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外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣,、硬件要求高、操作難度大,。李記生物自主開(kāi)發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,,組分經(jīng)過(guò)優(yōu)化處理,適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、血清,、血漿、尿液及其他體液(腦脊液,、腹水,、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取,,并搭配純化過(guò)濾裝置,,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項(xiàng):1.對(duì)于待測(cè)樣品粘度過(guò)大時(shí),,可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理,。2.當(dāng)血清、血漿,、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,,收獲的外泌體顆粒無(wú)法通過(guò)EPF柱純化時(shí),可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過(guò)EPF柱離心,。3.針對(duì)外泌體標(biāo)志蛋白(CD63,CD9,CD81等)進(jìn)行Westernblot檢測(cè),,可以鑒定所提的外泌體。通過(guò)超速離心(120000g/分鐘)20小時(shí)以上才能獲得足夠的外泌體量,。外泌體提?。盒》肿涌蛇M(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強(qiáng)地滯留,,更慢地被洗脫出。長(zhǎng)沙外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)
外泌體研究的主要應(yīng)用:外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類型,,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答,、抗原提呈、細(xì)胞遷移,、細(xì)胞分化,、一些病癥侵襲等方方面面,。有研究表明一些病癥來(lái)源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,,促進(jìn)了一些病癥的生長(zhǎng)與侵襲,。一些病癥。一些病癥轉(zhuǎn)移,。來(lái)自白血病干細(xì)胞的外泌體促進(jìn)急性骨髓性白血?。ˋML)細(xì)胞的增殖、遷移和壓制細(xì)胞凋亡,。治病靶標(biāo),。利用外泌體遞送小干擾RNA來(lái)沉默KRASG12D,從而特異性高效靶向至胰腺病細(xì)胞,,以明顯降低RAS活化,、病細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移過(guò)程。免疫,。β細(xì)胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細(xì)胞外,,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細(xì)胞,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗,。心血管,。外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細(xì)胞的損傷促進(jìn)動(dòng)脈硬化。分子標(biāo)記,。疾病診斷,。在酒精性肝病、NASH,、菌類性肝炎,、藥物性肝損傷和肝細(xì)胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升。預(yù)后標(biāo)志,。杭州正規(guī)外泌體提取試劑哪家便宜外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì):無(wú)需沉淀試劑,,也無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng)。
外泌體的提取,、分離方法:開(kāi)發(fā)高效,、快速、穩(wěn)定,,并且保持外泌體結(jié)構(gòu)和生物功能完整性的方法,,是目前外泌體應(yīng)用于臨床的基礎(chǔ)和前提。從細(xì)胞上清和體液中提取分離外泌體的方法很多,,但是外泌體的純度和產(chǎn)量卻和分離方法息息相關(guān),。通常分離步驟少、產(chǎn)率高,,但是純度會(huì)受到影響,。鑒于每種分離方法都有其優(yōu)缺點(diǎn),,實(shí)驗(yàn)可以根據(jù)樣本來(lái)源、下游實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡?,選擇合適的外泌體分離方法,。2015年,國(guó)際囊泡組織(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出,,簡(jiǎn)單依靠一種分離方法得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都難滿足實(shí)驗(yàn)的需求,。因此,推薦聯(lián)合使用各種方法,,從而得到高純度和高產(chǎn)量的外泌體,。
1996年,研究者發(fā)現(xiàn)外泌體作為抗原呈遞因子參與T細(xì)胞依賴的抗一些病癥反應(yīng),,開(kāi)啟了外泌體蛋白研究的新天地,。2013年諾貝爾生物/醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)解答了細(xì)胞如何組織其內(nèi)部較重要的運(yùn)輸系統(tǒng)之一——囊泡傳輸系統(tǒng)的奧秘。外泌體(Exosome)是細(xì)胞主動(dòng)分泌的囊泡樣小體,,大小均一,,直徑30-200nm,密度1.10-1.18g/ml,,來(lái)源普遍,,幾乎所有細(xì)胞都可分泌,在血液,,尿液,,唾液,腦脊液,,腹水,,乳汁等體液中普遍分布。外泌體較早在1986年發(fā)現(xiàn)于培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中,。用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng):選擇血清還是血漿,?推薦大多數(shù)研究選擇血漿。
由于這些核酸被囊膜包裹而被保護(hù),,穩(wěn)定性高,,不易降解,是一種用于一些病癥診斷和預(yù)后監(jiān)測(cè)的非常理想的新型生物標(biāo)記物一些疾病的早期診斷,、用藥監(jiān)控,、預(yù)后判斷。近年來(lái),,隨著人們對(duì)外泌體的研究和認(rèn)識(shí)加深,,外泌體檢測(cè)作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無(wú)創(chuàng)診斷、治病和監(jiān)測(cè),;如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵,。外泌體(Exosome)是從體液(尿液、血液,、唾液,、腹水、胸腹水等)和細(xì)胞液中快速提取的,,其是活細(xì)胞分泌到胞外的囊泡樣小體,,含有多種蛋白和核酸分子(DNA、RNA,、以及miRNA),,在體內(nèi)細(xì)胞間物質(zhì)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起到重要作用。外泌體(Exosome)發(fā)現(xiàn)于1986年,,是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體,。合肥外泌體提取試劑銷售廠家
外泌體提取:回收率不穩(wěn)定(可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)),,純度也受到質(zhì)疑,。長(zhǎng)沙外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)
有研究發(fā)現(xiàn),NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽(yáng)性的占80%,,而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽(yáng)性的只占2%,,因而認(rèn)為外泌體的EGFR蛋白可以用作NSCLC與慢性肺炎鑒別診斷的生物標(biāo)志物。Park等通過(guò)Sys-BodyFlu-id數(shù)據(jù)庫(kù)分析發(fā)現(xiàn)153種特異性胸腔積液外泌體蛋白質(zhì),,進(jìn)一步的Westernblotting分析顯示多種特異性胸腔積液外泌體蛋白參與EGFR信號(hào)傳導(dǎo)途徑以促進(jìn)一些病癥的發(fā)生的發(fā)展,,因此外泌體蛋白可能作為肺病診斷篩查的生物學(xué)標(biāo)記物。外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷:近年來(lái)眾多文獻(xiàn)報(bào)道,,肺病細(xì)胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質(zhì)并促進(jìn)肺病的發(fā)生的發(fā)展,,是早期診斷肺病的有效途徑。長(zhǎng)沙外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)