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美國共聚焦多光子顯微鏡峰值功率密度

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-04-14

世界多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)業(yè)主要布局在德國和日本,,德國是以徠卡顯微系統(tǒng)和蔡司為,,而日本以尼康和奧林巴斯公司為,2020年,,上述企業(yè)占據(jù)著世界多光子激光掃描顯微鏡市場(chǎng)64.44%的市場(chǎng)份額,其發(fā)展戰(zhàn)略左右著多光子激光掃描顯微鏡市場(chǎng)的走向,。目前世界市場(chǎng)對(duì)多光子激光掃描顯微鏡的需求在增長(zhǎng),中國市場(chǎng)這方面的需求增長(zhǎng)更快,,未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場(chǎng)的發(fā)展在中國將具有很大的發(fā)展?jié)摿Α鴥?nèi)顯微鏡制造市場(chǎng)目前斷層嚴(yán)重,。目前我國顯微鏡行業(yè)發(fā)展缺乏技術(shù)沉淀,,20年以上經(jīng)營積累的企業(yè)十分稀缺,,深度精密制造,、光學(xué)重要部件設(shè)計(jì)及工藝嚴(yán)重制約產(chǎn)業(yè)升級(jí)。目前中國顯微鏡中如多光子顯微鏡,、共聚焦掃描和電子顯微鏡等主要集中在徠卡顯微系統(tǒng)、蔡司,、尼康、奧林巴斯等國外企業(yè),。國內(nèi)具備生產(chǎn)顯微鏡能力的企業(yè)屈指可數(shù),若國內(nèi)顯微鏡企業(yè)能打破技術(shù)壁壘,,切入顯微鏡市場(chǎng),企業(yè)的生產(chǎn)經(jīng)營將騰躍至一個(gè)更高的格局,。世界多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)業(yè)主要布局在德國和日本,德國是徠卡顯微系統(tǒng)和蔡司,。美國共聚焦多光子顯微鏡峰值功率密度

美國共聚焦多光子顯微鏡峰值功率密度,多光子顯微鏡

對(duì)于雙光子(2P)成像而言,,離焦和近表面熒光激發(fā)是兩個(gè)比較大的深度限制因素,而對(duì)于三光子(3P)成像這兩個(gè)問題大大減小,,但是三光子成像由于熒光團(tuán)的吸收截面比2P要小得多,所以需要更高數(shù)量級(jí)的脈沖能量才能獲得與2P激發(fā)的相同強(qiáng)度的熒光信號(hào),。功能性3P顯微鏡比結(jié)構(gòu)性3P顯微鏡的要求更高,它需要更快速的掃描,,以便及時(shí)采樣神經(jīng)元活動(dòng);需要更高的脈沖能量,,以便在每個(gè)像素停留時(shí)間內(nèi)收集足夠的信號(hào),。復(fù)雜的行為通常涉及到大型的大腦神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),,該網(wǎng)絡(luò)既具有局部的連接又具有遠(yuǎn)程的連接。要想將神經(jīng)元活動(dòng)與行為聯(lián)系起來,,需要同時(shí)監(jiān)控非常龐大且分布普遍的神經(jīng)元的活動(dòng),,大腦中的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)會(huì)在幾十毫秒內(nèi)處理傳入的刺激,要想了解這種快速的神經(jīng)元?jiǎng)恿W(xué),,就需要MPM具備對(duì)神經(jīng)元進(jìn)行快速成像的能力,??焖費(fèi)PM方法可分為單束掃描技術(shù)和多束掃描技術(shù)。美國bruker多光子顯微鏡數(shù)據(jù)采集多光子顯微鏡市場(chǎng)集中,,由于投產(chǎn)生產(chǎn)的成本較高,,技術(shù)難度大,,目前涌現(xiàn)的新企業(yè)不多。

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Ca2+是一種重要的第二信使,,在調(diào)節(jié)細(xì)胞生理反應(yīng)中起著重要作用,。發(fā)展和利用雙光子熒光顯微成像技術(shù)觀測(cè)Ca2+熒光信號(hào),可以從某些方面分析生物體或細(xì)胞的變化機(jī)制,,具有重要意義,。利用雙光子熒光顯微成像技術(shù),,我們可以觀察到細(xì)胞內(nèi)熒光探針標(biāo)記的Ca2*的時(shí)間和空間熒光圖像的變化,,也可以觀察到一定水平或部分細(xì)胞內(nèi)(Ca2+)的熒光圖像和變化,。通過對(duì)單個(gè)細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn),,Ca2+的分布不僅在細(xì)胞的局部區(qū)域之間是不均勻的,而且在細(xì)胞內(nèi)不同深度或?qū)哟蔚木植繀^(qū)域之間也存在不同程度的Ca2+梯度,稱為空間Ca2+梯度,。

