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來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-08-27

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個(gè)方面:PAS染色時(shí)需于暗處加蓋反應(yīng),,染色時(shí)間10~20min(染色時(shí)間長(zhǎng)短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度,SO濃度高,,染色時(shí)間適當(dāng)縮短,;環(huán)境溫度高,染色時(shí)間也應(yīng)適當(dāng)縮短,,反之則需適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間),。染色過程中不能接觸伊紅,以免造成顏色誤差[4],。作糖原染色時(shí),,較好作消化對(duì)照,,即取兩張連續(xù)切片,其中一張脫蠟至水后,,用1%淀粉酶于37℃消化30min,,水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如經(jīng)消化處理的切片染色陰性,,不經(jīng)消化處理的切片染色陽(yáng)性,,即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,,不能保存,,因此,必須現(xiàn)配現(xiàn)用,,用過一次即應(yīng)廢棄,。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純。器皿,、染色缸必須潔凈而干燥??梢赃x用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞,。上海提供糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨

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特染的應(yīng)用價(jià)值:現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍,,但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴,,對(duì)于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡(jiǎn)單的優(yōu)勢(shì),,在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值,。比如,當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)色素,,是黑色素還是含鐵血黃素以及當(dāng)組織中出現(xiàn)均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,,用組織化學(xué)技術(shù)區(qū)別起來很簡(jiǎn)單,所以組織化學(xué)技術(shù),,雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個(gè)很有實(shí)用價(jià)值的技術(shù)~安徽提供糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家本試劑盒常用于常規(guī)組織切片染色,,對(duì)于細(xì)胞,、極其薄的切片。

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糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水,。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘,?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用),。(3)蒸餾水洗,,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘,。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘,。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘,。(7)脫水,、透明、封蓋,。結(jié)果:糖原呈紅色,,細(xì)胞核呈藍(lán)色,。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液,。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,,攪拌加熱沸騰,,待冷卻至50℃過濾,,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉,。置于暗處,,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩,、過濾,,此時(shí)溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用,。溶液如顯淺紅色或草黃色,,染色效果較差,。

特殊染色方法選擇應(yīng)遵循:染色結(jié)果對(duì)比鮮明,、結(jié)果易保存、陽(yáng)性突出的染色方法,;突出的陽(yáng)性結(jié)果在于所選擇方法表達(dá)的色調(diào)及如何進(jìn)行背景的復(fù)染。結(jié)果能夠長(zhǎng)時(shí)間保存,、不褪色對(duì)于后續(xù)的調(diào)閱、科研,、論文均較為有利,。如顯示淀粉樣物質(zhì),甲基紫染色法雖然流程較為簡(jiǎn)單,,但結(jié)果不易保存,陽(yáng)性對(duì)比度相對(duì)不突出,;剛果紅染色法陽(yáng)性結(jié)果明顯,長(zhǎng)時(shí)間保存不褪色,,流程簡(jiǎn)便,,更是實(shí)用的方法。如顯示彈性纖維,,地衣紅染色染液雖配制較方便,,但結(jié)果對(duì)比度相對(duì)欠佳,,與其他幾個(gè)染色法相比,,多不選擇使用,。糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診,。

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糖原pas染色液配制及使用方法:1、常規(guī)固定,,常采用10%的福爾馬林,,常規(guī)脫水包埋。2,、石蠟切片脫蠟入蒸餾水,;冰凍切片直接入蒸餾水,。3、自來水沖洗2~3min,,再用蒸餾水浸洗2次。4,、入過碘酸溶液,,室溫放置,,一般不宜超過10min。5,、自來水沖洗1次,,再用蒸餾水浸洗2次。6,、入SchiffReagent,,置于室溫陰暗處浸染,。7、自來水沖洗10min,。8,、入蘇木素染色液,染細(xì)胞核,。9、酸性乙醇分化液分化,。_x005f_x005f_x005f_x000c_10、自來水沖洗10~15min,,更換蒸餾水清洗,,使其返藍(lán)。11,、逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,,中性樹膠封固,。取材必須新鮮,這一點(diǎn)對(duì)于從事細(xì)胞生物學(xué)研究尤為重要,。山東哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒廠家直銷

切取的材料應(yīng)小而薄,便于固定液迅速滲入內(nèi)部,。上海提供糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨

粘液染色法:粘液一般有以下幾點(diǎn)特性:(1)對(duì)鹽基性染料有親合力,,因此在HE染色中,、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。(2)對(duì)某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性,。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,,胃粘蛋白則除外,。(4)溶于弱堿溶液,。常用的粘液染色有以下幾種:1,、P.A.S染色法:操作方法同前,,結(jié)果,;中性粘液性物質(zhì),,某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,核呈藍(lán)色,。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點(diǎn)是能同時(shí)顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水,。(2)3%醋酸液洗2分鐘,,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘,。(3)蒸餾水洗,。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,,水洗,。(6)常規(guī)脫水,、封片上海提供糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