鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：將培養(yǎng)器皿在室溫(25 度左右)下 放置 20 分鐘待膠凝固后，轉移到培養(yǎng)箱內,。如果配制中使用的是 10PBS,， 使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預平衡。 B．含細胞的三維膠原的制備（以配制 200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH 加到膠原溶液中,，會由于 NaOH 不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結）,，立即 混勻。再加入 23ul 10PBS 10培養(yǎng)液,，混勻(混勻后pH 左右,，如果 PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用 pH 試紙測試),。加入 760ul 的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放 20分鐘待膠凝固后,，加入適當體積的細胞培養(yǎng)液，轉移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。 注意事項：在室溫下pH 中性時可迅速成膠,，在操作過程中要 盡量保持低溫。鼠尾膠原醋酸溶解：在室溫或37度結合數(shù)小時或者2-8度過夜,。唐山鼠尾膠原推薦廠家

鼠尾膠原蛋白的獲取也相當“講究”,，首先要以無毒方法捕到家鼠。取尾長20cm以上者,，齊尾根部切下尾巴,，洗凈后浸于75%酒精中。在無菌操作下剝去鼠尾皮膚,，即可見附于鼠尾骨上的4束韌帶,。每束韌帶中,，位于外面及近骨一面的為白色纖維，較光潔,，微發(fā)亮,。纖維之間為易碎裂的間質。而剝去下來的“纖維”,，就放置在嘉興眼庫中,，以供需要時及時提取。讓小小的老鼠尾巴發(fā)揮其神奇的作用,，以醫(yī)學人嚴謹,、踏實、不斷進取的醫(yī)學態(tài)度,，讓鼠尾膠原蛋白幫助更多的人,，恢復角膜的光明，重現(xiàn)光明的世界,。合肥鼠尾膠原廠家推薦一種基于鼠尾膠原蛋白：根據(jù)權利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,。

鼠尾膠原的生物礦化和TEM觀察：果凍樣Ⅰ型膠原蛋白膠體初始浸泡在礦化液中時呈微白色；礦化2 d后,，膠體的顏色逐漸加深至乳白色,；礦化6 d后，隨著羥基磷灰石晶體礦化長入膠原纖維內部,，膠體顏色加深至純白色,，并在膠體表面沉積了一層薄薄的羥基磷灰石鈣晶體，予鑷子夾起,，其表層羥基磷灰石鈣晶體破碎散落,。TEM表征顯示：礦化2 d后，Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔周期性條紋結構逐漸模糊,，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維內部,，膠原纖維部分礦化，沿著膠原纖維生長,，忖度變深,；礦化6 d后，Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔D-Band結構完全消失,，膠原纖維內部可以看到黑色羥基磷灰石晶體,，嵌入膠原纖維縱向生長。當鼠尾Ⅰ型膠原纖維完全礦化時,，由于整條膠原纖維都被羥基磷灰石鈣晶體占據(jù),，膠原纖維呈現(xiàn)黑色，選區(qū)衍射斑圖符合羥基磷灰石表征,。

鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法,。各個材料及其重量配比為鼠尾膠原蛋白∶聚乙烯醇∶殼聚糖為余量為水,，采用冷凍干燥工藝制備。本發(fā)明所制備的止血材料主要采用鼠尾膠原蛋白制備,，較傳統(tǒng)的止血材料不可吸收,、容易引起機體過敏、止血效果差等缺點,，本發(fā)明所制備的止血材料具有人體內可吸收,，生物相容性好；止血效果快,，具有很強的親水性,；同時可啟動血小板的凝聚，一旦血小板凝聚,，就可形成血栓,，進而促使血漿結塊阻止血流。同時,，膠原表面的特定區(qū)域可以與細胞表面存在的類似纖連蛋白的糖蛋白結合,，可以起到防止腸粘連的功效。注意事項：在室溫下pH 中性時可迅速成膠,，在操作過程中要 盡量保持低溫,。

具體實施方式實施例1 止血材料的制備1、選擇能與鼠尾膠原蛋白聯(lián)合發(fā)揮作用的聚乙烯醇,、殼聚糖作為輔料,。各個材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為 0.2% 0.2%。余量為水,。2,、將混合材料用無菌水溶解后澆入培養(yǎng)小板，-40°C預凍池,，再轉入_80°C超低溫冰箱急凍4h,，再轉入真空冷凍干燥機中將復合材料在-4°C下冷凍干燥10h,，即可以得到復合型凍干止血材料,。Co60輻射滅菌,，干燥保存。凍干的材料可直接用于各種傷口的止血,。實施例2 止血材料的制備1、選擇能與鼠尾膠原蛋白聯(lián)合發(fā)揮作用的聚乙烯醇,、殼聚糖作為輔料,。各個材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為5% 2% 1%,，余量為水。2,、將混合材料用無菌水溶解后澆入培養(yǎng)板,，-20°C預凍，再轉入_80°C超低溫冰箱急凍8h,，再轉入真空冷凍干燥機中將復合材料在-4°C下冷凍干燥30h,，即可以得到復合型凍干止血材料。Co60輻射滅菌,，干燥保存,。探討應用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細胞膜片鉗實驗中的促進毛細胞貼壁效果。唐山鼠尾膠原推薦廠家

本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,，特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng),。唐山鼠尾膠原推薦廠家

膠原蛋白的提取方法：酶法提取：酶法提取是利用蛋白酶使膠原溶解,，水解條件溫和,，反應速率快，提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結構,，蛋白純度高,，理化性質穩(wěn)定，且無環(huán)境污染,。酶法提取常用的蛋白酶有：胃蛋白酶,、胰蛋白酶或者復合酶。工藝可選擇一步法,，即利用酶液直接提?。欢椒?，即先用酸或者堿進行初步提取,，然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO預處理革屑,，然后用堿性蛋白酶提取膠原的水解產物,。Cabeza L.F.T等[7]先用胃蛋白酶，再用堿性蛋白酶提取了2種不同的膠原水解產物,。趙蒼碧等[2]采用胃蛋白酶和無花果蛋白酶消化法從牛腱中提取膠原蛋白,，探討了酶和酶的加入量對提取結果的影響，給出了酶對膠原提取較佳工藝配比,，酶與牛腱的質量比為0.1時效果較佳，而使用無花果蛋白酶時，0.01的配比較佳,。唐山鼠尾膠原推薦廠家