RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子,。一個核糖核苷酸分子由磷酸,,核糖和堿基構(gòu)成。在細胞中,,RNA種類繁多,。根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類,,即tRNA,、rRNA,以及mRNA,。mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板,;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運者;rRNA是組成核糖體的部分,,而核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所,。細胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,像是組成剪接體(spliceosome)的snRNA,,負責rRNA成型的snoRNA,,以及參與RNAi作用的miRNA與siRNA等,可調(diào)節(jié)基因表達,。RNA提取試劑注意事項:為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。深圳RNA提取試劑銷售廠家
總RNA提取試劑是一種快速從組織細胞中提取總RNA的單相試劑,。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,,RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離,,隨后用異丙醇沉淀RNA,。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì)。純化的總RNA可用于RT-PCR,、NorthernBlot,、RNA酶保護、Poly(A)mRNA純化,、體外翻譯等實驗,。是一種快速從組織細胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性,;加入氯仿后離心,,RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離,隨后用異丙醇沉淀RNA,。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì),。純化的總RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot,、RNA酶保護,、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實驗合肥廣州RNA提取試劑細胞質(zhì)和細胞核RNA提取試劑盒特點:方便快捷的離心柱操作方式,。
病毒RNA提取試劑盒可以快速從全血,、血清、血漿,、口腔拭子等生物液體中提取病毒RNA,。在此試劑盒中,使用了核酸助沉劑--carrierRNA,。核酸助沉劑不光有利于微量RNA的沉淀,,同時也可以減少RNA的降解。本試劑盒操作簡捷方便,。30-40min就可以完成一個樣品的提取,,得到純凈的RNA。RNA可以使用RT-PCR,real-timeqPCR,Northernblot,Dotblot,poly(A)+selection,體外翻譯,,和分子克隆等實驗,。此外,裂解液VLS也是病毒RNA樣品的一個很好的保存液,。儲存在裂解液中的病毒RNA(在病毒樣品中加入3倍體積裂解液后劇烈渦旋裂解樣品)可以在-20℃情況下穩(wěn)定至2個月,;在-80℃情況穩(wěn)定半年;同時,儲存在裂解液中的樣品在運輸過程中,,也可以在4℃穩(wěn)定一日,;-20℃穩(wěn)定一周。
酵母RNA的提取方法:稀堿法是屬化學破壁法,,其方法是在一定堿濃度下,,使構(gòu)成細胞壁的蛋白質(zhì),、脂肪及糖的化合物得到水解,從而破壞細胞壁,,此法對堿的濃度及提取溫度要求比較嚴格,堿的濃度不可過濃,,應控制在1%,,并且對提取溫度也有一定的要求,提取時間短,。因為在過分劇烈的條件下,,容易使核糖核酸分子內(nèi)的酯鍵斷裂,使核糖核酸降解而影響收得率,。酵母菌作為重要的模式生物,,是遺傳學和分子生物學的重要研究材料。由于酵母菌的細胞壁成分復雜,,且較原核生物厚,,難于破碎,因此酵母菌總RNA的抽提純化要比原核生物總RNA的抽提純化困難的多,。如何有效地破碎細胞壁并保證RNA的完整性,,是獲得高質(zhì)量酵母菌總RNA的關(guān)鍵問題??俁NA的提取方法還有很多,,如Trizol法、異硫氰酸胍法,、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法,、尿素法、十二烷基硫酸鈉(SDS)法,、熱硼酸鹽法等,,這些方法各有優(yōu)缺點,不同的方法適用于不同類型的材料,。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點:配有高效的DNaseⅠ,,可有效去除DNA污染。
RNA提取關(guān)鍵點病菌RNA在提取后也仍然具有傳染性,,在提取時,,實驗人員需要佩戴口罩和手套等各種防護裝備,以防實驗室污染,。而有種「自動滅活」的方法,,在更加便利的同時,也能更好的保護實驗人員的安全,。許多樣品中含有高水平的RNase,,這種酶也會加速RNA的降解,。為了使這種酶對降解的影響較小化,較好在采集時就穩(wěn)定好樣本中的RNA,。這種情況下,,可以在裂解緩沖液中立即進行溶解。比如可以通過TRIzol?,、RNA裂解緩沖液等使RNase失活,,然后再處理樣本。另外,,再采集樣本之后馬上加入DNA/RNAShield,,可以快速降解掉RNase等蛋白物質(zhì)。當然,,DNA/RNAShield也會保證取樣時微生物基因多樣性不會發(fā)生改變,。RNA提取試劑:能夠作RNA印跡分析、斑點雜交,、poly(A)+選擇,。合肥廣州RNA提取試劑
總RNA提取試劑:適用于植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細胞等樣品中提取總RNA,。深圳RNA提取試劑銷售廠家
RNA提取注意事項:1,、組織樣本要盡可能的新鮮,避免反復凍融,。2,、提取時組織要充分研磨,組織量不宜過少,,更不宜過多,。3、加入裂解液后應給予充分的孵育時間,,使樣本充分裂解,。4、在用Trizol法提取時,,分層后吸取上清的原則是“寧愿少吸,,不能多吸”,千萬不能提取到中間層,,否則會導致嚴重的基因組DNA污染,。5、洗滌時洗滌液應充分浸潤到管壁的四周,,確保洗滌徹底,。6、柱式提取法,,洗滌完后除了對柱子進行空離后,,還應當將吸附柱置于超凈臺內(nèi)吹風5~10min,,使有機溶劑充分揮發(fā)干。7,、柱式法較后洗脫時候,,當加入DEPC水后還應孵育3~5min,或者提前將DEPC水加熱至60℃,,可提高洗脫得率,。傳統(tǒng)的Trizol裂解異丙醇沉淀法較后RNA是用DEPC水溶解沉淀,則應當給予適當溶解時間,,并用泵頭不斷吹吸離心管底部。深圳RNA提取試劑銷售廠家