含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,,并放置于冰浴中,。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻,。再加入23ul10xPBS或10x培養(yǎng)液,混勻(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。一種基于鼠尾膠原蛋白:根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料。寧波武漢鼠尾膠原
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,,其中每3個氨基酸殘基形成一圈螺旋。3條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋,。這樣的螺旋稱為3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,,這些棒狀分子首尾相連,,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃)。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時程記錄,,并且制作簡便,,成本低廉。廣州正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家手持尾巴,,用止血鉗夾住鼠尾的較高,,折斷尾骨后拉出尾腱。
鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用,,同時它也是一種天然的黏附劑,當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,,制備細(xì)胞爬片時,,可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,,自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中,。通過本實(shí)驗(yàn)可掌握鼠尾膠原的制備方法,以及如何切割小玻片,,并利用鼠尾膠原將其固定于培養(yǎng)瓶內(nèi),。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料:大鼠尾巴、剪刀,、鑷子,、止血鉗、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平、生理鹽水,、75%酒精,、0.1%醋酸溶液、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆、鼠尾膠原,。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:1,、制備鼠尾膠原。2、切割小玻片,。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。
除了讓細(xì)胞更好貼上去,,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長環(huán)境,讓細(xì)胞在更真實(shí)地條件下進(jìn)行生長,。當(dāng)然,除了這些,,耗子尾汁還能做到很多事情,,只需要打開網(wǎng)站——知網(wǎng),輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,,制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料,。蘇州君欣生物科技有限公司氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌,。
鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究,。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,,10,,100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后,,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),,應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),,流式細(xì)胞技術(shù)檢測心肌細(xì)胞凋亡率,,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達(dá)。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),。蘇州正規(guī)鼠尾膠原銷售廠家
成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡便,成本低廉。寧波武漢鼠尾膠原
一種基于鼠尾膠原蛋白:1.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,其特征在于凍干止血材料中,,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?%2%1%,余量的水,。2.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,其特征在于鼠尾膠原蛋白來源于各品系SFP級大鼠鼠尾。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,其特征在于劑型為創(chuàng)可貼,。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于劑型為噴霧劑,。寧波武漢鼠尾膠原