過去認為,，膜片鉗只能在培養(yǎng)細胞或酶解的細胞上進行，這樣得到的細胞膜表面比較光滑,，才能夠形成高阻封接,，但缺點是組織的正常三維結(jié)構(gòu)被破壞，并且對神經(jīng)中樞內(nèi)突觸特有的傳遞機能的研究無法展開,。于是,，一些學者建立了組織切片膜片鉗技術(shù)（Slicepatch），就能在哺乳動物腦片制備上做全細胞記錄,。1992年,，在腦片膜片鉗技術(shù)上，美國Ferster實驗室報道在在體貓的視皮層用膜片鉗全細胞記錄研究了視刺激誘發(fā)的興奮性和***性突觸后電位相互影響及節(jié)律性膜電位的變化規(guī)律,。1993年,，德國的Dodt和Sakmann合作，利用紅外電視顯微鏡監(jiān)視,，使得膜片鉗記錄不但能夠在神經(jīng)元胞體及其樹突上進行,，而且可同時在這兩個不同的部位作膜片鉗記錄。膜片鉗技術(shù)已成為研究離子通道的"金標準",。高通量全自動膜片鉗市場價

膜片鉗技術(shù)與其它技術(shù)相結(jié)合Neher等**將膜片鉗技術(shù)與Fura2熒光測鈣技術(shù)結(jié)合,，同時進行如細胞內(nèi)熒光強度,、細胞膜離子通道電流及細胞膜電容等多指標變化的快速交替測定,，這樣便可得出同一事件過程中，多種因素各自的變化情況,，進而可分析這些變化間的相互關(guān)系,。Neher將可光解出鈣離子的鈣螯合物引入膜片鉗技術(shù)，進而可以定量研究鈣離子濃度與分泌率的關(guān)系及比較大分泌率等指標,。他又創(chuàng)膜片鉗的膜電容檢測與碳纖電極電化學檢測聯(lián)合運用的技術(shù),。之后又將光電聯(lián)合檢測技術(shù)與碳纖電極電化學檢測技術(shù)首先結(jié)合起來。這種結(jié)合既能研究分泌機制,，又能鑒別分泌物質(zhì),，還能互相彌補各單種方法的不足,。Eberwine等于1991年首先將膜片鉗技術(shù)與RT-PCR技術(shù)結(jié)合起來運用，可對形態(tài)相似而電活動不同的結(jié)果作出分子水平的解釋,，從此開始了膜片鉗與分子生物學技術(shù)相結(jié)合的時代∶基因重組技術(shù),，膜通道蛋白重建技術(shù)。芬蘭腦片膜片鉗電流鉗制小片膜的孤立使對單個離子通道進行研究成為可能,。

ePatch雖然設(shè)備非常小巧,，但功能完備，傳統(tǒng)膜片鉗設(shè)備能做的實驗,，用ePatch幾乎都能做,。具有voltage-clamp，current-clamp,，zero current-clamp三種模式,，自動電極電壓飄移補償，C-fast-C-slow-R-series-P/N補償,，Bridge balance補償?shù)裙δ?。可以做全細胞記錄也可以做單通道記錄,，膜片鉗技術(shù)常做的離子通道電流,，突觸后電流，動作電位檢測等實驗都能輕松實現(xiàn),。公司還為此開發(fā)了友好的控制和記錄軟件,，筆者上手接觸了一下，發(fā)現(xiàn)跟AXON的軟件類似,，并且程序編輯更為簡單易用,。所記錄到的數(shù)據(jù)可以直接使用Clampfit進行分析，可以說對于使用過AXON設(shè)備的膜片鉗工作者來說,，上手毫無難度,。

與藥物作用有關(guān)的心肌離子通道，心肌細胞通過各種離子通道對膜電位和動作電位穩(wěn)態(tài)的維持而保持正常的功能,。近年來,，國外學者在人類心肌細胞離子通道特性的研究中取得了許多進展，使得心肌藥理學實驗由動物細胞模型向人心肌細胞成為可能,。對離子通道生理與病理情況下作用機制的研究,，通過對各種生理或病理情況下細胞膜某種離子通道特性的研究，了解該離子的生理意義及其在疾病過程中的作用機制,。如對鈣離子在腦缺血神經(jīng)細胞損害中作用機制的研究表明,，缺血性腦損害過程中，Ca2+介導現(xiàn)象起非常重要的作用,，缺血缺氧使Ca2+通道開放,，過多的Ca2+進入細胞內(nèi)就出現(xiàn)Ca2+超載,，導致神經(jīng)元及細胞膜損害，膜轉(zhuǎn)運功能障礙,，嚴重的可使神經(jīng)元壞死,。通過膜片鉗放大器的控制鍵將微電極的連接電位（junction potentials）調(diào)至零位。

膜片鉗技術(shù)的創(chuàng)立取代了電壓鉗技術(shù),，是細胞電生理研究的一個飛躍,，使得離子通道的研究，從宏觀深入到微觀,，使昔日的“肉湯生理學(brothphysiology)”與“閃電生理學(lightningphysiology)”在分子水平上結(jié)合起來,，使人們對膜通道的認識耳目一新。當前,，生理學,、生物物理學、生物化學,、分子生物學和藥理學等多種學科正在把膜片鉗技術(shù)和膜通道蛋白重組技術(shù),、同位素示蹤技術(shù)和光譜技術(shù)等非電生理技術(shù)結(jié)合起來，協(xié)同對離子通道進行較全的研究,。不少實驗室已經(jīng)將基因工程與膜片鉗技術(shù)結(jié)合起來,，把通道蛋白有目的地重組于人工膜中進行研究。設(shè)想將合成的通道蛋白分子接種入機體以替換有缺陷和異常的通道的功能而達到的目的,。離子通道的近代觀念源于Hodgkin,、Huxley、Katz等人在20世紀30—50年代的開創(chuàng)性研究,。進口單通道膜片鉗多少錢

屯流鉗素向細胞內(nèi)注入刺激電流,，記錄膜電位對刺激電流的反應。高通量全自動膜片鉗市場價

1976年德國馬普生物物理化學研究所Neher和Sakmann在青蛙肌細胞上用雙電極鉗制膜電位的同時,，記錄到ACh啟動的單通道離子電流,，從而產(chǎn)生了膜片鉗技術(shù)。1980年Sigworth等在記錄電極內(nèi)施加5-50cmH2O的負壓吸引,，得到10-100GΩ的高阻封接（Giga-seal）,，明顯降低了記錄時的噪聲實現(xiàn)了單根電極既鉗制膜片電位又記錄單通道電流的突破。1981年Hamill和Neher等對該技術(shù)進行了改進,，引進了膜片游離技術(shù)和全細胞記錄技術(shù),，從而使該技術(shù)更趨完善,，具有1pA的電流靈敏度,、1μm的空間分辨率和10μs的時間分辨率。1983年10月,，《Single-ChannelRecording》一書問世,，奠定了膜片鉗技術(shù)的里程碑,。Sakmann和Neher也因其杰出的工作和突出貢獻，榮獲1991年諾貝爾醫(yī)學和生理學獎,。高通量全自動膜片鉗市場價

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