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實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用,。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽性,,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,,并且制作簡便,成本低廉,。將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液,。濟(jì)南正規(guī)鼠尾膠原平均價(jià)格
一種海貍鼠尾膠原手術(shù)縫合線制備方法,,其特征在于,步驟如下:(1)膠原紡絲液的配制:將備用的海貍鼠尾筋切成薄片,,用無花果蛋白酶進(jìn)行酶解處理,,再用雙氧水溶液殺酶;將殺酶后的切片用蒸餾水沖洗,,然后用乙酸溶液溶脹,,把溶脹后的切片分散攪拌,然后用濾網(wǎng)過濾,,除去雜質(zhì)及不溶脹物,,然后把該溶液離心脫泡制得膠原紡絲溶液;(2)手術(shù)縫合線纖維的成形:將膠原紡絲液裝入立式向上濕法紡絲機(jī)的紡絲液貯罐中,,用氮?dú)鈹D壓入含有pH=8-11,、質(zhì)量濃度為50-80%的硫酸鈉溶液的立式凝固浴中凝固成型,再經(jīng)過質(zhì)量濃度為60-90%的乙醇水溶液的脫水浴脫水,,再經(jīng)過假捻器加捻,,合股后再進(jìn)入含有pH=9-11、質(zhì)量濃度為0.8-1.2%戊二醛的交聯(lián)浴中交聯(lián),,經(jīng)過水浴水洗,,再經(jīng)第二次加捻,除去水及交聯(lián)劑,,干燥后,,在卷繞輥上卷繞即得手術(shù)縫合線。南京長沙鼠尾膠原它可以用于監(jiān)測小鼠血液成分的變化,,確糖尿病或者某些能夠改變小鼠的血糖等,。
一種基于鼠尾膠原蛋白:1.一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,為鼠尾膠原蛋白,、聚乙烯醇,、殼聚糖,、水制成的凍干止血材料,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?-10%0.2-5%0.2-2%,,余量為水,。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于凍干止血材料中,,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?%2%1%,,余量的水。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,其特征在于鼠尾膠原蛋白來源于各品系SFP級大鼠鼠尾,。
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,pH左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,,在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌,、預(yù)冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié))立即混勻。再加入100ul10PBS10培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時(shí)需要用pH試紙測試),。整個(gè)操作請?jiān)跓o菌環(huán)境下無菌操作,避免污染以影響細(xì)胞生長,。
要準(zhǔn)備的器具:組織剪2把,,有齒鑷1把,無齒鑷1把,,200ml燒杯1個(gè),,培養(yǎng)皿1個(gè),帶蓋廣口瓶1個(gè),,離心管,、小瓶數(shù)個(gè),滴管若干,。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌,。需配制的液體0.1%醋酸溶液。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用,。此外還有用消毒雙蒸水配制75%酒精溶液,。取大鼠尾巴,,洗凈,置75%酒精浸泡消毒后,,手持尾巴,,用止血鉗夾住尾巴較高,折斷尾骨后拉出尾腱,,將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,,稱尾腱的重量,按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,,搖晃,,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置48小時(shí),,離心,。吸取其上清,分裝至小瓶,,4℃保存,。上述制備過程均在無菌條件下完成。I型膠原蛋白(Collagen, Type I)結(jié)構(gòu)上是由2個(gè)α1鏈和1個(gè)α2鏈組成的異源多聚體,。合肥鼠尾膠原生產(chǎn)廠家
鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用,。濟(jì)南正規(guī)鼠尾膠原平均價(jià)格
鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I、無菌10×PBS,、無菌蒸餾水,、無菌1MNaOH。2)確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積,。3)在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I,。4)在無菌條件下執(zhí)行以下步驟。4.1加入10×PBS(終體積/10)mL4.2計(jì)算要使用的膠原蛋白I的體積(不要添加到管中直到步驟4.6為止)終體積x終膠原蛋白I濃度(mg/mL),。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的膠原體積×0.023)mL的無菌冰冷1MNaOH,。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水:添加蒸餾水體積=V(終)—V(膠原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4.5混合管中的物質(zhì)并放入冰中。4.6加入膠原蛋白I并計(jì)算體積,,混勻,,冰上備用。5)膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時(shí),。6)使用時(shí),,無菌條件下將溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)裝置中37°C凝膠30min。濟(jì)南正規(guī)鼠尾膠原平均價(jià)格