nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)是可以在自由活動(dòng)的動(dòng)物上進(jìn)行大范圍的動(dòng)態(tài)熒光成像的設(shè)備,。通過nVist,，您可以視覺化細(xì)胞活動(dòng)，同步行為學(xué),，以及長期追蹤神經(jīng)環(huán)路的活動(dòng),。nVista被應(yīng)用于全球的研究機(jī)構(gòu)中，產(chǎn)生了影響力的大數(shù)據(jù)庫,。主要特征：利用GCamp鈣離子探針進(jìn)行成像功能完整的數(shù)據(jù)采集軟件,，實(shí)現(xiàn)對焦，調(diào)焦,，行為同步化單細(xì)胞分辨率下,，可同時(shí)捕獲成百上千神經(jīng)元活動(dòng)長時(shí)間追蹤細(xì)胞，追蹤時(shí)間可長達(dá)數(shù)月電子對焦,，保證視野范圍的恒定自由動(dòng)物行為學(xué)：可運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)行為學(xué)測量方法,，行為操作箱，迷宮,，曠場等可進(jìn)行皮層,，深部核團(tuán)，以及腦干,，中腦等區(qū)域的成像記錄動(dòng)物無需進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練鈣離子成像+自由活動(dòng)行為學(xué)1.錨定特殊細(xì)胞類型,，例如特定的receptor/promotor/geneticmarker2.單細(xì)胞的空間分辨率,，可以分析細(xì)胞在空間內(nèi)的mapping和編碼信息3.動(dòng)物可在大范圍的曠場內(nèi)自由活動(dòng)4.長時(shí)程追蹤同一細(xì)胞的放電規(guī)律變化：用于學(xué)習(xí)，記憶,，藥物成癮等研究,。5.可對腦內(nèi)的深部核團(tuán)進(jìn)行記錄nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)成像效果好。神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)技術(shù)參數(shù)專業(yè)的數(shù)據(jù)采集軟件Inscopix數(shù)據(jù)采集軟件可記錄成百上千個(gè)神經(jīng)元細(xì)胞,。電子調(diào)焦功能,，可通過軟件實(shí)現(xiàn)物理調(diào)焦。利用特殊的熒光染料或鈣離子指示劑,，將神經(jīng)元中鈣離子濃度的變化通過熒光強(qiáng)度表現(xiàn)出來,。浙江熒光鈣成像nVoke

鈣離子通過參與多種細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑來調(diào)控絕大多數(shù)類型神經(jīng)元的功能。由于鈣離子信號在已知的細(xì)胞器結(jié)構(gòu)中發(fā)揮其特定的功能,，鈣離子成像顯得尤為重要,。在神經(jīng)系統(tǒng)中，由于神經(jīng)元的多樣性,，導(dǎo)致鈣離子功能也多樣化,。在突觸前膜，鈣內(nèi)流激發(fā)貯存神經(jīng)遞質(zhì)的神經(jīng)小泡向胞外釋放,；在突觸后膜,，樹突棘內(nèi)鈣水平瞬間升高，介導(dǎo)了突觸可塑性,；在細(xì)胞核內(nèi),，鈣信號能夠調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄。現(xiàn)在常使用的鈣離子指示劑有化學(xué)性鈣離子指示劑（ChemicalIndicators）和基因編碼鈣離子指示劑（GeneticallyEncodedIndicators）兩類,。西安inscopix鈣成像大概費(fèi)用鈣離子能產(chǎn)生許多控制細(xì)胞功能的胞內(nèi)信號,，如突觸囊泡中神經(jīng)遞質(zhì)的釋放等。

可見光激發(fā)Ca2+熒光探針：與紫外光激發(fā)探針相比,，可見光激發(fā)Ca2+探針具有更強(qiáng)的染料吸收性能，對Ca2+變化水平檢測敏感度也更高,，能夠降低對活細(xì)胞的光毒性和樣品自發(fā)熒光以及光散射的干擾,，且無光譜偏移。較常使用的可見光激發(fā)Ca2+熒光探針有Fluo-3,，F(xiàn)luo-4,，Rhod-2等，同時(shí)他們也都是非比率型指示劑,。Fluo-3是較常用的可見光激發(fā)Ca2+熒光指示劑之一,，是典型的的單波長指示劑，比較大激發(fā)波長為506nm,，比較大發(fā)射波長為526nm,。它與Ca2+結(jié)合之前幾乎無熒光,，結(jié)合后熒光會(huì)增加60至100倍，從而避免了細(xì)胞自身的熒光干擾,。實(shí)際檢測時(shí)推薦使用的激發(fā)波長為488nm左右,，發(fā)射波長為525～530nm（圖3）。Fluo-3可以用在激光共聚焦顯微成像或流式細(xì)胞儀中,。它還有一個(gè)升級版本Fluo-4,，在相同Ca2+濃度下信號更強(qiáng)。

