電壓鉗技術(shù),，是20世紀(jì)初由Cole發(fā)明，Hodgkin和Huxley完善,，其設(shè)計(jì)的主要目的是為了證明動(dòng)作電位的產(chǎn)生機(jī)制,，即動(dòng)作電位的峰電位是由于膜對鈉的通透性發(fā)生了一過性的增大過程。但當(dāng)時(shí)沒有直接測定膜通透性的方法,，于是就用膜對某種離子的電導(dǎo)來**該種離子的通透性，膜電導(dǎo)測定的依據(jù)是電學(xué)中的歐姆定律,，如膜的Na電導(dǎo)GNa與電化學(xué)驅(qū)動(dòng)力（Em-ENa）和膜電流INa的關(guān)系GNa=INa/（Em-ENa）.因此可通過測量膜電流,，再利用歐姆定律來計(jì)算膜電導(dǎo)，但是,，利用膜電流來計(jì)算膜電導(dǎo)時(shí),，記錄膜電流期間的膜電位必須保持不變，否則膜電流的變化就不能**膜電導(dǎo)的變化,。這一條件是利用電壓鉗技術(shù)實(shí)現(xiàn)的,。下張幻燈中的右邊兩張圖是Hodgkin和Huxley在半個(gè)世紀(jì)以前利用電壓鉗記錄的搶烏賊的動(dòng)作電位和動(dòng)作電位過程中的膜電流的變化圖，他們的實(shí)驗(yàn)***證明參與動(dòng)作電位的離子流由Na,，k,，漏（Cl）三種成分組成。并對這些離子流進(jìn)行了定量分析,。這一技術(shù)對闡明動(dòng)作電位的本質(zhì)和離子通道的的研究做出了極大的貢獻(xiàn),。膜片鉗記錄技術(shù)與較早的單電極電壓鉗位相比進(jìn)步了很多，尤其在單離子通道鉗位記錄方面,。芬蘭腦片膜片鉗單細(xì)胞

1976年德國馬普生物物理化學(xué)研究所Neher和Sakmann在青蛙肌細(xì)胞上記錄記錄到AChjihuo的單通道離子電流1980年Sigworth等用負(fù)壓吸引,，得到10-100GΩ的高阻封接（Giga-sea1），降低了記錄時(shí)的噪聲1981年Hamill和Neher等引進(jìn)了膜片游離技術(shù)和全細(xì)胞記錄技術(shù)1983年10月,，《Single-ChannelRecording》一書問世,，奠定了膜片鉗技術(shù)的里程碑。膜片鉗技術(shù)原理膜片鉗技術(shù)是用玻璃微電極接觸細(xì)胞,，形成吉?dú)W姆（GΩ）阻抗,，使得與電極前列開口處相接的細(xì)胞膜的膜片與周圍在電學(xué)上絕緣，在此基礎(chǔ)上固定電位,，對此膜片上的離子通道的離子電流（pA級）進(jìn)行監(jiān)測記錄的方法,。全細(xì)胞膜片鉗電壓鉗制膜片鉗80%的工夫在于刺備細(xì)胞。

ePatch雖然設(shè)備非常小巧,，但功能完備,，傳統(tǒng)膜片鉗設(shè)備能做的實(shí)驗(yàn)，用ePatch幾乎都能做。具有voltage-clamp,，current-clamp,，zero current-clamp三種模式，自動(dòng)電極電壓飄移補(bǔ)償,，C-fast-C-slow-R-series-P/N補(bǔ)償,，Bridge balance補(bǔ)償?shù)裙δ堋,？梢宰鋈?xì)胞記錄也可以做單通道記錄,，膜片鉗技術(shù)常做的離子通道電流，突觸后電流,，動(dòng)作電位檢測等實(shí)驗(yàn)都能輕松實(shí)現(xiàn),。公司還為此開發(fā)了友好的控制和記錄軟件，筆者上手接觸了一下,，發(fā)現(xiàn)跟AXON的軟件類似,，并且程序編輯更為簡單易用。所記錄到的數(shù)據(jù)可以直接使用Clampfit進(jìn)行分析,，可以說對于使用過AXON設(shè)備的膜片鉗工作者來說,，上手毫無難度。

