細胞凍存注意事項：1、細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml－15m培養(yǎng)液,，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附,。2,、復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中，分裝過多,，細胞濃度過低,，不利于細胞的貼壁。3,、加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大,，就會影響細胞生長,，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,，還有一個說法是1％,。所以如果你的凍存液的濃度是10％DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度,。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能：既適用于一般培養(yǎng)細胞的凍存，也適用于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞的凍存,。杭州貴陽無血清細胞凍存液

無血清快速細胞凍存液,，是一種新型的快速凍存細胞的保護液，可將細胞置于-80^C直接冷凍保存,。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白（Naturalantifrereprotein）,，不含動物來源的血清成分，能夠有效提高細胞凍存活率和復(fù)蘇活力,，減少各類病毒,、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細胞安全,，能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細胞的凍存需求,。無血清凍存液使用方法：1、收集懸浮細胞或貼壁細胞,，離心去除上清培養(yǎng)液,。2、加入適量的細胞凍存液,，重懸細胞,，調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL。3,、將加有凍存液的細胞懸液分裝至凍存管中,。4、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存,。5,、儲存條件：2-8C保存，年有效：-20C保存,，兩年有效,。寧波長沙無血清細胞凍存液不同的凍存方法替代了不同的凍存體系。

凍存方式：按照凍存保護液在凍結(jié)后是否形成冰晶來劃分,，凍存方法可分為非玻璃化和玻璃化凍存兩種,。非玻璃化凍存是利用各種溫級的冰箱分階段降溫至-70℃～-80℃，然后直接投入液氮進行保存,；或者是利用電子計算機程控降溫儀以及利用液氮的氣,、液，按一定的降溫速率從室溫降至-100℃以下,，再直接投入液氮保存的方法,。以該種方法凍結(jié)的細胞懸液或多或少都有冰晶的形成。玻璃化凍存則是指利用多種高濃度的冷凍保護劑聯(lián)合形成的玻璃化冷凍保護液保護懸浮細胞,，直接投入液氮進行凍存的方法,。以該中方法凍結(jié)的細胞懸液沒有冰晶的形成,。但目前細胞凍存較常用的仍是前一種方法。

細胞凍存秘籍：細胞凍存對于大多數(shù)動物細胞,，通常每分鐘下降-1至-3℃,。控制冷卻過程的較好方法是使用程序降溫系統(tǒng),。如果沒有程序降溫系統(tǒng),，可以使用程序降溫盒，然后將其置于-70℃至-90℃冰箱中過夜,。雖然這種方法適用于許多細胞系,，但不能提供可控的，均勻的或可重復(fù)的冷卻,，不建議用于珍貴細胞,。無論使用哪種冷卻方法，重要的是快速高效地將其傳輸?shù)捷^終存儲位置,。如果轉(zhuǎn)移不能立即完成,，可以將小瓶置于干冰上一段時間,。這樣可以避免在轉(zhuǎn)移過程中發(fā)生溫度升高而損害細胞,。在這個轉(zhuǎn)移過程中溫度升高是解凍后影響細胞活力的主要原因。無血清細胞凍存液,，2-8℃保存即可,，無需再進行分裝。

無血清細胞凍存液對比含血清細胞凍存液的優(yōu)勢：傳統(tǒng)的細胞凍存液是使用培養(yǎng)基,、血清和DMSO按照一定的比例混合,，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%,，統(tǒng)稱為含血清細胞凍存液,。含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,，然后移至-20℃冰箱30分鐘,，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時（或隔夜），較后才移至液氮罐中進行長期的儲存,。（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時,，以防止冰晶過大，造成細胞大量的死亡,。）無血清細胞凍存液使用方法：加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,。蕪湖正規(guī)無血清細胞凍存液推薦廠家

無血清凍存液使用方法：將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。杭州貴陽無血清細胞凍存液

含血清細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題：1.凍存細胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液,，此步可省略),。2.需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮）,，步驟繁瑣，耗時耗力,。3.含血清,，細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風(fēng)險更高,。4.血清批次,、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存,，且不能原位（如孔板）凍存,。Cellregen無血清細胞凍存液是不含血清和動物源成分，含DMSO,、糖類,、氨基酸等成分的一款通用型細胞凍存液。Cellregen無血清細胞凍存液的凍存方法是：將細胞凍存懸液（凍存管或孔板）直接放置-80℃冰箱長期保存,。杭州貴陽無血清細胞凍存液