在神經(jīng)系統(tǒng)研究中，我們常使用鈣指示劑表征鈣離子濃度變化,，以反映神經(jīng)元的活動(dòng),。常見的鈣成像方法有雙光子熒光成像和單光子熒光成像兩種，其中后者是研究腦神經(jīng)活動(dòng)的常用方法,。但與雙光子成像相比,，單光子成像更易受到來(lái)自神經(jīng)元的高水平串?dāng)_，導(dǎo)致信噪比降低,。不僅如此,，采集活動(dòng)信號(hào)時(shí)還易被來(lái)自近距離通過(guò)的軸突和樹突的信號(hào)所污染，造成的非特異性信號(hào),，這些均嚴(yán)重影響對(duì)神經(jīng)元活動(dòng)反應(yīng)的精細(xì)成像,。因而，在單光子熒光成像的基礎(chǔ)上,，研究團(tuán)隊(duì)在細(xì)胞核中表達(dá)遺傳編碼的鈣指示劑,，從而消除神經(jīng)纖維信號(hào)。但與經(jīng)典的胞質(zhì)鈣成像相比,，鈣進(jìn)入細(xì)胞核的要求降低了這種成像的時(shí)間精度。鈣離子成像可以用于感知覺,，學(xué)習(xí)記憶,，社會(huì)性行為等各種各樣的研究中。南京熒光鈣成像供應(yīng)商

目前有三種在神經(jīng)元上填充鈣離子指示劑的方法,，且都可以用于體內(nèi)和體外研究,。第一種方法是利用玻璃吸管將膜滲透性鹽或葡聚糖形式的指示劑注入單個(gè)神經(jīng)元中。此方法方便實(shí)驗(yàn)者控制單個(gè)神經(jīng)元內(nèi)的鈣離子指示劑濃度且信噪比較高,。第二種是利用“批量加載”的方法將鈣離子指示劑染料負(fù)載神經(jīng)元,，觀察對(duì)象為一群神經(jīng)元。盡管此方法可能導(dǎo)致一些膠質(zhì)細(xì)胞也被指示劑所標(biāo)記,，但提高了整體神經(jīng)元的標(biāo)記百分比,，使研究者得以觀察到一群神經(jīng)元內(nèi)動(dòng)作電位相關(guān)性的活動(dòng)。第三種也較為常用,，通過(guò)病毒轉(zhuǎn)染的方式使其基因編碼鈣離子指示劑,。（A）單細(xì)胞注射法,；（B）networkloading法；（C）通過(guò)病毒轉(zhuǎn)染使其基因編碼鈣離子指示劑（expressionofgeneticallyencodedcalciumindicators,GECI）哈爾濱超微顯微鈣成像采購(gòu)信息有了鈣成像技術(shù),，原本悄無(wú)聲息的神經(jīng)活動(dòng)就變成了一幅斑斕閃爍的壯觀影像,。

Anderson研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室雄性小鼠對(duì)雌性和雄性的攀爬行為可以通過(guò)是否存在超聲發(fā)聲（USV）來(lái)區(qū)分。這些和更多的行為數(shù)據(jù)表明,，大多數(shù)雄性主導(dǎo)的攀爬是攻擊性的,，盡管在極少數(shù)情況下可能是性行為。研究人員調(diào)查了USV+和USV-攀爬是否使用相同或不同的下丘腦神經(jīng)基質(zhì),。通過(guò)使用Inscopix自由行為顯微鈣成像方法觀察內(nèi)側(cè)視前區(qū)（MPOA）或腹內(nèi)側(cè)下丘腦腹側(cè)細(xì)分（VMHvl）中雌jisu受體1(ESR1)陽(yáng)性神經(jīng)元,，發(fā)現(xiàn)在小鼠活動(dòng)中可以解碼出在USV+和USV-攀爬過(guò)程中神經(jīng)元活動(dòng)的獨(dú)特模式。交叉光遺傳刺激表達(dá)ESR1和囊狀GABA轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（VGAT）的MPOA神經(jīng)元,，可促進(jìn)USV+攀爬,，并將雄性的定向攻擊轉(zhuǎn)換為USV攀爬。