紫外光激發(fā)Ca2+熒光探針Fura-2和Indo-1都是紫外光激發(fā)的雙波長Ca2+熒光指示劑,，也是目前較常用的比率型鈣離子熒光探針,。與其他代的熒光指示劑相比，它們的熒光信號更強(qiáng),，對Ca2+的選擇性也更強(qiáng),。比率指示劑會(huì)在與Ca2+結(jié)合后會(huì)改變吸收/發(fā)射特性。以雙波長激發(fā)指示劑Fura-2為例,。如圖2所示,，低Ca2+濃度下，F(xiàn)ura-2在~380nm處激發(fā),，高Ca2+濃度下,，在~340nm處激發(fā)。光譜由兩個(gè)峰組成：左側(cè)較短波長的吸收峰隨Ca2+濃度的增加而增大,，右側(cè)較長波長的吸收峰隨Ca2+濃度的增加而減小,。通過340/380nm交替激發(fā)，獲取在510nm處對應(yīng)的發(fā)射光熒光強(qiáng)度的比率,，就可以對Ca2+濃度進(jìn)行定量的測量,。因?yàn)镕ura-2結(jié)果準(zhǔn)確，且不易被漂白,，所以得到了普遍使用,。鈣成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)鈣離子產(chǎn)生各種各樣的胞內(nèi)信號。

與傳統(tǒng)的單光子寬視野熒光顯微鏡相比,，多光子顯微鏡（MPM）具有光學(xué)切片和深層成像等功能,，這兩個(gè)優(yōu)勢極大地促進(jìn)了研究者們對于完整在體大腦深處神經(jīng)的了解與認(rèn)識(shí)。2019年,，JeromeLecoq等人從大腦深處的神經(jīng)元成像,、大量神經(jīng)元成像、高速神經(jīng)元成像這三個(gè)方面論述了相關(guān)的MPM技術(shù),。想要將神經(jīng)元活動(dòng)與復(fù)雜行為聯(lián)系起來,，通常需要對大腦皮質(zhì)深層的神經(jīng)元進(jìn)行成像，這就要求MPM具有深層成像的能力,。激發(fā)和發(fā)射光會(huì)被生物組織高度散射和吸收是限制MPM成像深度的主要因素,，雖然可以通過增加激光強(qiáng)度來解決散射問題,，但這會(huì)帶來其他問題，例如燒壞樣品,、離焦和近表面熒光激發(fā),。增加MPM成像深度比較好的方法是用更長的波長作為激發(fā)光。進(jìn)行鈣測定必須借助外界的某種可視化物質(zhì)作為它的標(biāo)志物,。上海inscopix鈣成像生產(chǎn)廠家

長時(shí)間追蹤相同細(xì)胞,，進(jìn)行可重復(fù)的科學(xué)研究對自由行為動(dòng)物進(jìn)行慢性鈣成像研究。浙江熒光鈣成像nVoke

紫外光激發(fā)Ca2+熒光探針：Fura-2和Indo-1都是紫外光激發(fā)的雙波長Ca2+熒光指示劑,，也是目前較常用的比率型鈣離子熒光探針,。與其他代的熒光指示劑相比，它們的熒光信號更強(qiáng),，對Ca2+的選擇性也更強(qiáng),。比率指示劑會(huì)在與Ca2+結(jié)合后會(huì)改變吸收/發(fā)射特性。以雙波長激發(fā)指示劑Fura-2為例,。如圖2所示,，低Ca2+濃度下，F(xiàn)ura-2在~380nm處激發(fā),，高Ca2+濃度下,，在~340nm處激發(fā)。光譜由兩個(gè)峰組成：左側(cè)較短波長的吸收峰隨Ca2+濃度的增加而增大,，右側(cè)較長波長的吸收峰隨Ca2+濃度的增加而減小,。通過340/380nm交替激發(fā)，獲取在510nm處對應(yīng)的發(fā)射光熒光強(qiáng)度的比率,，就可以對Ca2+濃度進(jìn)行定量的測量,。因?yàn)镕ura-2結(jié)果準(zhǔn)確，且不易被漂白,，所以得到了普遍使用,。浙江熒光鈣成像nVoke