外泌體提?。?,、過(guò)濾。超濾膜也可用于分離外泌體。根據(jù)外泌體的大小,，從蛋白質(zhì)和其他大分子中分離外泌體,。較常見(jiàn)的過(guò)濾膜具有0.8μm,、0.45μm或0.22μm的孔徑,，可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌體,，也有設(shè)計(jì)成微柱多孔硅纖毛結(jié)構(gòu)以分離40-100nm外泌體：不過(guò),，該方法由于過(guò)濾膜的粘附，可能會(huì)損失外泌體,，并且過(guò)濾時(shí)的壓力和剪切力,，可能會(huì)使外泌體變形受損。2,、基于聚合物的沉淀技術(shù),。基于聚合物的沉淀技術(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合,，在4℃溫育并低速離心,。用于聚合物沉淀的較常見(jiàn)聚合物之一是聚乙二醇（PEG）,。用這種聚合物沉淀具有許多優(yōu)點(diǎn),，包括對(duì)分離的外泌體影響小,、pH中性等。目前大多數(shù)快速分離外泌體的商品化試劑盒都是基于此方法,。然而基于聚合物的沉淀方法可能會(huì)同時(shí)分離非囊泡污染物（包括脂蛋白）而且,，聚合物材料的混雜可能會(huì)影響下游分析靜置10～15分鐘，留取沉淀物備用,。蕪湖外泌體提取試劑單價(jià)

人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,，包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞,、血小板,、平滑肌細(xì)胞等。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),，外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸、脂類(lèi)等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性,。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過(guò)以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,，進(jìn)而靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,，剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，從而細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。有報(bào)道稱(chēng)一些外泌體膜上蛋白在其來(lái)源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出,。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA,。昆明外泌體提取試劑直銷(xiāo)廠家獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣,，耗時(shí),。

外泌體（exosomes）是活細(xì)胞經(jīng)過(guò)"內(nèi)吞-融合-外排"等一系列調(diào)控過(guò)程而形成的膜性囊泡，來(lái)源于晚期核內(nèi)體(也稱(chēng)為多囊泡體),，直徑約為30-150nm,，密度在1.13-1.21g/ml，天然存在于血液,、唾液,、尿液及母乳等體液中，同時(shí)外泌體也存在于組織和細(xì)胞間隙中,。人體中幾乎所有類(lèi)型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體,，人體中大約有1014個(gè)外泌體,，大約平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè)。外泌體中含有核酸（DNA,、miRNA,、lncRNA、mRNA,、tRF等）,、蛋白和脂類(lèi)，在細(xì)胞間物質(zhì)和信息轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用,，研究表明其在干細(xì)胞,、免疫調(diào)控、瘤轉(zhuǎn)移,、血管生成以及生物標(biāo)志物等領(lǐng)域都發(fā)揮著不可替代的作用

外泌體的提取方法,，先用含無(wú)外泌體血清的培養(yǎng)基對(duì)人脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng)，這樣可使干細(xì)胞處于正常生長(zhǎng)狀態(tài),，不會(huì)被克制生長(zhǎng)增殖,，其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體，然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進(jìn)行低速差速離心(即先一離心處理,、再第二離心處理)以去除細(xì)胞及其碎片,，用100kd超濾管對(duì)低速差速離心后的離心液進(jìn)行超濾濃縮得到外泌體濃度更高的超濾液，將超濾液經(jīng)過(guò)第三離心處理去除雜質(zhì)后直接用0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾除菌,，過(guò)濾掉粒徑為220nm以上的物質(zhì),，進(jìn)一步得到含顆粒粒徑小于220nm的濃縮液，因超濾濃縮處理和第三離心處理使得液體量濃縮,，這樣過(guò)濾除菌效率得到較大提高,，較后將濃縮液進(jìn)行超速離心的第四離心處理分離提取到外泌體。同時(shí)可獲得高純度和高回收率的外泌體——如新西蘭IZON開(kāi)發(fā)的系列的外泌體排阻劑,。

外泌體的提取,、分離方法：免疫親和層析法。免疫親和層析法是利用生物體內(nèi)存在的抗原,、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)行分離的方法,，主要用于生物大分子的分離、純化,。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體,，如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合,，只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識(shí)別,，這使得提取的外泌體純度高，但是產(chǎn)量低,。Zarovni等分別用超速離心,、密度梯度離心和免疫層析法,，從血漿和細(xì)胞上清中提取外泌體蛋白，結(jié)果表明,，免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標(biāo)記蛋白(Alix,、CD9、CD63),，同時(shí),，ELISA和PCR結(jié)果也證明了該方法的可行性。外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：無(wú)需耗時(shí)的超速離心,，過(guò)濾或特殊注射器。蕪湖外泌體提取試劑單價(jià)

也可以作為治病手段,，未來(lái)有可能作為藥物的天然載體用于臨床治病,。蕪湖外泌體提取試劑單價(jià)

外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣,、硬件要求高,、操作難度大。李記生物自主開(kāi)發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,，組分經(jīng)過(guò)優(yōu)化處理,，適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清,、血漿,、尿液及其他體液（腦脊液、腹水,、羊水,、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取，并搭配純化過(guò)濾裝置,，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒,。注意事項(xiàng)：1.對(duì)于待測(cè)樣品粘度過(guò)大時(shí)，可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理,。2.當(dāng)血清,、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,，收獲的外泌體顆粒無(wú)法通過(guò)EPF柱純化時(shí),，可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過(guò)EPF柱離心。蕪湖外泌體提取試劑單價(jià)