外泌體研究的主要應(yīng)用:外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,,其可參與到機體免疫應(yīng)答,、抗原提呈、細胞遷移,、細胞分化,、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生長與侵襲,。一些病癥,。一些病癥轉(zhuǎn)移。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血?。ˋML)細胞的增殖,、遷移和壓制細胞凋亡。治病靶標,。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,,從而特異性高效靶向至胰腺病細胞,以明顯降低RAS活化,、病細胞增殖和轉(zhuǎn)移過程,。免疫。β細胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細胞外,,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細胞,,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。心血管,。外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細胞的損傷促進動脈硬化,。分子標記。疾病診斷,。在酒精性肝病,、NASH、菌類性肝炎,、藥物性肝損傷和肝細胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升,。預(yù)后標志。機械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等,因此發(fā)表文章時易受質(zhì)疑,。鄭州正規(guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話
近年來,,隨著外泌體研究的不斷深入,它的應(yīng)用已經(jīng)涉及一些病癥治病領(lǐng)域,、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域,、寄生蟲領(lǐng)域;臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng),、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等,。外泌體來源及內(nèi)含物。幾乎所有類型的細胞都可以分泌外泌體,,同時外泌體也普遍存在于體液中,,包括血液、眼淚,、尿液,、唾液、乳汁,、腹水等,。目前研究發(fā)現(xiàn)外泌體中富含核酸(microRNA、lncRNA,、circRNA,、mRNA、tRNA等),、蛋白,、膽固醇等。外泌體的表面marker主要有CD63,、CD81,、CD9、TSG101,、HSP27等,。外泌體鑒定。目前對于外泌體的鑒定主要有四種方法:透射電子顯微鏡(TEM),、Nanosight,、WesternBlot、流式細胞術(shù),。溫州正規(guī)外泌體提取試劑銷售廠家用于外泌體提取的體液收集注意事項:操作要輕柔迅速,。
外泌體與肺病預(yù)后:外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標志物時發(fā)現(xiàn),,外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升,。此外,還有研究表明,低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率,。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn),,NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,,其中l(wèi)et-7f,、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調(diào),進一步研究發(fā)現(xiàn),,let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,,高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān)。
外泌體與神經(jīng)退行性疾?。和饷隗w可能促進或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集,。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測到Tau和Aβ蛋白。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn),。PD病人腦脊液外泌體可檢測到α-synuclein,,ALS病人外泌體中也可以檢測到SOD1或TDP-43。外泌體與疾病診斷(應(yīng)用潛能):外泌體生成機制表明,,通過分析外泌體的組分,,可以幫助識別其來源的細胞類型。這一特性已被應(yīng)用于開發(fā)心血管疾病,,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,也在肝腎肺相關(guān)疾病中進行研發(fā)測試,。將沉淀物用PBS緩沖液進行懸浮,,使外泌體懸浮于液體上層靜置10~15分鐘,留取沉淀物備用,。
外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷:近年來,,高通量質(zhì)譜分析被普遍地應(yīng)用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究,這為我們揭示了更多具有生物標志物價值的分子,。Birgitte等采用微陣列芯片技術(shù)研究了431例肺病患者和150例對照者血漿外泌體中的蛋白表達情況,,發(fā)現(xiàn)CD151、CD171和TSPAN8這三種蛋白表達不光能區(qū)分一些病癥與正常組織,,同時也能區(qū)分各種肺病的組織亞型,。此外,聯(lián)合應(yīng)用這三種蛋白診斷NSCLC的AUC達到0.74,。Clark等采用納升液聯(lián)用技術(shù)(nano-ESI-LC-MS/MS)分析了來自正常支氣管上皮細胞系和兩個攜帶NSCLC細胞系的外泌體的蛋白表達譜,,從中篩選出如細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子、溶酶體膜糖蛋白2等多種存在顯著性差異表達的蛋白,,同時檢測分析這些蛋白有助于提高NSCLC診斷的敏感性和特異性,。由于國內(nèi)有關(guān)外泌體提取試劑的缺乏,我國對外泌體的研究還基本依賴于過程繁瑣的超速離心和進口提取試劑盒。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,,雜蛋白較多,。杭州外泌體提取試劑平均價格
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所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,,且外泌體天然存在于體液中,,包括血液、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運載物”和相應(yīng)功能的精確分子機制剛剛開始研究,。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細胞間通訊,,對外泌體的研究興趣日益增長,,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。1983年,,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn),,1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。鄭州正規(guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話