高阻封接技術(shù)還明顯降低了電流記錄的背景噪聲,，從而戲劇性地提高了時(shí)間,、空間及電流分辨率，如時(shí)間分辨率可達(dá)10μs,、空間分辨率可達(dá)1平方微米及電流分辨率可達(dá)10-12A,。影響電流記錄分辨率的背景噪聲除了來自于膜片鉗放大器本身外，較主要還是信號源的熱噪聲,。信號源如同一個(gè)簡單的電阻,，其熱噪聲為σn=4Kt△f/R式中σn為電流的均方差根，K為波爾茲曼常數(shù),，t為溫度,，△f為測量帶寬，R為電阻值,?？梢姡玫降驮肼暤碾娏饔涗?，信號源的內(nèi)阻必需非常高,。如在1kHz帶寬，10%精度的條件下,，記錄1pA的電流,，信號源內(nèi)阻應(yīng)為2GΩ以上,。電壓鉗技術(shù)只能測量內(nèi)阻通常達(dá)100kΩ～50MΩ的大細(xì)胞的電流，從而不能用常規(guī)的技術(shù)和制備達(dá)到所要求的分辨率,。維持細(xì)胞正常形態(tài)和功能完整性,。

在大多數(shù)膜片鉗實(shí)驗(yàn)，要求所有實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備均具有良好的機(jī)械穩(wěn)定性,，以使微電極與細(xì)胞膜之間的相對運(yùn)動(dòng)盡可能小,。防震工作臺放置倒置顯微鏡和與之固定連接的微操縱器，其他設(shè)備置于臺外,。屏蔽罩由銅絲網(wǎng)制成,，接地以防止周圍環(huán)境的雜散電場對膜片鉗放大器的探頭電路的干擾。儀器設(shè)備架要靠近工作臺,，便于測量儀器與光學(xué)儀器配接,。倒置顯微鏡是膜片鉗實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的主要光學(xué)部件，它不僅具有較好的視覺效果,，便于將玻璃電極與細(xì)胞的頂部接觸,，而且是借助移動(dòng)物鏡來實(shí)現(xiàn)聚焦,，具有較好的機(jī)械穩(wěn)定性,。視頻監(jiān)視器主要是用來監(jiān)視實(shí)驗(yàn)過程中的操作，特別是能將封接參數(shù)（如封接阻抗）與細(xì)胞的形態(tài)對應(yīng),，以實(shí)現(xiàn)良好的封接,。離子和離子通道是細(xì)胞興奮的基礎(chǔ)，亦即產(chǎn)生生物電信號的基礎(chǔ),，生物電信號通常用電學(xué)或電子學(xué)方法進(jìn)行測量,。德國全細(xì)胞膜片鉗離子通道

膜電導(dǎo)測定的依據(jù)是電學(xué)中的歐姆定律。芬蘭腦片膜片鉗單細(xì)胞

高阻封接問題的解決不僅改善了電流記錄性能,，還隨之出現(xiàn)了研究通道電流的多種膜片鉗方式,。根據(jù)不同的研究目的，可制成不同的膜片構(gòu)型,。(1)細(xì)胞吸附膜片(cell-attachedpatch)將兩次拉制后經(jīng)加熱拋光的微管電極置于清潔的細(xì)胞膜表面上,，形成高阻封接，在細(xì)胞膜表面隔離出一小片膜,，既而通過微管電極對膜片進(jìn)行電壓鉗制,，分辨測量膜電流，稱為細(xì)胞貼附膜片,。由于不破壞細(xì)胞的完整性,，這種方式又稱為細(xì)胞膜上的膜片記錄。此時(shí)跨膜電位由玻管固定電位和細(xì)胞電位決定,。因此,，為測定膜片兩側(cè)的電位,，需測定細(xì)胞膜電位并從該電位減去玻管電位。從膜片的通道活動(dòng)看,，這種形式的膜片是極穩(wěn)定的,，因細(xì)胞骨架及有關(guān)代謝過程是完整的，所受的干擾小,。芬蘭腦片膜片鉗單細(xì)胞

