鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：通過醋酸抽提,、氯化鈉沉淀,、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的,。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養(yǎng)器皿,，培養(yǎng)一些在普通細胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細胞,。也可用于制備三維膠,，模擬真實的生長環(huán)境，使細胞在三維環(huán)境中生長,。1,，在使用鼠膠原蛋白型包被的細胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細胞的貼壁和生長。1mg/ml濃度以上,，pH左右時可形成具有一定強度的三維膠,，檢查到NIH-3T3細胞在三維膠內(nèi)正常生長、PC-12細胞在三維膠表面正常生長,。使用方法：1,、細胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度：1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,。建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,。南京廣州鼠尾膠原

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中，制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解,。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜。5．從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥,。如果膠原溶液不是無菌的，這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。在接種細胞前用無菌的水漂洗,。太原正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家制備鼠尾膠原：將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡,。

含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升,，1mg/ml三維膠為例）：準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞，并放置于冰浴中,。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻,。再加入23ul10xPBS或10x培養(yǎng)液,，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時需要用pH試紙測試),。加入760ul的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,，加入適當體積的細胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

為了能夠從小鼠身上提取足夠的DNA,，要從它們身上取下足量的細胞用于實驗。為了盡可能減少對動物的傷害和方便試驗人員的操作,，剪下一小段鼠尾是一個不錯的選擇,。就讓我們來盤點一下「耗子尾汁」的三種用法↓↓↓鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴、在小鼠尾靜脈上劃一道小口,、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的「耗子尾汁」,。它可以用于監(jiān)測小鼠血液成分的變化，確認小鼠是否患上了糖尿病或者某些能夠改變小鼠的血糖等,。比起心臟和眼部取血,，實驗用鼠尾尖取血的取血量較小，但取血之后,，小鼠還能繼續(xù)下一步建?；蛘邔嶒?，完全沒有性命之憂。鼠尾膠原醋酸溶解：在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。

對于生物科研汪們來說,，大白鼠、小白鼠們簡直渾身是寶,，從毛發(fā),、皮膚，到心肝脾肺,，甚至各種排泄物,，都是我們重要的研究對象。尾巴,，自然也是,。所以耗子尾汁不僅存在，甚至是我們生物實驗中必不可少的實驗材料和實驗對象,。有不少人靠「耗子尾汁」發(fā)了CNS和頂刊,。沒有「耗子尾汁」，很多課題可能都沒辦法開展,。在以小鼠為模式生物進行科學(xué)研究的實驗室中,，日常和基本的一個實驗就是提取它們的遺傳物質(zhì)—DNA（脫氧核糖核酸）進行基因型鑒定，檢測這些小動物的基因組中是否含有特定的DNA,。可以理解為給小動物做核酸檢測,。將黏稠的膠體溶液進行高速冷凍離心處理,。太原正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家

酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料，從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,。南京廣州鼠尾膠原

I型鼠尾膠原是借鑒NavneetaRajan,JasonHabermehl法,，經(jīng)過乙酸抽提、離心,、滅菌,、透析等步驟制備得到的高純度、高活性膠原蛋白,，屬于醫(yī)藥級別產(chǎn)品,，可用于包被細胞培養(yǎng)器皿（單分子層包被），適合多種類型細胞的貼壁如肝臟細胞,、神經(jīng)節(jié)細胞,、胚胎細胞、肌細胞,、肺細胞,、神經(jīng)鞘細胞等,。I型膠原蛋白包被細胞培養(yǎng)板，規(guī)格為6/24孔板,，表面經(jīng)I型膠原蛋白包被,，可以很好的降低蛋白質(zhì)的吸附。使用這種細胞培養(yǎng)板培養(yǎng)細胞,，可以獲得良好的細胞貼壁率,，細胞增殖速度快，形態(tài)均一,，細胞培養(yǎng)成功率高,。南京廣州鼠尾膠原