RNA提取注意事項(xiàng):所有實(shí)驗(yàn)所用的泵頭、離心管等消耗品均要使用RNase-free的,;整個(gè)過程要在無RNase污染的條件下進(jìn)行,,通常可以在無菌操作臺(tái)中進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,并用75%的酒精進(jìn)行擦拭殺菌,,如有必要也可在實(shí)驗(yàn)前噴灑一些商用的RNase壓制劑;所有相關(guān)溶液的配制要使用RNase-free水或DEPC水(包括75%酒精也需要用無水乙醇與DEPC水配制),;溶液的配制使用移液器進(jìn)行操作,,切勿使用量筒等中間器皿;研缽,、研棒,、鑷子、剪刀等用錫箔紙包好后,,200℃干熱滅菌4h,;實(shí)驗(yàn)過程中一定要戴手套和口罩;異丙醇,、氯仿,、乙醇等試劑要使用未開封的,或者開封之后直接分裝至小容量離心管的,,以避免多次使用的交叉污染,;DNA/RNA Shield 也會(huì)保證取樣時(shí)微生物基因多樣性不會(huì)發(fā)生改變。杭州RNA提取試劑哪家便宜
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒優(yōu)勢:1,、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作步驟簡化快捷從時(shí)間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個(gè)樣RNA的提取,,較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時(shí)甚至更長的時(shí)間)。2,、高產(chǎn)量:多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強(qiáng)細(xì)胞裂解液,,保證后續(xù)RNA提取的得率。(能完全通過化學(xué)方法徹底裂解細(xì)胞讓RNA釋放完整,,并且有效成分能壓制內(nèi)源RNA酶的降解作用),。3、高純度:試劑盒的進(jìn)口吸附柱具有的專一吸附特性和強(qiáng)吸附力,。三管齊下保證所提取RNA的產(chǎn)量和純度,,前期得到的高質(zhì)量RNA才能保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)成功,,尤其是對(duì)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)等。珠海RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨常用RNA提取方法有:1TRIzol法,;2TRIzol+過柱法,;3CTAB+過柱法;4試劑盒法,。
RNA提取試劑的選擇:選擇合適的提取試劑是較重要的一步,。好的提取試劑在確保成功的同時(shí),操作方便且經(jīng)濟(jì)實(shí)用,。對(duì)于動(dòng)物組織,、簡單的植物材料、各種微生物,、培養(yǎng)細(xì)胞的totalRNA提取,,Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,,進(jìn)一步豐富了TakaraRNA提取的產(chǎn)品線,。該產(chǎn)品采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解系統(tǒng),無需苯酚氯仿抽提等步驟,,簡單快捷,。組織或細(xì)胞裂解后,提取操作光需20分鐘便可完成,。
新型土壤總RNA快速提取試劑盒:獨(dú)特裂解劑/裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,,然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶,然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱,,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸,、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫,。試劑盒特點(diǎn):離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,,可重復(fù)性好,。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端,。兼容性強(qiáng),,適用于各種不同的土壤、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,,也不需要乙醇沉淀等步驟,。快速,,簡捷,,單個(gè)樣品操作一般可在1小時(shí)內(nèi)完成。多次柱漂洗確保高純度,,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9以上,,可直接用于PCR,Northern-blot和各種酶切反應(yīng)~若比值較低,,說明有殘余蛋白質(zhì)存在,;比值太高,則提示RNA有降解,。
RNA提取試劑的選擇:對(duì)于富含多糖多酚的植物類組織提取是個(gè)難點(diǎn),,Takara精心研發(fā)的柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以輕松解決這個(gè)問題。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以高效地從各種簡單的植物組織材料(葉片,、莖,、幼苗等)、富含多糖多酚的植物組織材料(果實(shí),、種子等),、菌類提取高純度的TotalRNA,適用范圍普遍,。按照標(biāo)準(zhǔn)流程,,本試劑盒可以有效地提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可選步驟提取得到包含SmallRNA(<200nt)的TotalRNA,。試劑盒中包含了RNA提取所需的全部試劑,,無需額外購買其它試劑~總RNA提取試劑:自備新開封或?qū)iT氯仿,異丙醇,,75%乙醇,,DEPC處理水。合肥RNA提取試劑哪家便宜
RNA定量方法與DNA定量相似,。杭州RNA提取試劑哪家便宜
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒優(yōu)勢:1,、、無DNA污染可直接用于熒光定量PCR:目前市面上的試劑盒大多提出的RNA會(huì)出現(xiàn)DNA污染其結(jié)果嚴(yán)重影響后續(xù)實(shí)驗(yàn),,特別是非常靈敏的熒光定量PCR的實(shí)驗(yàn),。一些市面上單獨(dú)賣的去DNA污染的試劑,效果不穩(wěn)定,,去除DNA污染不徹底,。本產(chǎn)品操作簡單,去除DNA徹底,,得到的RNA樣品可直接用于熒光定量PCR,,反轉(zhuǎn)錄等各種后續(xù)實(shí)驗(yàn)。2,、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術(shù),,已成功用于葡萄,,中草藥等多糖含量高的樣品,成功用于棉花等多酚含量高的樣品,。另外華越洋還開發(fā)了糖類清理劑,,PCR壓制物清理劑,核酸提取優(yōu)化劑,,樣品核酸穩(wěn)定劑,,RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品。3,、適用材料普遍:尤其適合解決多醣多酚,,色素等次級(jí)代謝物豐富的植物樣本難題。杭州RNA提取試劑哪家便宜