除了讓細胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內部的生長環(huán)境,,讓細胞在更真實地條件下進行生長。當然,,除了這些,,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開網(wǎng)站——知網(wǎng),,輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,制作止血海綿敷料等各種用途,。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料。蘇州君欣生物科技有限公司將無組織纖維,、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,,真空冷凍干燥備用,。武漢正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
鼠尾Ⅰ型膠原:組裝液的配置:1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL,,用1mol/L氫氧化鈉調節(jié)酸堿度至9.2。2.膠原纖維的重構吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,,倒入0.5mL自組裝液,,室溫放置20min。予自組裝液自組裝24h,。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中,,將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水、50%乙醇,、100%乙醇依次漂洗后進行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,滴入聚丙烯(PAA)至濃度350μg/mL,;滴加1mol/L的氯化氫,,調節(jié)酸堿度至7.4,然后緩慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氫二鈉),,約16滴/min,。金華正規(guī)鼠尾膠原廠家直銷膠原蛋白(Collagen)是結締組織和內臟部位外基質的主要成分。
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究,。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達,。
鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解,。2.建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液,。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導致丟失蛋白,。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結合數(shù)小時或者2-8度過夜,。5.從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,,這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。在接種細胞前用無菌的水漂洗。I型膠原蛋白(Collagen, Type I)結構上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體,。
鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加,,一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴,制作過程需要經(jīng)歷醋酸抽提、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟,,才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白,。這種膠原蛋白在37℃的條件下會形成3股螺旋結構,可以用來當作細胞培養(yǎng)的基質,。細胞培養(yǎng)過程中,,細胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面(懸浮培養(yǎng)細胞除外)才能完成生長過程,而有一些細胞卻總是不太給力,,自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難,,這個時候鼠尾膠原蛋白就能承擔起讓細胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層(coating),,給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后,,細胞就能更好地貼附上去,除了培養(yǎng)皿,,一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養(yǎng)得細胞,,同樣也可以用鼠尾膠原蛋白協(xié)助細胞貼壁生長。制備鼠尾膠原:重復步驟2,、3,,直至尾腱量夠用。廈門鼠尾膠原平均價格
制備鼠尾膠原:取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘,。武漢正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
鼠尾膠原:鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑。實驗設備及材料:大鼠尾巴,、剪刀,、鑷子、止血鉗,、彎頭吸管,、平皿、三角燒瓶,、燒杯,、量筒、天平,、生理鹽水,、75%酒精、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶、鉆石筆,、鼠尾膠原,。實驗內容:1,、制備鼠尾膠原(兩個同學一組操作),。2,、切割小玻片。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內,。制備鼠尾膠原:1、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘,;2、手持尾巴,,用止血鉗夾住鼠尾的,,折斷尾骨后拉出尾腱;3,、將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡;4,、重復步驟2,、3,直至尾腱量夠用,;5,、吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克),;6,、將尾腱置于平皿內剪碎,轉移至三角燒瓶中,;7,、按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液,;8,、搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,,4℃放置一星期,;9、離心,,4000轉/分,,10-15分鐘;10,、吸取上清,,分裝成小瓶,4℃保存。武漢正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