所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,，且外泌體天然存在于體液中，包括血液,、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中,。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究,。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,，參與細(xì)胞間通訊，對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng),，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā),。1983年,，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，1987年Johnstone將其命名為“exosome”,。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。近年來,，隨著人們對(duì)外泌體的研究和認(rèn)識(shí)加深。深圳外泌體提取試劑直銷價(jià)

外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：肺病細(xì)胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進(jìn)一些病癥的生長(zhǎng),。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱,，LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進(jìn)一些病癥血管的生成,；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動(dòng)脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進(jìn)肺病的生血管作用,。此外，有研究發(fā)現(xiàn),，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）,。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加，促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT,，從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖,，遷移能力。色譜法,。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍,。昆明外泌體提取試劑哪里買外泌體提取：樣本的粘度與分離的外泌體純度有顯著的相關(guān)性,。

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子,。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升,。此外,，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率,。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn),，NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,，其中l(wèi)et-7f,、miR-30e-3p和miR-20b表達(dá)均下調(diào)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān),。

外泌體提取：1,、過濾,。超濾膜也可用于分離外泌體。根據(jù)外泌體的大小,，從蛋白質(zhì)和其他大分子中分離外泌體,。較常見的過濾膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔徑,，可用于收集大于800nm,、400nm或200nm的外泌體，也有設(shè)計(jì)成微柱多孔硅纖毛結(jié)構(gòu)以分離40-100nm外泌體：不過,，該方法由于過濾膜的粘附,，可能會(huì)損失外泌體，并且過濾時(shí)的壓力和剪切力,，可能會(huì)使外泌體變形受損,。2、基于聚合物的沉淀技術(shù),?；诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合，在4℃溫育并低速離心,。用于聚合物沉淀的較常見聚合物之一是聚乙二醇（PEG）,。用這種聚合物沉淀具有許多優(yōu)點(diǎn)，包括對(duì)分離的外泌體影響小,、pH中性等,。目前大多數(shù)快速分離外泌體的商品化試劑盒都是基于此方法。然而基于聚合物的沉淀方法可能會(huì)同時(shí)分離非囊泡污染物（包括脂蛋白）而且,，聚合物材料的混雜可能會(huì)影響下游分析,。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。

外泌體鑒定：外泌體分離之后,，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物，多角度進(jìn)行鑒定,。l透射電鏡鑒定法：簡(jiǎn)稱TEM,，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形,。l納米顆粒追蹤分析法：簡(jiǎn)稱NTA,，該方法能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測(cè)速度快,，檢測(cè)后能提供外泌體粒徑和濃度信息,。lWesternblot分子標(biāo)志物檢測(cè)：外泌體標(biāo)志蛋白包括四跨膜蛋白家族,，如CD9、CD63和CD81,；細(xì)胞質(zhì)蛋白,，如肌動(dòng)蛋白（Actin）和鈣磷脂結(jié)合蛋白（Annexins）；使用可截留100KD分子量的膜,，通過離心截留上清中的外泌體,，截留完成后用無菌針管吸取上層含有外泌體的液體，置于80℃儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?a href="http://18740.cn/zdcbsx/edzpou9xeg/20716023.html" target="_blank">合肥外泌體提取試劑單價(jià)

離心除去細(xì)胞器,，留取上清,。深圳外泌體提取試劑直銷價(jià)

外泌體與神經(jīng)退行性疾病：外泌體可能促進(jìn)或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集,。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測(cè)到Tau和Aβ蛋白,。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn)。PD病人腦脊液外泌體可檢測(cè)到α-synuclein,，ALS病人外泌體中也可以檢測(cè)到SOD1或TDP-43,。外泌體與疾病診斷（應(yīng)用潛能）：外泌體生成機(jī)制表明，通過分析外泌體的組分,，可以幫助識(shí)別其來源的細(xì)胞類型,。這一特性已被應(yīng)用于開發(fā)心血管疾病，神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,，也在肝腎肺相關(guān)疾病中進(jìn)行研發(fā)測(cè)試,。將沉淀物用PBS緩沖液進(jìn)行懸浮，使外泌體懸浮于液體上層,。深圳外泌體提取試劑直銷價(jià)