雙光子熒光顯微鏡是激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發(fā)技術(shù)相結(jié)合的新技術(shù),。雙光子激發(fā)的基本原理是:在光子密度較高的情況下,,熒光分子可以同時(shí)吸收兩個(gè)波長(zhǎng)較長(zhǎng)的光子,經(jīng)過(guò)短暫的所謂激發(fā)態(tài)壽命后,發(fā)射一個(gè)波長(zhǎng)較短的光子,;效果和用波長(zhǎng)為長(zhǎng)波長(zhǎng)一半的光子激發(fā)熒光分子是一樣的。雙(多)光子成像的優(yōu)點(diǎn)是具有更深的組織穿透深度,,紅外光可以在平面上探測(cè)到極限為1mm的組織區(qū)域,;因?yàn)樾盘?hào)背景比高,所以具有更高的對(duì)比度,;由于激發(fā)體積小,,具有定點(diǎn)激發(fā)、光毒性小的特點(diǎn),;激發(fā)波長(zhǎng)由紫外,、可見光調(diào)整為紅外激發(fā),更加安全,。雙光子顯微鏡品牌有哪些,?國(guó)內(nèi)熒光激光雙光子顯微鏡供應(yīng)商聯(lián)系方式
光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡本質(zhì)的區(qū)別在于,光學(xué)顯微鏡:用的是可見光電子顯微鏡:用的是高頻電子射波有什么區(qū)別,,在于一個(gè)基本的原理,,光的衍射。,。,。光波是一個(gè)有趣的東西,其中有一項(xiàng),,如果物體的體積小于光的波長(zhǎng),,光一般可以繞過(guò)去,不發(fā)生明顯變化,。也就是說(shuō),,有這個(gè)物體和沒(méi)這個(gè)物體,在這種情況下,,光是不會(huì)發(fā)生明顯改變的,。可見光的波長(zhǎng)(肉眼):380~780納米,,也就是,,如果比380納米還要小的東西,用光學(xué)顯微鏡,,無(wú)論你放大多少倍,,也是看不見的。因?yàn)楣饫@過(guò)去了,。,。,。光的衍射為了克服這個(gè)問(wèn)題,科學(xué)家用波長(zhǎng)更短的光去照射物體,,也是就被觀測(cè)物,。比如10納米級(jí)的光,這樣,,就能看到我們用肉眼無(wú)論如何都看不見的東西,。這就是電子顯微鏡多說(shuō)一句,光速是不變的,。光速=頻率×波長(zhǎng),。波長(zhǎng)越短,頻率越大,。,。頻率越大,光波的能量越大,。這就是為什么電子顯微鏡的功率越大,,能看到的東西越小。顏色取決于物體能反射光的波長(zhǎng)的長(zhǎng)短當(dāng)你看到的物體小于較小可見光的波長(zhǎng),,那它就是沒(méi)有顏色的,。。,。因?yàn)轭伾侨庋蹖?duì)于可見光頻率在大腦中的投影,。。,。,。所以只能把他們統(tǒng)一變?yōu)楹诎住?。。沒(méi)有顏色不是透明的意思,,它們不是肉眼可見顏色的定義中包含的,。國(guó)外熒光雙光子顯微鏡分辨率雙光子顯微鏡放大倍數(shù)是多少?
