糞便總RNA快速提取試劑盒:獨(dú)特裂解劑/裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,,然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶,,然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱,,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸,、細(xì)胞代謝物,、蛋白等雜質(zhì)去除,,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫,。試劑盒特點(diǎn):離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好,??朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端,。兼容性強(qiáng),,適用于各種不同的土壤,、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,,也不需要乙醇沉淀等步驟??焖伲喗?,單個樣品操作一般可在1小時(shí)內(nèi)完成,。多次柱漂洗確保高純度,,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9以上,可直接用于PCR,,Northern-blot和各種酶切反應(yīng)??俁NA提取試劑,適用于動植物細(xì)胞或組織及細(xì)菌的總RNA抽提,,可有效防止RNA在提取過程中的降解,。天津正規(guī)RNA提取試劑廠家直銷
血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清,、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的,,利用吸附柱法從血清,、血漿樣品中簡單快捷提取高純度高質(zhì)量的miRNA。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結(jié)合液miRBP2具有高效裂解及提取效果,。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質(zhì)膜材料,,對RNA尤其是smallRNA(<200nt)具有結(jié)合能力,與常用的抗凝劑(包括肝素,、EDTA、檸檬酸鈉,、草酸鈉)兼容,得到的miRNA可直接用于RT-PCR和Northern雜交等后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作,。普通植物總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,,可以從普通植物的根、莖,、葉中快速提取總RNA,,30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程,提取的總RNA純度高,,沒有DNA和蛋白質(zhì)的污染,,適用于RT-PCR,、qRT-PCR,、芯片分析,、Northernblot雜交等實(shí)驗(yàn)??俁NA吸附柱保證RNA提取速度快,提取效率高,。高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質(zhì),,提取RNA的純度高,,產(chǎn)量大貴陽RNA提取試劑廠家供應(yīng)血漿/血清RNA提取試劑盒:高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質(zhì),,提取RNA的純度高,,產(chǎn)量大,。
RNA的提取:眾所周知,,Trizol是一種RNA提取試劑,,內(nèi)含異硫氰酸胍和酚等物質(zhì),,能迅速破碎細(xì)胞和溶解細(xì)胞中的其他成分,壓制細(xì)胞釋放出核酸酶,,維持細(xì)胞中RNA的穩(wěn)定性,,我們可以在反應(yīng)物中加入Trizol后搖勻,,在加入氯仿離心,,這樣的話我們的RNA就進(jìn)入了水相中,再用異丙醇沉淀水相中的RNA,,即可達(dá)到提取總RNA的目的了。首先我們需要稱取一定量的預(yù)處理好的廢酵母配10%左右的酵母溶液,在一定溫度下,加入一定濃度的氯化鈉,之后加入NaOH溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)的pH,攪拌抽提一定時(shí)間后,離心分離上清液,調(diào)節(jié)pH至等電點(diǎn),經(jīng)酒精沉淀獲得核糖核酸,用水定容至100mL取1m適當(dāng)稀釋,調(diào)pH7.0,這樣的話RNA就出現(xiàn)了,,分別測定吸光值A(chǔ)260和A280并計(jì)算A260/A280,,就可以測定RNA的提取率了。當(dāng)然啦,,我們還可以進(jìn)行深入研究,,如測定Nacl的濃度,,PH的大小,,以及抽提時(shí)間對RNA提取率的影響啦,。
眾所周知,RNA提取是一項(xiàng)困難的工作,。常見的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染,。此外,不同的樣品類型有自己獨(dú)特的特性,,需要特別注意,。例如,,微生物(如革蘭氏陽性/陰性細(xì)菌、菌類,、古生菌等)的細(xì)胞壁堅(jiān)硬,不易被化學(xué)和酶解,。其他樣本類型,如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類,、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等),,可與RNA共沉淀,并可壓制下游分析,如RT-qPCR,。RNA是不穩(wěn)定的,極易降解,。許多樣品含有高水平的RNase,,會快速降解RNA。為了使之較小化,,較好在采集時(shí)穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍,、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室,。然而,,這些方法也有缺點(diǎn),如核酸的凍融損傷,,并不是所有的研究人員在采集樣品時(shí)都能立即使用這些方法??俁NA提取試劑:自備新開封或?qū)iT氯仿,異丙醇,,75%乙醇,DEPC處理水,。
RNA提取濃度不高或質(zhì)量不佳原因及解決辦法:1,、RNA降解:可能是提取樣本本身降解,或者是在提取過程中導(dǎo)致的降級,;應(yīng)當(dāng)盡可能使用新鮮樣本進(jìn)行RNA提取,采集的樣本應(yīng)當(dāng)及時(shí)置于液氮或者-80℃冰箱凍存,,并減少反復(fù)凍融。在RNA提取過程中應(yīng)當(dāng)使用RNase/DNasefree的吸頭,、離心管及其他材料,提取過程盡可能的快,,提取后的RNA應(yīng)置于冰盒上并及時(shí)放于-80凍存。如提取后的RNA需要進(jìn)行凝膠電泳檢測,,則應(yīng)提取好后立刻進(jìn)行電泳,電泳緩沖液應(yīng)更換新配制的,。2、鹽及有機(jī)溶劑殘留:提取試劑中含有酚及胍鹽,,洗滌液中含有乙醇,,在提取過程中裂解液吸棄不徹底,洗液沒有充分晾干導(dǎo)致的,,殘留的鹽及有機(jī)溶劑對后續(xù)的逆轉(zhuǎn)錄和PCR均存在不同程度的壓制作用,因此在提取過程中應(yīng)充分去除組織裂解液,,洗滌時(shí)應(yīng)充分,,使管壁四周均能被洗滌到,,另外管子空離和吹風(fēng)是必須的步驟,會進(jìn)一步降低有機(jī)物殘留,。好的試劑盒價(jià)格比較貴,在實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要來定奪試劑盒的使用,。重慶正規(guī)RNA提取試劑廠家供應(yīng)
細(xì)菌總RNA提取試劑盒:本試劑盒可以快速從細(xì)菌體內(nèi)提取總RNA。天津正規(guī)RNA提取試劑廠家直銷
那RNA到底是什么呢,?它又和基因有什么關(guān)系呢,?基因的表達(dá).其實(shí)人體內(nèi)的RNA主要和基因的表達(dá)有關(guān)系,。不知道你思考過這么一個問題沒有,,基因是我們體內(nèi)的遺傳物質(zhì),,它如何來表達(dá)自己呢,?事實(shí)上,,這個過程是需要用到RNA的,。具體來說是這樣的,由于染色體是存在于細(xì)胞核當(dāng)中的,,而根據(jù)上述的內(nèi)容,,我們知道,,基因其實(shí)是存在于染色體上的,。如果一個基因要表達(dá),,只有兩種辦法,,一個就是它親自到細(xì)胞核外去完成一切的生命活動,,另一個辦法就是找個幫手來完成,。而我們的基因選擇的是第二條路徑,,也就是找一個幫手,這個幫手就是RNA,,更準(zhǔn)確地說是信使RNA(mRNA),基因會通過轉(zhuǎn)錄,,利用堿基互補(bǔ)原則,,合成一條信使RNA,,這個過程都是在細(xì)胞核內(nèi)部完成的。天津正規(guī)RNA提取試劑廠家直銷