使用MPM對(duì)神經(jīng)元進(jìn)行鈣成像時(shí),，通過(guò)隨機(jī)訪問(wèn)掃描—即激光束在整個(gè)視場(chǎng)上的任意選定點(diǎn)上進(jìn)行快速掃描—可以只掃描感興趣的神經(jīng)元,，這樣不僅避免掃描到任何未標(biāo)記的神經(jīng)纖維，還可以優(yōu)化激光束的掃描時(shí)間,。隨機(jī)訪問(wèn)掃描可以通過(guò)聲光偏轉(zhuǎn)器（AOD）來(lái)實(shí)現(xiàn),，其原理是將具有一個(gè)射頻信號(hào)的壓電傳感器粘在合適的晶體上，所產(chǎn)生的聲波引起周期性的折射率光柵,，激光束通過(guò)光柵時(shí)發(fā)生衍射,。通過(guò)射頻電信號(hào)調(diào)控聲波的強(qiáng)度和頻率從而可以改變衍射光的強(qiáng)度和方向，這樣使用1個(gè)AOD就可以實(shí)現(xiàn)一維橫向的任意點(diǎn)掃描,，利用1對(duì)AOD,，結(jié)合其他軸向掃描技術(shù)可實(shí)現(xiàn)3D的隨機(jī)訪問(wèn)掃描。但是該技術(shù)對(duì)樣本的運(yùn)動(dòng)很敏感,，易出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)偽影,。目前，快速光柵掃描即在FOV中進(jìn)行逐行掃描,，由于利用算法可以輕松解決運(yùn)動(dòng)偽影而被guangfan的使用,。傳統(tǒng)鈣成像實(shí)驗(yàn)要求成像的光路極為穩(wěn)定。

大家都知道,，只有游離鈣才具有生物學(xué)活性,，而細(xì)胞質(zhì)內(nèi)鈣離子濃度由鈣離子的內(nèi)外流平衡所決定，同時(shí)也受鈣結(jié)合蛋白的影響,。細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流的方式有很多種,，其中包括電壓門控鈣離子通道、離子型谷氨酰胺受體、煙堿型膽堿能受體（nAChR）和瞬時(shí)受體電位C型通道（TRPC）等,。神經(jīng)元鈣成像的原理就是利用特殊的熒光染料或鈣離子指示劑將神經(jīng)元中鈣離子濃度的變化通過(guò)熒光強(qiáng)度表現(xiàn)出來(lái),，以反映神經(jīng)元活性。該方法可以同時(shí)觀察多個(gè)功能或位置相關(guān)的腦細(xì)胞,。鈣離子也是神經(jīng)元活動(dòng)的重要“風(fēng)向標(biāo)”之一,。美國(guó)熒光鈣成像口碑好

鈣成像技術(shù)被廣泛應(yīng)用于同時(shí)監(jiān)測(cè)成百上千個(gè)神經(jīng)元內(nèi)鈣離子的變化。南京熒光鈣成像供應(yīng)商

解決鈣成像裝置對(duì)核磁成像的干擾：考慮到金屬對(duì)核磁成像的影響,，研究人員在核磁共振成像的模塊上裝上了鈣成像模塊,，該成像模塊所有的金屬元件全部被更換為非導(dǎo)電塑料?？紤]到磁場(chǎng)對(duì)光纖記錄系統(tǒng)的干擾,，減少鈣信號(hào)的噪音，將相干光纖激光器與核磁共振放置相鄰不同的房間,。解決鈣成像和核磁成像區(qū)域的一致性：在成像過(guò)程中,，以皮層區(qū)域的血管分布為參照物，以保證鈣成像和核磁成像的區(qū)域基本保持一致,。但在實(shí)際成像中,，鈣離子變化和血氧水平依賴性信號(hào)所響應(yīng)的區(qū)域并不是完全重合。因此研究人員將響應(yīng)區(qū)域內(nèi)的信號(hào)變化幅度進(jìn)行均一化,，盡量避免因統(tǒng)計(jì)閾值引起差異,。南京熒光鈣成像供應(yīng)商