共聚焦顯微可以呈現(xiàn)這么漂亮的圖像,,是不是什么樣品都可以用共聚焦顯微鏡拍拍拍.....得到各種各樣清晰漂亮的圖像呢,?答案是否定的,任何事物都有優(yōu)缺點(diǎn),,何況一臺(tái)儀器呢,,共聚焦顯微鏡也是有自己的局限,共聚焦有哪些局限呢:1.共聚焦顯微鏡只能拍攝約200um以內(nèi)的的樣品,對(duì)于厚的或者樣品不能進(jìn)拍攝,;2.共聚焦顯微鏡由于是逐點(diǎn)進(jìn)行掃描,,對(duì)樣品的光毒性還是比較大的,,特別是拍攝活細(xì)胞樣品時(shí)就更容易對(duì)樣品進(jìn)行淬滅;3.由于光照射的區(qū)域幾乎能通過(guò)這個(gè)Z軸的層面,,所以對(duì)于空間定點(diǎn)光刺激的實(shí)驗(yàn)定點(diǎn)位置就不是特別精確,;并且激光共聚焦顯微鏡沒(méi)有純紫外進(jìn)行激發(fā),對(duì)于一些特殊激發(fā)波長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn),,效率非常低,。
雙光子顯微鏡(2PM)可以對(duì)鈣離子傳感器和谷氨酸傳感器進(jìn)行亞細(xì)胞分辨率的成像,從而測(cè)量不透明腦深部的活動(dòng),。成像膜的電壓變化可以直接反映神經(jīng)元的活動(dòng),,但神經(jīng)元活動(dòng)的速度對(duì)于常規(guī)的2PM來(lái)說(shuō)太快了。目前,,電壓成像主要由寬視場(chǎng)顯微鏡實(shí)現(xiàn),,但其空間分辨率較差,且只能在淺深度成像,。因此,,為了以高空間分辨率成像不透明腦中膜電壓的變化,需要將成像速率提高2PM,。面向模塊輸出端的子脈沖序列可視為從虛擬光源陣列發(fā)出的光,,這些子脈沖在中繼到顯微鏡物鏡后形成空間分離和時(shí)間延遲的聚焦陣列。然后,,該模塊被集成到一個(gè)帶有高速數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)雙光子熒光顯微鏡中,,如圖2所示。光源是重復(fù)頻率為1MHz的920nm激光器,。FACED模塊可以產(chǎn)生80個(gè)脈沖焦點(diǎn),,脈沖時(shí)間間隔為2ns。這些焦點(diǎn)是虛擬源的圖像,。虛光源越遠(yuǎn),,物鏡處的光束尺寸越大,焦點(diǎn)越小,。光束可以沿Y軸比沿X軸更好地填充物鏡,,從而在X軸上產(chǎn)生0.82m和0.35m的橫向分辨率。雙光子顯微鏡觀察到的現(xiàn)象證明了鈣離子的增加依賴于肌體觸發(fā)的鈉離子作用電勢(shì),。
雙光子顯微鏡是激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發(fā)技術(shù)相結(jié)合的新技術(shù),。雙光子激發(fā)的基本原理是:在光子密度較高的情況下,熒光分子可以同時(shí)吸收兩個(gè)波長(zhǎng)較長(zhǎng)的光子,,經(jīng)過(guò)短暫的所謂激發(fā)態(tài)壽命后,,發(fā)射一個(gè)波長(zhǎng)較短的光子;效果和用波長(zhǎng)為長(zhǎng)波長(zhǎng)一半的光子激發(fā)熒光分子是一樣的,。雙(多)光子成像的優(yōu)點(diǎn)是具有更深的組織穿透深度,,紅外光可以在平面上探測(cè)到極限為1mm的組織區(qū)域,;因?yàn)樾盘?hào)背景比高,所以具有更高的對(duì)比度,;由于激發(fā)體積小,,具有定點(diǎn)激發(fā)、光毒性小的特點(diǎn),;激發(fā)波長(zhǎng)由紫外,、可見光調(diào)整為紅外激發(fā),更加安全,。雙光子顯微鏡有哪些應(yīng)用呢,?進(jìn)口ultima2PPLUS雙光子顯微鏡光毒性
雙光子顯微鏡使用高能量鎖模脈沖器。國(guó)內(nèi)熒光激光雙光子顯微鏡供應(yīng)商聯(lián)系方式
雙光子顯微鏡的應(yīng)用由于適合動(dòng)態(tài)成像,,雙光子顯微鏡一經(jīng)問(wèn)世便很快應(yīng)用于神經(jīng)科學(xué),、遺傳發(fā)育、藥物代謝等領(lǐng)域,。雙光子顯微鏡能夠在細(xì)胞甚至是亞細(xì)胞水平上對(duì)***神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),、離子濃度、細(xì)胞運(yùn)動(dòng),、分子相互作用等進(jìn)行直接成像監(jiān)測(cè),,而且能夠進(jìn)行光裂解、光轉(zhuǎn)染和光損傷等光學(xué)操縱,。同時(shí),,雙光子顯微鏡能動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)**在體內(nèi)的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,并可對(duì)**治療過(guò)程中*細(xì)胞的變化進(jìn)行實(shí)時(shí)觀測(cè)和評(píng)估,。隨著光學(xué)技術(shù),、熒光探針技術(shù)、計(jì)算機(jī)成像技術(shù)的發(fā)展,,雙光子顯微技術(shù)會(huì)得到更大提升和更廣的應(yīng)用,,未來(lái)不僅用于基礎(chǔ)研究,也將擴(kuò)展到臨床應(yīng)用,。國(guó)內(nèi)熒光激光雙光子顯微鏡供應(yīng)商聯(lián)系方式