一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境,,利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心,,簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,,并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純,。從提取原料到樣品生成過程中,進(jìn)行多次真空冷凍干燥,,并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,;較后由滅菌、無菌包裝,,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上,。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產(chǎn)率和生物相容性,,降低了成本,,適用于生物醫(yī)用材料。細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例,。唐山正規(guī)鼠尾膠原
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:在食品加工領(lǐng)域,,鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中。它還可以當(dāng)作酸奶,,冰淇淋,,果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用。在一些低脂肪食品中,,它用于模仿全脂食品的感覺和質(zhì)地,。它還用于生產(chǎn)膳食保健品,據(jù)說能讓手指甲和皮膚看起來更好,。此外,,還有基于膠原蛋白的保健品,可用于促進(jìn)關(guān)節(jié)健康,。在工業(yè)應(yīng)用方面,,鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的內(nèi)部涂層。設(shè)備上的膠原蛋白薄層通常被允許干燥,。它還可以用來制造一種凝膠,,可當(dāng)作懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)基。此外,,還可以把它當(dāng)膠水使用,。濟(jì)南正規(guī)鼠尾膠原單價(jià)鼠尾膠原醋酸溶解:制備成濃度為0.1%的溶液。
一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,,成透明澄清黏稠溶液,;在冰水浴中,調(diào)節(jié)pH = 6.5,,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時(shí),,去除上清液,,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,,收集沉淀,; 2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,,冰水浴中,,調(diào)節(jié)PH = 6.5 ;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進(jìn)行脫鹽處理,; (8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,,-40至-20°C預(yù)凍2?4小時(shí),然后真空冷凍干燥,,凍干產(chǎn)品經(jīng)進(jìn)一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,,滅菌、包裝,,得到成品膠原蛋白粉末,。
一種海貍鼠尾膠原手術(shù)縫合線制備方法,,其特征在于,步驟如下:(1)膠原紡絲液的配制:將備用的海貍鼠尾筋切成薄片,,用無花果蛋白酶進(jìn)行酶解處理,,再用雙氧水溶液殺酶;將殺酶后的切片用蒸餾水沖洗,,然后用乙酸溶液溶脹,,把溶脹后的切片分散攪拌,然后用濾網(wǎng)過濾,,除去雜質(zhì)及不溶脹物,,然后把該溶液離心脫泡制得膠原紡絲溶液;(2)手術(shù)縫合線纖維的成形:將膠原紡絲液裝入立式向上濕法紡絲機(jī)的紡絲液貯罐中,,用氮?dú)鈹D壓入含有pH=8-11,、質(zhì)量濃度為50-80%的硫酸鈉溶液的立式凝固浴中凝固成型,再經(jīng)過質(zhì)量濃度為60-90%的乙醇水溶液的脫水浴脫水,,再經(jīng)過假捻器加捻,,合股后再進(jìn)入含有pH=9-11、質(zhì)量濃度為0.8-1.2%戊二醛的交聯(lián)浴中交聯(lián),,經(jīng)過水浴水洗,,再經(jīng)第二次加捻,除去水及交聯(lián)劑,,干燥后,,在卷繞輥上卷繞即得手術(shù)縫合線。整個(gè)操作請于冰上進(jìn)行,,因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠,。
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果,。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽性,,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征,。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡便,成本低廉,。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動或攪拌。重慶正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹
鼠尾膠原,,是一種細(xì)胞支持物,,它是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成份。唐山正規(guī)鼠尾膠原
三維膠原的制備:鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,,pH 7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,,在成膠過程中需要加入0.06X 體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。需要的溶液 ( 均需要 無菌 ,、 預(yù)冷 ):10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 )或 10x 培養(yǎng)液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水A.不含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ul H2O,。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻,。唐山正規(guī)鼠尾膠原