染色的原理和臨床意義:在同一張涂片上進(jìn)行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色,,常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色等,。反應(yīng)的原理基本上同各自的染色原理,,同一張涂片上的細(xì)胞要分別在兩種不同的基質(zhì)液中作用一定時間,較后復(fù)染,、顯微鏡觀察,。酯酶雙染色可同時觀察兩種不同的白血病細(xì)胞,因此在鑒別白血病類型方面明顯優(yōu)于單項染色,。急性粒-單核細(xì)胞白血病該染色法在急性粒-單核細(xì)胞白血病的同一張涂片上可分別出現(xiàn)α-NBE染色和NAS-DCE染色陽性反應(yīng)的細(xì)胞,,甚至少數(shù)病例在單個細(xì)胞內(nèi)同時出現(xiàn)以上兩種酯酶染色的雙重陽性反應(yīng),,因此酯酶雙染色反應(yīng)在急性粒-單核細(xì)胞白血病的診斷上具有獨特價值。糖類從組織化學(xué)技術(shù)角度來分,,可分為多糖,、中性粘液物質(zhì)。江蘇糖原染色試劑盒哪家便宜
染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),,是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶,。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶,屬水解酶類,,相當(dāng)穩(wěn)定而不易降解,,以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物,其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測出來,。由于絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性,,因此這個基因被普遍應(yīng)用于基因調(diào)控的研究中。根據(jù)GUS基因檢測所用的底物不同,,可以選擇三種檢測方法:組織化學(xué)法,、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測法較高)。其中較為常用的是組織化學(xué)法,。天津品牌糖原染色試劑盒進(jìn)貨價可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞,。
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,,均來自我室實驗材料,。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,,冰醋酸5mL,、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,,冰醋酸100mL,,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,,水20mL,。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,,煮沸后,,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),,使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色),。冷卻到50℃時,過濾,,加入1N鹽酸50mL,,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),,然后避光放置或冰箱內(nèi)24h。
糖原染色臨床意義:1,、急性淋巴細(xì)胞白血病,、淋巴組織惡性增生性疾病、紅白血病,、戈謝病的原始細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng)或陽性反應(yīng),;缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙,、骨髓增生異常綜合征亦可呈陽性反應(yīng),;急性粒細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病,、良性淋巴細(xì)胞增多癥,、尼曼-皮克細(xì)胞呈陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng)。巨幼細(xì)胞性貧血,、溶血性貧血,、再生障礙性貧血等,幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng),。偶有個別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng),。2、幫助鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞,,巨核細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng),;霍奇金細(xì)胞呈弱陽性或陰性反應(yīng)。3,、幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,,腺細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診.,。
糖原及粘液染色法注意事項:1,、糖原的固定要及時,而且標(biāo)本要新鮮,。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,,有它的弊病,,因無水酒精滲透較慢,,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端),。故用Gendre氏固定液效果較佳,,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純,,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是,。4,、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效,。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧?。其次考慮堿性品紅本身,,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,但不同批號,,其效果就可能不同,,應(yīng)特別引起注意~常需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進(jìn)行特殊染色。北京如何使用糖原染色試劑盒服務(wù)電話
一般厚度不超過3mm,,大小不超過5×5m㎡,。江蘇糖原染色試劑盒哪家便宜
彈力染色應(yīng)用:(1)動靜脈的辨認(rèn):在血管病變時是動脈還是靜脈以及是否為血管壁難辨認(rèn)時,彈力纖維染色有助于辨認(rèn),。有彈力板者為動脈,,有彈力纖維構(gòu)成血管輪廓者為血管。彈力纖維抗損傷能力較強(qiáng),,故彈力性纖維構(gòu)成血管輪廓不易損壞,。(2)彈力纖維瘤的診斷:彈力纖維染色可見瘤樣病變內(nèi)有大量彈力纖維增生,非真性,。(3)心血管先天性彈力組織增生,,這組疾病有先天性內(nèi)膜炎及冠狀動脈的彈力纖維組織增生。彈力纖維染色有助于診斷,。(4)彈力纖維損傷性疾?。哼@組疾病有肺氣腫、,、大動脈中層炎癥等,,彈力纖維染色有助于這些疾病的觀察診斷。江蘇糖原染色試劑盒哪家便宜