鈣離子在很多生理活動中都發(fā)揮著重要作用,，除了在肌肉細(xì)胞收縮中扮演著重要角色，鈣離子也是神經(jīng)元活動的重要“風(fēng)向標(biāo)”之一：當(dāng)神經(jīng)元膜電位發(fā)生去極化，產(chǎn)生的動作電位傳導(dǎo)到神經(jīng)元軸突末梢時,，細(xì)胞膜上的電壓門控鈣離子通道打開,，大量鈣離子內(nèi)流，包含神經(jīng)遞質(zhì)的囊泡由突觸前膜釋放至后膜,，下游神經(jīng)元就得以接受到上游的信號,。因此，鈣離子成像可以追蹤神經(jīng)元動作電位,，從而幫助我們了解神經(jīng)元集群的活動,，可以用于感知覺，學(xué)習(xí)記憶,，社會性行為等各種各樣的研究中,。通過鈣成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)神經(jīng)元的活動與其內(nèi)部的鈣離子濃度密切相關(guān)。重慶inscopix鈣成像什么價格

傳統(tǒng)的寬場熒光顯微鏡由于光散射的影響,，只能夠?qū)Υ竽X淺層的神經(jīng)元或在離體組織上進(jìn)行成像,，共聚焦顯微鏡由于光損傷較大，一般也只用于離體鈣成像,。隨著熒光顯微鏡技術(shù)的迅速發(fā)展,，在體鈣成像技術(shù)得到了蓬勃發(fā)展。雙光子熒光顯微鏡能夠在進(jìn)行活動動物成像的時候?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高信噪比,。例如,，用雙光子顯微鏡對海馬樹突棘的鈣離子信號進(jìn)行成像，研究神經(jīng)元突觸后長時程yizhi(Wangetal.,2000),；觀察活動小鼠運動皮層神經(jīng)元在嗅覺選擇任務(wù)中刺激相關(guān)電位(Komiyamaetal.,2010)等等,。不過，這些實驗還是需要對動物進(jìn)行麻醉和固定,，而神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域很多研究更希望能夠?qū)ψ杂苫顒拥膭游镞M(jìn)行研究,。上海神經(jīng)細(xì)胞鈣成像生產(chǎn)廠家鈣離子能產(chǎn)生許多控制細(xì)胞功能的胞內(nèi)信號，如突觸囊泡中神經(jīng)遞質(zhì)的釋放等,。

單光子顯微技術(shù)是*成熟的熒光顯微技術(shù)，但由于單光子顯微技術(shù)使用的激發(fā)光波長較短,，成像深度比較有限,；能量比較大,會造成對熒光物質(zhì)的漂白,光毒性嚴(yán)重。激光共焦掃描顯微鏡由于共焦顯微鏡的孔徑很小,實現(xiàn)樣本三維成像要逐點掃描,成像速度慢,對樣本損害大,很難用于長時間活細(xì)胞成像實驗,。而寬場顯微鏡能夠很好地實現(xiàn)實時動態(tài)成像,光漂白小,因而較早應(yīng)用于活細(xì)胞內(nèi)的實時檢測,，但寬場顯微鏡由于離焦信號的干擾,難以實現(xiàn)多維成像。

在神經(jīng)系統(tǒng)研究中,，我們常使用鈣指示劑表征鈣離子濃度變化,，以反映神經(jīng)元的活動。常見的鈣成像方法有雙光子熒光成像和單光子熒光成像兩種,，其中后者是研究腦神經(jīng)活動的常用方法,。但與雙光子成像相比,，單光子成像更易受到來自神經(jīng)元的高水平串?dāng)_，導(dǎo)致信噪比降低,。不僅如此,，采集活動信號時還易被來自近距離通過的軸突和樹突的信號所污染，造成的非特異性信號,，這些均嚴(yán)重影響對神經(jīng)元活動反應(yīng)的精細(xì)成像,。因而，在單光子熒光成像的基礎(chǔ)上,，研究團隊在細(xì)胞核中表達(dá)遺傳編碼的鈣指示劑,，從而消除神經(jīng)纖維信號。但與經(jīng)典的胞質(zhì)鈣成像相比,，鈣進(jìn)入細(xì)胞核的要求降低了這種成像的時間精度,。利用特殊的熒光染料或鈣離子指示劑，將神經(jīng)元中鈣離子濃度的變化通過熒光強度表現(xiàn)出來,。

雙光子熒光顯微鏡（Two-PhotonLaser-ScanningMicroscopy）,。雙光子顯微成像技術(shù)是近些年發(fā)展起來的結(jié)合了共聚焦激光掃描顯微鏡和雙光子激發(fā)技術(shù)的一種新型非線性光學(xué)成像方法,采用長波激發(fā)，能對組織進(jìn)行深層次成像,。常用的比較好激發(fā)波長大多位于800-900nm,，而水、血液和固有組織發(fā)色團對這個波段的光吸收率低,，此外散射的激發(fā)光子不能激發(fā)樣品,，因此背景第，光損傷小,，適用于在體檢測,。雙光子熒光成像技術(shù)能準(zhǔn)確定位細(xì)胞內(nèi)置入的微電極位置，從而觀察胞體,、樹突甚至單個樹突棘的活性,。研究者可完整的觀察神經(jīng)組織的gaofen辨熒光圖像,甚至可以分辨神經(jīng)細(xì)胞單個樹突棘中的鈣分布。我們的鈣成像系統(tǒng)集成自動控制和精確計時的多模式輸入端口,。合肥超微顯微鈣成像

傳統(tǒng)鈣成像實驗要求成像的光路極為穩(wěn)定,。重慶inscopix鈣成像什么價格

鈣成像具有以下幾個優(yōu)勢：1.非侵入性：鈣成像技術(shù)可以在活物細(xì)胞或組織中進(jìn)行觀察，無需破壞細(xì)胞或組織的完整性,，因此是一種非侵入性的技術(shù),。2.高時空分辨率：鈣成像技術(shù)可以實時觀察細(xì)胞內(nèi)鈣離子的動態(tài)變化，具有較高的時空分辨率,?？梢圆蹲降解}離子濃度的瞬時變化，揭示細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)的快速過程。3.多樣性：鈣成像技術(shù)可以使用不同的熒光探針或基因工程技術(shù),，實現(xiàn)對不同類型的細(xì)胞或組織進(jìn)行鈣成像,。可以根據(jù)需要選擇適合的探針或方法,，擴展應(yīng)用范圍,。4.可定量分析：通過鈣成像技術(shù)可以獲得熒光信號的強度，可以進(jìn)行定量分析,，了解鈣離子濃度的變化程度,。可以通過比較不同條件下的鈣成像結(jié)果,，研究因素對鈣離子信號的調(diào)控作用,。5.可應(yīng)用于多個領(lǐng)域：鈣成像技術(shù)廣泛應(yīng)用于神經(jīng)科學(xué)、細(xì)胞生物學(xué),、藥理學(xué)等領(lǐng)域,。可以研究神經(jīng)元活動,、細(xì)胞信號傳導(dǎo),、細(xì)胞凋亡等生物過程，有助于揭示生物學(xué)機制和疾病發(fā)生及發(fā)展的過程,。綜上所述,，鈣成像技術(shù)具有非侵入性、高時空分辨率,、多樣性,、可定量分析和廣泛應(yīng)用于多個領(lǐng)域等優(yōu)勢，成為研究細(xì)胞內(nèi)鈣離子動態(tài)變化的重要工具,。重慶inscopix鈣成像什么價格