鼠尾膠原凝膠體在皮膚細胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用：在國外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細胞的材料和方法r1]實驗材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細胞生長因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細胞的分離和細胞懸液的制備:2～3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細胞懸液,加入細胞培養(yǎng)液.用梯度離心收集細胞,以3xi0/m]濃度接種平皿.(3)鼠尾膠原凝膠體的制備:具體方法參見文獻c13o(4)培養(yǎng)皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴入~35mm培養(yǎng)皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中30rain,散盡剩余氨氣,。加入適當體積的細胞培養(yǎng)液,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。深圳鼠尾膠原廠家直銷

鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,，但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構(gòu)建,，對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究,。目的：探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法：將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿（實驗組）和普通培養(yǎng)皿（對照組）中,，并且均用0,，10，100μmol/LH2O2誘導(dǎo),。24h后,，以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài)，應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,，TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),，流式細胞技術(shù)檢測心肌細胞凋亡率，黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,，硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,，Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達,。青島正規(guī)鼠尾膠原鼠尾膠原,，是一種細胞支持物，它是細胞外基質(zhì)的主要成份,。

鼠尾膠原：鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,。實驗設(shè)備及材料：大鼠尾巴、剪刀,、鑷子,、止血鉗、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平,、生理鹽水、75%酒精,、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆,、鼠尾膠原。實驗內(nèi)容：1,、制備鼠尾膠原（兩個同學(xué)一組操作）,。2、切割小玻片,。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。制備鼠尾膠原：1,、取大鼠尾巴洗凈,，75%酒精浸泡5分鐘；2,、手持尾巴,，用止血鉗夾住鼠尾的，折斷尾骨后拉出尾腱,；3,、將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡,；4,、重復(fù)步驟2、3,，直至尾腱量夠用,；5、吸去生理鹽水,，將尾腱稱重（0.5-1克）,；6、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中,；7、按每克尾腱50ml的比例,，加入0.1%醋酸溶液；8,、搖晃,，使尾腱分散于醋酸溶液中,，4℃放置一星期；9,、離心,，4000轉(zhuǎn)/分，10-15分鐘,；10,、吸取上清，分裝成小瓶,，4℃保存,。

服用膠原蛋白的注意事項：1、大分子膠原蛋白進入人體后需要降解為小分子肽,、氨基酸才能被人體吸收,，真正有效吸收的成分并不多。2,、這些食物多半脂肪含量較高,，不適合經(jīng)常食用。高熱量,、高脂肪,，尤其是油炸食物都容易產(chǎn)生自由基，加速老化,。如果能少吃這一類食物,，就等于減少了身體被自由基傷害的機會及皮膚出現(xiàn)黑斑、皺紋等的風(fēng)險,。3,、孕婦是不能服用膠原蛋白產(chǎn)品，因膠原蛋白是19種氨基酸組成的,，其中有幾種是不能被胎兒吸收的,，容易引起第二特征過早的發(fā)育和成熟，不利于出生后的嬰兒成長和發(fā)育,。鼠尾膠原,、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿。

要準備的器具：組織剪2把,，有齒鑷1把,，無齒鑷1把，200ml燒杯1個,，培養(yǎng)皿1個,，帶蓋廣口瓶1個，離心管、小瓶數(shù)個,，滴管若干,。以上物品須經(jīng)嚴格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1％醋酸溶液,。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用,。此外還有用消毒雙蒸水配制75％酒精溶液。取大鼠尾巴,，洗凈,，置75%酒精浸泡消毒后，手持尾巴,，用止血鉗夾住尾巴較高,，折斷尾骨后拉出尾腱，將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,，稱尾腱的重量,，按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液，搖晃,，使尾腱分散于醋酸溶液中,，4℃放置48小時，離心,。吸取其上清,，分裝至小瓶，4℃保存,。上述制備過程均在無菌條件下完成,。稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中。金華鼠尾膠原推薦廠家

結(jié)果無鼠尾膠原時,，前庭毛細胞懸浮于外液,，不宜封接。深圳鼠尾膠原廠家直銷

鼠尾膠原實驗應(yīng)用：鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式,，為人鼻腔黏液纖毛運輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,，以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細胞，培養(yǎng)7天時進行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),，應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,，平均厚度約為1mm；HE染色可見上皮細胞呈單層向周圍爬開,；掃描電鏡下見纖毛上皮細胞呈不規(guī)則多角形,，纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細胞間為緊密連接；同一細胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的,；同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的.結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,，為今后研究鼻內(nèi)用藥對纖毛除去功能的影響提供了良好的方法和途徑,。深圳鼠尾膠原廠家直銷