膜片鉗技術(shù)是一種細(xì)胞內(nèi)記錄技術(shù),，是研究離子通道活動(dòng)的蕞佳工具,，也是應(yīng)用蕞廣的電生理技術(shù)之一。該技術(shù)通過施加負(fù)壓將微玻管電極（膜片電極或膜片吸管）的前端與細(xì)胞膜緊密接觸,，形成GΩ以上的阻抗,，使電極開口處的細(xì)胞膜與其周圍膜在電學(xué)上絕緣。被孤立的小膜片面積為μm量級(jí),，內(nèi)中只有少數(shù)離子通道,。玻璃微電極中含有一根浸入電解溶液中的導(dǎo)線，用于傳導(dǎo)離子,。在此基礎(chǔ)上對(duì)該膜片施行電壓鉗位（即保持跨膜電壓恒定）,，如果單個(gè)離子通道被包含在膜片內(nèi)，則可對(duì)此膜片上的離子通道的電流進(jìn)行監(jiān)測(cè)記錄,。通過觀測(cè)單個(gè)通道開放和關(guān)閉的電流變化,，可直接得到各種離子通道開放的電流幅值分布、開放幾率,、開放壽命分布等功能參量,，并分析它們與膜電位、離子濃度等之間的關(guān)系,。還可把吸管吸附的膜片從細(xì)胞膜上分離出來,，以膜的外側(cè)向外或膜的內(nèi)側(cè)向外等方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。這種技術(shù)對(duì)小細(xì)胞的電壓鉗位,、改變膜內(nèi)外溶液成分以及施加藥物都很方便,。封接是膜片鉗記錄的關(guān)鍵步驟之一。德國細(xì)胞膜片鉗解決方案

高阻封接問題的解決不僅改善了電流記錄性能,，還隨之出現(xiàn)了研究通道電流的多種膜片鉗方式,。根據(jù)不同的研究目的，可制成不同的膜片構(gòu)型,。(1)細(xì)胞吸附膜片(cell-attachedpatch)將兩次拉制后經(jīng)加熱拋光的微管電極置于清潔的細(xì)胞膜表面上,，形成高阻封接，在細(xì)胞膜表面隔離出一小片膜，既而通過微管電極對(duì)膜片進(jìn)行電壓鉗制,，分辨測(cè)量膜電流,，稱為細(xì)胞貼附膜片。由于不破壞細(xì)胞的完整性,，這種方式又稱為細(xì)胞膜上的膜片記錄。此時(shí)跨膜電位由玻管固定電位和細(xì)胞電位決定,。因此,，為測(cè)定膜片兩側(cè)的電位，需測(cè)定細(xì)胞膜電位并從該電位減去玻管電位,。從膜片的通道活動(dòng)看,，這種形式的膜片是極穩(wěn)定的，因細(xì)胞骨架及有關(guān)代謝過程是完整的,，所受的干擾小,。德國多通道膜片鉗實(shí)驗(yàn)操作神經(jīng)遞質(zhì)的釋放、腺體的分泌,、肌肉的運(yùn)動(dòng),、學(xué)習(xí)和記憶。

