無血清細(xì)胞凍存液通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),,大部分的干細(xì)胞,凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存。不含動(dòng)物源性蛋白,,不含血清成分,,可有效減少各類細(xì)菌,、病毒和支原體等污染,,保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO,、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,,提高細(xì)胞存活率和活力,亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞,。產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):1,、無需程序性降溫,可直接將細(xì)胞置于-80℃凍存,,凍存液無需稀釋,。2、細(xì)胞可于-80℃長(zhǎng)期保存,。3,、凍存液不含血清等,較大降低細(xì)胞污染的可能性,。保存方法:冰袋運(yùn)輸,,4℃保存,保質(zhì)期一年??梢苑乐够驕p少冷凍冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷作用,。成都正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價(jià)
無血清細(xì)胞凍存液:凍存注意:開蓋之前,,用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身,。以下說明適用于在6孔板內(nèi)的培養(yǎng)物的凍存。培養(yǎng)物應(yīng)該在適合傳代的時(shí)候進(jìn)行收集和凍存,。每管所含有的細(xì)胞應(yīng)當(dāng)來源于6孔板的1個(gè)培養(yǎng)孔,。如果使用其他的培養(yǎng)器皿,請(qǐng)相應(yīng)的調(diào)整體積,。1. 在室溫(15 - 25°C)以300 x g離心5分鐘,。2. 輕輕吸走上清液,注意不要擾動(dòng)細(xì)胞團(tuán),。3. 用血清學(xué)吸管以1 mL的TBD-698重懸細(xì)胞,。在打散細(xì)胞團(tuán)時(shí),盡量減少細(xì)胞聚集體分解,。4. 用2 mL的血清學(xué)吸管將1 mL的細(xì)胞聚集體轉(zhuǎn)移到標(biāo)記好的凍存管中,。5. 用以下方法凍存細(xì)胞聚集體:推薦使用緩速降溫方法,每分鐘降低1度,,隨后可以在 -196°C液氮長(zhǎng)期保存,。不推薦在 -80°C長(zhǎng)期保存。逐步降溫法:-20°C保存2個(gè)小時(shí),,然后 -80°C中保存2個(gè)小時(shí),,隨后可以在 -196°C液氮中長(zhǎng)期保存。蕪湖南昌無血清細(xì)胞凍存液含多種保護(hù)劑成分,一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致炸列,。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識(shí),,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO)對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用,,在常溫下,,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化,。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品,。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液,。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷,。
無血清細(xì)胞凍存液的用途:用途:1.無血清細(xì)胞凍存液用于造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲(chǔ)存,。2.無血清細(xì)胞凍存液用于T淋巴細(xì)胞,、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲(chǔ)。3.無血清細(xì)胞凍存液用于其他類型哺乳動(dòng)物細(xì)胞的儲(chǔ)存,。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:1.不含牛血清,,無動(dòng)物源組分。傳統(tǒng)的凍存液,,一般由胎牛血清,、DMSO等組分組成。胎牛血清取自牛,,因此,,難以應(yīng)用到需要避免接觸動(dòng)物源的應(yīng)用領(lǐng)域。用包括人白蛋白等蛋白組分替代血清的用途,,無動(dòng)物源組分,。2.2-8℃即可穩(wěn)定保存,無需冷凍,,即取即用,。為了避免反復(fù)凍融,傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液,,需要分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存,。無血清細(xì)胞凍存液,2-8℃保存即可,,無需再進(jìn)行分裝,。無血清快速細(xì)胞凍存液:能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細(xì)胞的凍存需求。
細(xì)胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細(xì)胞凍存液,,4℃預(yù)冷(新鮮配制的凍存液會(huì)產(chǎn)生大量的熱),;取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,用細(xì)胞消化酶將單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來,;懸浮細(xì)胞則直接將細(xì)胞收集到離心管中,;離心1200rpm,6min,;去除上清液,,逐漸加入適量預(yù)冷的細(xì)胞凍存液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),,調(diào)節(jié)凍存液中的細(xì)胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml,;將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml,;在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,、凍存時(shí)間及操作人員姓名;凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min,;到達(dá)-80℃時(shí),,則可迅速放入液氮中,。在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),,較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。重慶無血清細(xì)胞凍存液
無血清細(xì)胞凍存液:凍存細(xì)胞,,無需程序降溫,。成都正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價(jià)
細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,,這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購(gòu)買,、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞,。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),,可使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,,細(xì)胞內(nèi)水分透出,,減少了冰晶形成,從而避免細(xì)胞損傷,。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細(xì)胞存活,。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開始為-1到-2℃/min,當(dāng)溫度低于-25℃時(shí)可加速,,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃),。成都正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價(jià)