RNA是核糖核酸,,DNA是脫氧核酸。區(qū)別:紫外吸收:核酸的λm=260nm,,堿基展開程度越大,,紫外吸收就越厲害。當(dāng)A=1時(shí),,DNA:50ug/ml,,RNA和單鏈DNA:40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml,。用A260/A280還可來表示核酸的純度,。沉降速度:對(duì)于拓?fù)洚悩?gòu)體(核苷酸數(shù)目相同的核酸),其沉降速度從達(dá)到小依次為:RNA;超螺旋DNA>解鏈環(huán)狀DNA;松弛環(huán)狀DNA;線形DNA也就是在離心管中較上層是線形DNA,,較下面是RNA,。電泳:核苷酸、核酸均可以進(jìn)行電泳,,泳動(dòng)速度主要由分子大小來決定,,因此,電泳是測(cè)定核酸分子量的好方法,。DNA分子量測(cè)定較直接的方法:用適當(dāng)濃度的EB(溴嘧啶)染色DNA,,可以將其他形式的DNA變成線形DNA,用電鏡測(cè)出其長度,,按B-DNA模型算出bp數(shù),,根據(jù)核苷酸的平均分子量就可計(jì)算出DNA的分子量??梢杂?60nm波長分光測(cè)定RNA濃度,,OD值為1相當(dāng)于大約40μg/ml的單鏈RNA。貴陽正規(guī)RNA提取試劑報(bào)價(jià)
RNA提取試劑的選擇:選擇合適的提取試劑是較重要的一步,。好的提取試劑在確保成功的同時(shí),,操作方便且經(jīng)濟(jì)實(shí)用。對(duì)于動(dòng)物組織,、簡單的植物材料,、各種微生物、培養(yǎng)細(xì)胞的totalRNA提取,Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例,。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,,進(jìn)一步豐富了TakaraRNA提取的產(chǎn)品線。該產(chǎn)品采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解系統(tǒng),,無需苯酚氯仿抽提等步驟,,簡單快捷。組織或細(xì)胞裂解后,,提取操作光需20分鐘便可完成,。上海正規(guī)RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨能迅速破碎細(xì)胞,壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶,。
RNA提取試劑的選擇:對(duì)于富含多糖多酚的植物類組織提取是個(gè)難點(diǎn),,Takara精心研發(fā)的柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以輕松解決這個(gè)問題。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以高效地從各種簡單的植物組織材料(葉片,、莖、幼苗等),、富含多糖多酚的植物組織材料(果實(shí)、種子等),、菌類提取高純度的TotalRNA,,適用范圍普遍。按照標(biāo)準(zhǔn)流程,,本試劑盒可以有效地提取分子量大于200nt的RNA,,也可以按照可選步驟提取得到包含SmallRNA(<200nt)的TotalRNA。試劑盒中包含了RNA提取所需的全部試劑,,無需額外購買其它試劑~
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒1,、高純度:試劑盒的進(jìn)口吸附柱具有的專一吸附特性和強(qiáng)吸附力。三管齊下保證所提取RNA的產(chǎn)量和純度,,前期得到的高質(zhì)量RNA才能保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)成功,,尤其是對(duì)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)等。2,、無DNA污染可直接用于熒光定量PCR:目前市面上的試劑盒大多提出的RNA會(huì)出現(xiàn)DNA污染其結(jié)果嚴(yán)重影響后續(xù)實(shí)驗(yàn),,特別是非常靈敏的熒光定量PCR的實(shí)驗(yàn)。一些市面上單獨(dú)賣的去DNA污染的試劑,,效果不穩(wěn)定,,去除DNA污染不徹底。本產(chǎn)品操作簡單,,去除DNA徹底,,得到的RNA樣品可直接用于熒光定量PCR,反轉(zhuǎn)錄等各種后續(xù)實(shí)驗(yàn)。以及參與RNAi作用的miRNA與siRNA等,,可調(diào)節(jié)基因表達(dá),。
動(dòng)物細(xì)胞RNA提取:1,、懸浮細(xì)胞:可直接離心后棄掉培養(yǎng)基,,用無菌PBS清洗1~2遍后,再用適量PBS懸浮起來,,然后再加入裂解液進(jìn)行裂解,。千萬不要完全棄掉液體后,往沉淀細(xì)胞里直接加入裂解液,,這樣會(huì)使外表層的細(xì)胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細(xì)胞外側(cè),,從而限制沉淀內(nèi)部的細(xì)胞與裂解液的接觸,從而導(dǎo)致細(xì)胞裂解不徹底,,降低RNA得率,。2、半貼壁或貼壁不緊的細(xì)胞:棄掉培養(yǎng)基后,,用PBS洗1~2次,,然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養(yǎng)皿,把細(xì)胞吹下來,,轉(zhuǎn)移到無RNA酶的EP管中,,加裂解液進(jìn)行提取。3,、貼壁細(xì)胞:需要先用胰酶消化,,然后收集到無RNA酶的EP管中,離心去其上清,,用PBS洗1~2次,,去除多余的胰酶,以適量PBS重懸后繼續(xù)進(jìn)行提取步驟,。RNA提取試劑:TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染,。貴陽RNA提取試劑價(jià)格
帶口罩、帽子,,屏住呼吸,、不說話,帶乳膠手套并要時(shí)常更換,。貴陽正規(guī)RNA提取試劑報(bào)價(jià)
植物RNA快速提取試劑盒:是一種單相RNA快速提取試劑盒,,可高效裂解堅(jiān)固的植物細(xì)胞并強(qiáng)烈壓制RNA酶活性。細(xì)胞破碎之后,,植物多糖立即被PlantRNAtrip獨(dú)特的成分結(jié)合,。離心抽提步驟將RNA與滅活的RNA酶,、蛋白、基因組DNA污染分離,,并清理植物多糖多酚以及次生代謝產(chǎn)物,。在RNA沉淀之前加入PlantRNAAid清理植物多酚,并清理殘余的多糖,。提取可在60分鐘內(nèi)完成,,所提取的RNA純度極高,不含DNA和多糖和多酚污染,,可用于構(gòu)建cDNA文庫,、RT-PCR、Northern轉(zhuǎn)印分析,、Poly(A)mRNA純化,、體外翻譯、和RNA酶保護(hù)實(shí)驗(yàn),。適于各種植物組織RNA提取,,也特別適合富含糖原的動(dòng)物肝臟和肌肉組織提取高純度RNA。如果植物組織富含多酚和次生代謝產(chǎn)物,,推薦使用PlantRNAExtractionkit(R1050),。貴陽正規(guī)RNA提取試劑報(bào)價(jià)