因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司位于中山北路1759號浦發(fā)廣場D座803,，擁有一支專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。Inscopix,envisionTEC,rokit,piezosleep,stoeltingco,unipick,neuronexus,scientifica,alphaomega,divescope,invivo是因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司的主營品牌,，是專業(yè)的生物科技,，醫(yī)藥科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢,、技術(shù)服務(wù),、技術(shù)轉(zhuǎn)讓，實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,、儀器儀表,、醫(yī)療器械、計(jì)算機(jī),、軟件及輔助設(shè)備銷售,，計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理，貨物及技術(shù)進(jìn)出口業(yè)務(wù),。 成像平臺： 1. Inscopix自由活動(dòng)超微顯微成像系統(tǒng) 2. DiveScope多通道內(nèi)窺鏡系統(tǒng) 3. 雙光子顯微鏡 動(dòng)物行為學(xué)平臺： 1. PiezoSleep無創(chuàng)睡眠檢測系統(tǒng) 2. 自身給藥,、條件恐懼、斯金納,、睡眠剝奪,、跑步機(jī)、各類經(jīng)典迷宮等 神經(jīng)電生理： 1.NeuroNexus神經(jīng)電極 2.多通道電生理信號采集系統(tǒng) 3.膜片鉗系統(tǒng) 4.AO功能神經(jīng)外科臨床電生理平臺 顯微細(xì)胞： 1. UnipicK單細(xì)胞挑選及顯微切割系統(tǒng) 科研/臨床級3D打印 1. 德國envisionTEC 3D Bioplotter生物打印機(jī) 2. 韓國Invivo醫(yī)療級生物打印機(jī)等,。公司,，擁有自己**的技術(shù)體系。公司堅(jiān)持以客戶為中心,、生物科技,，醫(yī)藥科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢,、技術(shù)服務(wù),、技術(shù)轉(zhuǎn)讓，實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,、儀器儀表,、醫(yī)療器械、計(jì)算機(jī),、軟件及輔助設(shè)備銷售,，計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理,，貨物及技術(shù)進(jìn)出口業(yè)務(wù)。 成像平臺： 1. Inscopix自由活動(dòng)超微顯微成像系統(tǒng) 2. DiveScope多通道內(nèi)窺鏡系統(tǒng) 3. 雙光子顯微鏡 動(dòng)物行為學(xué)平臺： 1. PiezoSleep無創(chuàng)睡眠檢測系統(tǒng) 2. 自身給藥,、條件恐懼,、斯金納、睡眠剝奪,、跑步機(jī),、各類經(jīng)典迷宮等 神經(jīng)電生理： 1.NeuroNexus神經(jīng)電極 2.多通道電生理信號采集系統(tǒng) 3.膜片鉗系統(tǒng) 4.AO功能神經(jīng)外科臨床電生理平臺 顯微細(xì)胞： 1. UnipicK單細(xì)胞挑選及顯微切割系統(tǒng) 科研/臨床級3D打印 1. 德國envisionTEC 3D Bioplotter生物打印機(jī) 2. 韓國Invivo醫(yī)療級生物打印機(jī)等。市場為導(dǎo)向,，重信譽(yù),，保質(zhì)量，想客戶之所想,，急用戶之所急,，全力以赴滿足客戶的一切需要。誠實(shí),、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,，也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造***的nVista,，nVoke,，3D bioplotte，invivo,。