眾所周知,,RNA提取是一項(xiàng)困難的工作,。常見的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染,。此外,,不同的樣品類型有自己獨(dú)特的特性,需要特別注意,。例如,,微生物(如革蘭氏陽性/陰性細(xì)菌,、菌類、古生菌等)的細(xì)胞壁堅(jiān)硬,,不易被化學(xué)和酶解,。其他樣本類型,如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類,、腐殖酸/黃腐酸,、單寧酸等),可與RNA共沉淀,,并可壓制下游分析,,如RT-qPCR。RNA是不穩(wěn)定的,,極易降解,。許多樣品含有高水平的RNase,會(huì)快速降解RNA,。為了使之較小化,,較好在采集時(shí)穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍,、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室,。然而,這些方法也有缺點(diǎn),,如核酸的凍融損傷,,并不是所有的研究人員在采集樣品時(shí)都能立即使用這些方法。植物花總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,,配合特殊的提取緩沖液,。珠海正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家
血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對(duì)血清、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的,,利用吸附柱法從血清,、血漿樣品中簡(jiǎn)單快捷提取高純度高質(zhì)量的miRNA。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結(jié)合液miRBP2具有高效裂解及提取效果,。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質(zhì)膜材料,對(duì)RNA尤其是smallRNA(<200nt)具有結(jié)合能力,,與常用的抗凝劑(包括肝素,、EDTA、檸檬酸鈉,、草酸鈉)兼容,,得到的miRNA可直接用于RT-PCR和Northern雜交等后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作。普通植物總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,,可以從普通植物的根,、莖,、葉中快速提取總RNA,30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程,,提取的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質(zhì)的污染,,適用于RT-PCR,、qRT-PCR、芯片分析,、Northernblot雜交等實(shí)驗(yàn)??俁NA吸附柱保證RNA提取速度快,,提取效率高,。高效去除植物組織中的色素,、酚類等雜質(zhì),提取RNA的純度高,,產(chǎn)量大南昌RNA提取試劑廠家推薦拭子RNA提取試劑的選擇,?離心柱的硅膠膜RNA吸附性能好、裂解液細(xì)胞裂解能力強(qiáng),。
RNA提取關(guān)鍵點(diǎn)病菌RNA在提取后也仍然具有傳染性,,在提取時(shí),實(shí)驗(yàn)人員需要佩戴口罩和手套等各種防護(hù)裝備,,以防實(shí)驗(yàn)室污染,。而有種「自動(dòng)滅活」的方法,在更加便利的同時(shí),,也能更好的保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員的安全,。許多樣品中含有高水平的RNase,這種酶也會(huì)加速RNA的降解,。為了使這種酶對(duì)降解的影響較小化,,較好在采集時(shí)就穩(wěn)定好樣本中的RNA。這種情況下,,可以在裂解緩沖液中立即進(jìn)行溶解,。比如可以通過TRIzol?、RNA裂解緩沖液等使RNase失活,,然后再處理樣本,。另外,再采集樣本之后馬上加入DNA/RNAShield,,可以快速降解掉RNase等蛋白物質(zhì),。當(dāng)然,DNA/RNAShield也會(huì)保證取樣時(shí)微生物基因多樣性不會(huì)發(fā)生改變,。
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒:1,、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術(shù),已成功用于葡萄,,中草藥等多糖含量高的樣品,,成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開發(fā)了糖類清理劑,,PCR壓制物清理劑,,核酸提取優(yōu)化劑,樣品核酸穩(wěn)定劑,,RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品,。2、適用材料普遍:尤其適合解決多醣多酚,,色素等次級(jí)代謝物豐富的植物樣本難題,。昆蟲RNA柱式提取試劑盒特點(diǎn):操作簡(jiǎn)單快速,處理一個(gè)樣品只需要約十分鐘,。RNA純度高,,平均OD260/280一般都在2.0左右,能夠有效去除大多數(shù)昆蟲中的多糖污染,。適用于各種昆蟲組織,,每100mg組織能提取到20~30μg總RNA。拭子RNA提取試劑的選擇,?如果離心柱硅膠膜吸附能力不好,,裂解液和洗脫液沒有經(jīng)過很好的優(yōu)化。
植物RNA快速提取試劑盒:是一種單相RNA快速提取試劑盒,,可高效裂解堅(jiān)固的植物細(xì)胞并強(qiáng)烈壓制RNA酶活性,。細(xì)胞破碎之后,植物多糖立即被PlantRNAtrip獨(dú)特的成分結(jié)合,。離心抽提步驟將RNA與滅活的RNA酶,、蛋白、基因組DNA污染分離,,并清理植物多糖多酚以及次生代謝產(chǎn)物,。在RNA沉淀之前加入PlantRNAAid清理植物多酚,并清理殘余的多糖,。提取可在60分鐘內(nèi)完成,,所提取的RNA純度極高,不含DNA和多糖和多酚污染,可用于構(gòu)建cDNA文庫,、RT-PCR,、Northern轉(zhuǎn)印分析、Poly(A)mRNA純化,、體外翻譯,、和RNA酶保護(hù)實(shí)驗(yàn)。移去水相后,,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,,加入異丙醇沉淀可從有機(jī)相得到蛋白質(zhì)。南昌RNA提取試劑廠家推薦
tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者,。珠海正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家
RNA提?。侯A(yù)備工作(1)塑料制品:盡量使用一次性無菌塑料制品。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品,,如沒有開封使用過,,通常不必再處理。處理的步驟如下:O在玻璃燒杯中注入去離子水,,加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%(DEPC-H2O),。(DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強(qiáng)的劇毒物,須在通風(fēng)櫥中小心使用)O將待處理的塑料制品放入一個(gè)可以高溫滅菌的容器中,,注入DEPC-H2O,,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中,在通風(fēng)柜中37℃或室溫下處理過夜,。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中,,將裝有DEPC-H2O處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口,高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘,。O滅菌塑料制品烘烤干燥,,置潔凈處備用。(2)玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時(shí)以上,。珠海正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家