對(duì)于兩個(gè)遠(yuǎn)距離(相距1-2mm以上)的成像部位,通常采用兩個(gè)**的路徑進(jìn)行成像,;對(duì)于相鄰區(qū)域,,通常使用單個(gè)物鏡的多個(gè)光束進(jìn)行成像。多光束掃描技術(shù)必須特別注意激發(fā)光束之間的串?dāng)_,,這可以通過事后光源分離或時(shí)空復(fù)用來解決,。事后光源分離法是指分離光束以消除串?dāng)_的算法,;時(shí)空復(fù)用法是指同時(shí)使用多個(gè)激發(fā)光束,每個(gè)光束的脈沖在時(shí)間上被延遲,,使不同光束激發(fā)的單個(gè)熒光信號(hào)可以暫時(shí)分離。引入的光束越多,,可以成像的神經(jīng)元越多,,但多束會(huì)導(dǎo)致熒光衰減時(shí)間重疊增加,,從而限制了分辨信號(hào)源的能力,;并且復(fù)用對(duì)電子設(shè)備的工作速度要求很高,;大量的光束也需要較高的激光功率來維持單束的信噪比,,這樣容易導(dǎo)致組織損傷,。多光子顯微鏡涉及醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、化學(xué),、物理學(xué)、電子學(xué),、工程學(xué)等學(xué)科,,生產(chǎn)工藝相對(duì)復(fù)雜,進(jìn)入門檻較高,。

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有許多方法可以實(shí)現(xiàn)快速光柵掃描,,例如使用振鏡進(jìn)行快速2D掃描,以及將振鏡與可調(diào)電動(dòng)透鏡相結(jié)合進(jìn)行快速3D掃描。而可調(diào)電動(dòng)式鏡頭由于機(jī)械慣性的限制,,無法在軸向快速切換焦點(diǎn),影響成像速度?,F(xiàn)在它可以被空間光調(diào)制器(SLM)取代,。遠(yuǎn)程對(duì)焦也是實(shí)現(xiàn)3D成像的一種手段,如圖2所示。LSU模塊中,,掃描振鏡水平掃描,ASU模塊包括物鏡L1和反射鏡M,,通過調(diào)整M的位置實(shí)現(xiàn)軸向掃描該技術(shù)不僅可以校正主物鏡L2引入的光學(xué)像差,,還可以進(jìn)行快速軸向掃描,。為了獲得更多的神經(jīng)元成像,可以通過調(diào)整顯微鏡的物鏡設(shè)計(jì)來放大FOV,。然而,,大NA和大FOV的物鏡通常很重,,不能快速移動(dòng)以進(jìn)行快速軸向掃描,,因此大FOV系統(tǒng)依賴于遠(yuǎn)程聚焦,、SLM和可調(diào)電動(dòng)透鏡,。多光子顯微鏡能提供多種對(duì)比度機(jī)制。美國bruker多光子顯微鏡數(shù)據(jù)采集

多光子顯微鏡的成熟的深部組織成像技術(shù)中。還有其他類型的圖像對(duì)比提供有關(guān)樣本的有價(jià)值信息。美國共聚焦多光子顯微鏡峰值功率密度

對(duì)于雙光子成像而言,,離焦和近表面熒光激發(fā)是兩個(gè)比較大的深度限制因素,,而對(duì)于三光子(3P)成像這兩個(gè)問題大大減小,,但是三光子成像由于熒光團(tuán)的吸收截面比2P要小得多,,所以需要更高數(shù)量級(jí)的脈沖能量才能獲得與2P激發(fā)的相同強(qiáng)度的熒光信號(hào),。功能性3P顯微鏡比結(jié)構(gòu)性3P顯微鏡的要求更高,,它需要更快速的掃描,,以便及時(shí)采樣神經(jīng)元活動(dòng);需要更高的脈沖能量,,以便在每個(gè)像素停留時(shí)間內(nèi)收集足夠的信號(hào),。復(fù)雜的行為通常涉及到大型的大腦神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),,該網(wǎng)絡(luò)既具有局部的連接又具有遠(yuǎn)程的連接,。要想將神經(jīng)元活動(dòng)與行為聯(lián)系起來,,需要同時(shí)監(jiān)控非常龐大且分布普遍的神經(jīng)元的活動(dòng),,大腦中的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)會(huì)在幾十毫秒內(nèi)處理傳入的刺激,要想了解這種快速的神經(jīng)元?jiǎng)恿W(xué),,就需要MPM具備對(duì)神經(jīng)元進(jìn)行快速成像的能力??焖費(fèi)PM方法可分為單束掃描技術(shù)和多束掃描技術(shù)。美國共聚焦多光子顯微鏡峰值功率密度

因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司成立于2019-05-27,,位于中山北路1759號(hào)浦發(fā)廣場(chǎng)D座803,,公司自成立以來通過規(guī)范化運(yùn)營和高質(zhì)量服務(wù),贏得了客戶及社會(huì)的一致認(rèn)可和好評(píng),。公司具有nVista,,nVoke,,3D bioplotte,,invivo等多種產(chǎn)品,,根據(jù)客戶不同的需求,,提供不同類型的產(chǎn)品,。公司擁有一批熱情敬業(yè),、經(jīng)驗(yàn)豐富的服務(wù)團(tuán)隊(duì),為客戶提供服務(wù),。Inscopix,envisionTEC,rokit,piezosleep,stoeltingco,unipick,neuronexus,scientifica,alphaomega,divescope,invivo以符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品質(zhì)量為目標(biāo),,并始終如一地堅(jiān)守這一原則,,正是這種高標(biāo)準(zhǔn)的自我要求,產(chǎn)品獲得市場(chǎng)及消費(fèi)者的高度認(rèn)可,。因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司以先進(jìn)工藝為基礎(chǔ),、以產(chǎn)品質(zhì)量為根本,、以技術(shù)創(chuàng)新為動(dòng)力,,開發(fā)并推出多項(xiàng)具有競(jìng)爭(zhēng)力的nVista,,nVoke,,3D bioplotte,,invivo產(chǎn)品,,確保了在nVista,nVoke,,3D bioplotte,invivo市場(chǎng)的優(yōu)勢(shì),。