糖原染色:方法固定液Carnoy固定液:純酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以選用75%酒精配制1)過碘酸酒清夜配法:過碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml)5ml蒸餾水10ml保存于冰箱內(nèi),用棕色瓶,可用兩周.2)Schiff氏液:0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時時搖動三角瓶5分鐘,使之充分溶解.冷卻至50℃后過濾加入10毫升1N鹽酸.冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時,然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒**配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml純酒精23ml4)亞硫酸水1%偏重亞硫酸蒸餾水180ml的樹膠溶解~素染色液100mlHE染色屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種,。江西提供糖原染色試劑盒銷售廠家
PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原,、黏蛋白和糖蛋白)的方法,,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原,。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),,需加入糖原消化步驟,。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去,。人類的唾液被認為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標冸唾液的考慮,,不主張應(yīng)用唾液,。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置,。上海品牌糖原染色試劑盒報價切出的石蠟切片要好,,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚,。
糖原D-PAS染色液注意事項:1,、切片脫蠟應(yīng)盡量干冷,否則影響染色效果,。需使用一張陽性對照片驗證酶的活性,。2、過碘酸氧化時間不宜過久,,氧化時溫度以18~22℃較佳,。3、試劑(A),、試劑(B),、試劑(C)、應(yīng)置于4℃密閉保存,,使用時避免接觸過多的陽光和空氣,,使用前較好提前取出恢復到在室溫后,避光暗處使用,。4,、酸性乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,其分化時間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄,、組織的類別和酸性乙醇分化液的新舊而定,,另外分化后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠。5,、在過碘酸溶液和SchiffReagent中作用時間非常重要,,該依據(jù)切片厚薄,、組織類別等決定。6,、況冶切片染色時間盡量要短,。
注意事項:染色時:①染色時必須嚴格按照染色操作說明書進行染色。②在染色過程中,,前一個染液浸染完成后,,在進行下一個染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,,使前一個染液沖洗干凈后再進行下一步驟,。③每次滴加染液前,務(wù)必吸干組織上多余的水分,,避免多余的水把染液稀釋了,,造成染色不佳。④在滴加染液時,,務(wù)必使染液完全覆蓋組織,,但不能溢出圈外,避免浪費試劑,。在染色時,,用有色鉛筆在組織周圍劃一個圈,這樣在滴加染液時就不會使染液溢出,。加入少量活性碳并震蕩,、過濾,此時溶液應(yīng)為無色,。
特殊染色方法選擇應(yīng)遵循:染色結(jié)果對比鮮明,、結(jié)果易保存、陽性突出的染色方法,;突出的陽性結(jié)果在于所選擇方法表達的色調(diào)及如何進行背景的復染,。結(jié)果能夠長時間保存、不褪色對于后續(xù)的調(diào)閱,、科研,、論文均較為有利。如顯示淀粉樣物質(zhì),,甲基紫染色法雖然流程較為簡單,,但結(jié)果不易保存,陽性對比度相對不突出,;剛果紅染色法陽性結(jié)果明顯,,長時間保存不褪色,流程簡便,更是實用的方法,。如顯示彈性纖維,地衣紅染色染液雖配制較方便,,但結(jié)果對比度相對欠佳,,與其他幾個染色法相比,多不選擇使用,。糖原染色顯示在肝或心肌細胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診.,。江西口碑好的糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價
通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學成分進行定性、定位,、定量研究,。江西提供糖原染色試劑盒銷售廠家
粘液染色法:粘液一般有以下幾點特性:(1)對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中,、切片上的粘液呈污穢藍色,。(2)對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍有異染性。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,,胃粘蛋白則除外,。(4)溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種:1,、P.A.S染色法:操作方法同前,,結(jié)果;中性粘液性物質(zhì),,某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,,核呈藍色。2,、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點是能同時顯示出酸性和中性粘液物質(zhì),。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘,。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序,。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,,水洗。(6)常規(guī)脫水,、封片,。江西提供糖原染色試劑盒銷售廠家