RNA可分為:mRNA:在蛋白分子合成過程中,作為“信使”分子,,將基因組DNA的遺傳信息(即堿基排列順序)傳遞至核糖體,,使核糖體能夠以其堿基排列順序摻入互補(bǔ)配對的tRNA分子,進(jìn)而合成正確的肽鏈,,實(shí)現(xiàn)遺傳信息向蛋白質(zhì)分子的轉(zhuǎn)化,。tRNA:把氨基酸搬運(yùn)到核糖體上,tRNA能根據(jù)mRNA的遺傳密碼,,依次準(zhǔn)確地將它攜帶的氨基酸,,摻入正在合成的肽鏈中,實(shí)現(xiàn)肽鏈的延伸,。與正在進(jìn)行翻譯的mRNA結(jié)合,,而后rRNA將各個(gè)氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進(jìn)而構(gòu)成蛋白質(zhì)分子。rRNA:一般與核糖體蛋白質(zhì)結(jié)合在一起,,形成核糖體,。總RNA提取試劑:適用范圍普遍,可以從動(dòng)物組織,。深圳正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒優(yōu)勢:1,、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作步驟簡化快捷從時(shí)間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個(gè)樣RNA的提取,較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時(shí)甚至更長的時(shí)間),。2,、高產(chǎn)量:多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強(qiáng)細(xì)胞裂解液,保證后續(xù)RNA提取的得率,。(能完全通過化學(xué)方法徹底裂解細(xì)胞讓RNA釋放完整,,并且有效成分能壓制內(nèi)源RNA酶的降解作用)。3,、高純度:試劑盒的進(jìn)口吸附柱具有的專一吸附特性和強(qiáng)吸附力,。三管齊下保證所提取RNA的產(chǎn)量和純度,前期得到的高質(zhì)量RNA才能保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)成功,,尤其是對熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)等,。徐州RNA提取試劑廠家批發(fā)價(jià)排除其它核酸分子(DNA)的污染。
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出,。例如,,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),,兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),,低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8,。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,,不同濃度的凝膠位置變化較大,。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,,置于-70°C下可放置一個(gè)月以上,。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2-8°C可以保存一周,,-20°C條件下可以保存1年,。RNA半衰期比較短,容易降解,,建議提取后盡快進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),,如反轉(zhuǎn)錄成cDNA,NorthernBlot等
拭子RNA提取試劑的選擇,?1,、產(chǎn)品價(jià)格,。價(jià)格也是選購產(chǎn)品的重要考量因素。對于絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)如Northern雜交,、RT-PCR,、RealTimeRT-PCR、cDNA文庫構(gòu)建等,,國產(chǎn)試劑盒都能滿足質(zhì)量要求,。與國外有名品牌相比,,國產(chǎn)試劑盒的價(jià)格較為便宜,,價(jià)格還不到國外品牌價(jià)格的30%,性價(jià)比較高,。因而,,對于以上實(shí)驗(yàn)建議選用國產(chǎn)試劑盒。一些經(jīng)費(fèi)不是很多的課題研究或樣本量較大的臨床檢測項(xiàng)目,,特別適合選用國產(chǎn)試劑盒,。2、與國外有名品牌相比,,國產(chǎn)試劑盒在拭子RNA提取純度上略有不足,但不影響大多數(shù)實(shí)驗(yàn),,特別是下游需要PCR擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)和分子雜交類實(shí)驗(yàn),。在提取得率上,國內(nèi)試劑盒與國外品牌差別不大,,而在價(jià)格方面,,國產(chǎn)試劑盒具有比較明顯的優(yōu)勢。如果經(jīng)費(fèi)充足,,RNA純度要求特別高,,可考慮選擇Q等國外有名品牌。如果經(jīng)費(fèi)不多或下游主要做PCR或分子雜交等實(shí)驗(yàn),,可考慮選擇性價(jià)比較高的國產(chǎn)品牌,。根據(jù)它們在不同的PH值和不同極性溶劑的溶解度不同而使得分開。
植物RNA快速提取試劑盒:1.固體組織破碎設(shè)備,??捎孟铝醒b置之一:1)玻璃勻漿器。泡酸清潔,,用高壓滅菌蒸餾水洗滌數(shù)次,。2)研缽。適用于液氮凍存組織的研磨,,清洗方法同玻璃勻漿器,。3)高速機(jī)械勻漿器(Polytron,,Tekmar或類似產(chǎn)品),打開開關(guān),,在蒸餾水中清洗分散器頭數(shù)次,。2.高壓蒸汽30分鐘消毒一次性吸頭離心管。RNA沉淀溶解之后,,應(yīng)嚴(yán)格使用高壓消毒的一次性用品,。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染環(huán)境下工作,在裂解步驟可使用未高壓但潔凈的一次性吸頭和離心管,,但光推薦在緊急情況下這樣做,。3.普通雙蒸水,高壓消毒20分鐘,。用于沖洗器皿,,配制瓊脂糖凝膠和電泳用緩沖液。DEPC處理的雙蒸水,。加DEPC到水中至終濃度為0.01%v/v,,室溫過夜,高壓消毒30分鐘,。用于溶解RNA,,配制TE緩沖液和75%乙醇。4.濕冰,。在冰上進(jìn)行操作有助于減少RNA降解,。5.其它用品。電泳槽,,雙蒸水沖洗,。離心機(jī)和加樣器,無需處理,。6.戴手套,。注意某些實(shí)驗(yàn)如提取質(zhì)粒DNA如使用極大量RNA酶,為防污染,,須較全仔細(xì)清洗實(shí)驗(yàn)器具和實(shí)驗(yàn)區(qū)域,。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):無需氯化銫梯度離心,無需氯化鋰或乙醇沉淀,。徐州RNA提取試劑廠家批發(fā)價(jià)
血漿/血清RNA提取試劑盒:30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程,,提取的總RNA純度高。深圳正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
RNA提取試劑的選擇:選擇合適的提取試劑是較重要的一步,。好的提取試劑在確保成功的同時(shí),,操作方便且經(jīng)濟(jì)實(shí)用。對于動(dòng)物組織,、簡單的植物材料,、各種微生物,、培養(yǎng)細(xì)胞的totalRNA提取,Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例,。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,,進(jìn)一步豐富了TakaraRNA提取的產(chǎn)品線。該產(chǎn)品采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解系統(tǒng),,無需苯酚氯仿抽提等步驟,,簡單快捷。組織或細(xì)胞裂解后,,提取操作光需20分鐘便可完成~深圳正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