm左右）,，抽出銀色的尾鍵；3.把剪碎的尾鍵置于150ml,，0.1％消過毒的醋酸中,，4℃放置，并不時振蕩,；4.48h后取上清,，4000轉(zhuǎn)離心30min后,，取上清；5.分裝上清（鼠尾膠）4度（或-20度）保存,。有時可繼續(xù)向4,。中沉淀中加入10－20ml醋酸，重復(fù)以上步驟,，以制備更多的鼠尾膠,。在使用時，先將冰存的膠原液在室溫下解凍,，再按以下步驟包被培養(yǎng)器皿：1）用吸管吸取膠原液,，在無菌的培養(yǎng)器皿的生長面內(nèi)壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液。2）若包被的是培養(yǎng)瓶,，可向培養(yǎng)瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻,。讓氨氣充入瓶內(nèi)后，即可旋緊瓶蓋或塞緊瓶塞,。若為培養(yǎng)皿或板的話,，可將培養(yǎng)皿或板放在已消毒的飯盒內(nèi)，將浸有氨水的棉球放入飯盒內(nèi),，蓋緊飯盒蓋,，四周用封口膠封死。廈門廣州鼠尾膠原