對(duì)電極持續(xù)施加一個(gè)1mV,、10～50ms的階躍脈沖刺激,，電極入水后電阻約4～6MΩ，此時(shí)在計(jì)算機(jī)屏幕顯示框中可看到測(cè)試脈沖產(chǎn)生的電流波形,。開始時(shí)增益不宜設(shè)得太高,，一般可在1～5mV/pA，以免放大器飽和,。由于細(xì)胞外液與電極內(nèi)液之間離子成分的差異造成了液結(jié)電位,，故一般電極剛?cè)胨畷r(shí)測(cè)試波形基線并不在零線上，須首先將保持電壓設(shè)置為0mV,，并調(diào)節(jié)“電極失調(diào)控制“使電極直流電流接近于零,。用微操縱器使電極靠近細(xì)胞，當(dāng)電極前列與細(xì)胞膜接觸時(shí)封接電阻指示Rm會(huì)有所上升,，將電極稍向下壓,，Rm指示會(huì)進(jìn)一步上升。通過細(xì)塑料管向電極內(nèi)稍加負(fù)壓,，細(xì)胞膜特性良好時(shí),，Rm一般會(huì)在1min內(nèi)快速上升，直至形成GΩ級(jí)的高阻抗封接,。一般當(dāng)Rm達(dá)到100MΩ左右時(shí),，電極前列施加輕微負(fù)電壓(-30～-10mV)有助于GΩ封接的形成。此時(shí)的現(xiàn)象是電流波形再次變得平坦，使電極超極化由-40到-90mV,，有助于加速形成封接,。為證實(shí)GΩ封接的形成，可以增加放大器的增益,，從而可以觀察到除脈沖電壓的首尾兩端出現(xiàn)電容性脈沖前列電流之外,，電流波形仍呈平坦?fàn)睢Ｌ喜┥颰OP-Bright專注基于多種離子通道靶點(diǎn)的化合物體外篩選,服務(wù)于全球藥企的膜片鉗公司,快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果,專業(yè)團(tuán)隊(duì),7*55小時(shí)隨時(shí)人工在線咨詢.

20世紀(jì)初由Cole發(fā)明,，Hodgkin和Huxleyw完善,，目的是為了證明動(dòng)作電位的峰電位是由于膜對(duì)鈉的通透性發(fā)生了一過性的增大過程。但當(dāng)時(shí)沒有直接測(cè)定膜通透性的辦法,，于是就用膜對(duì)某種離子的電導(dǎo)來**該種離子的通透性,。為了弄清膜電導(dǎo)變化的機(jī)制和離子通道的存在，也為了克服電壓鉗的缺點(diǎn)Erwin和Bert在電壓鉗的基礎(chǔ)上發(fā)明了膜片鉗,，并利用該技術(shù)***在蛙肌膜上記錄到PA級(jí)的乙酰膽堿激動(dòng)的單通道電流,，***證明了離子通道的存在。并證明在完整細(xì)胞膜上記錄到膜電流是許多單通道電流總和的結(jié)果,。這一技術(shù)被譽(yù)為與分子克隆技術(shù)并駕齊驅(qū)的劃時(shí)代的偉大發(fā)明,。二人因此獲得諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。全細(xì)胞膜片鉗記錄是應(yīng)用較早,，也是普遍的鉗位技術(shù),。

ePatch的一些設(shè)計(jì)亮點(diǎn)還包括:可以在軟件中用數(shù)據(jù)記錄實(shí)驗(yàn)，不用帶專門的實(shí)驗(yàn)筆記本,，也不用擔(dān)心這個(gè)筆記本上記錄的內(nèi)容找不到對(duì)應(yīng)的數(shù)據(jù),，系統(tǒng)會(huì)一一對(duì)應(yīng)。電壓電流刺激模式的編輯就更蠢了,。很多模塊可以直接拖拽,，并配有樣圖，讓你對(duì)自己編輯的程序一目了然,。實(shí)時(shí)全電池參數(shù)估計(jì),，包括強(qiáng)大的密封電阻、膜電容,、膜電阻等重要參數(shù)在線分析功能,，包括電壓鉗模式下的I/Vgraph、eventdetection,、FFT,，電流鉗模式下的APthresholddetection、APfrequency,、APslope等數(shù)據(jù)可以多種格式保存,。如果你是程序員,，可以支持使用Matlab進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。如果沒有這樣的經(jīng)歷,，就沒有問題,。數(shù)據(jù)可以保存為Clampfit，以便直接分析,。細(xì)胞是動(dòng)物和人體的基本組成單元,，細(xì)胞與細(xì)胞內(nèi)的通信,是依靠其膜上的離子通道進(jìn)行的。芬蘭多通道膜片鉗蛋白質(zhì)分子水平

通過膜片鉗放大器的控制鍵將微電極的連接電位（junction potentials）調(diào)至零位,。德國細(xì)胞膜片鉗解決方案

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