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來源: 發(fā)布時間:2024-10-19

與藥物作用有關(guān)的心肌離子通道,,心肌細胞通過各種離子通道對膜電位和動作電位穩(wěn)態(tài)的維持而保持正常的功能,。近年來,國外學(xué)者在人類心肌細胞離子通道特性的研究中取得了許多進展,,使得心肌藥理學(xué)實驗由動物細胞模型向人心肌細胞成為可能,。對離子通道生理與病理情況下作用機制的研究,通過對各種生理或病理情況下細胞膜某種離子通道特性的研究,,了解該離子的生理意義及其在疾病過程中的作用機制。如對鈣離子在腦缺血神經(jīng)細胞損害中作用機制的研究表明,,缺血性腦損害過程中,,Ca2+介導(dǎo)現(xiàn)象起非常重要的作用,缺血缺氧使Ca2+通道開放,過多的Ca2+進入細胞內(nèi)就出現(xiàn)Ca2+超載,,導(dǎo)致神經(jīng)元及細胞膜損害,,膜轉(zhuǎn)運功能障礙,嚴重的可使神經(jīng)元壞死,。以膜片鉗為鑰匙,,打開細胞離子通道研究的大門!進口全自動膜片鉗單細胞

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細胞是動物和人體的基本單元,,細胞與細胞內(nèi)的通信是依靠其膜上的離子通道進行的,,離子和離子通道是細胞興奮的基礎(chǔ),亦即產(chǎn)生生物電信號的基礎(chǔ),,生物電信號通常用電學(xué)或電子學(xué)方法進行測量,。由此形成了一門細胞學(xué)科--電生理學(xué)。膜片鉗技術(shù)已成為研究離子通道的黃金標準,。電壓門控性離子通道:膜上通道蛋白的帶點集團在膜電位改變時,,在電場的作用下,重新分布導(dǎo)致通道的關(guān)閉,,同時有電荷移動,,稱為門控電流。配體門控離子通道:神經(jīng)遞質(zhì)(如乙酰膽堿),、ji素等與通道蛋白上的特定位點結(jié)合,,引起蛋白構(gòu)像的改變,導(dǎo)致通道的打開,。單電極膜片鉗研究膜片鉗,,帶您進入細胞膜電生理的奇妙世界!

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電壓鉗的缺點∶電壓鉗技術(shù)目前主要用于巨火細胞的全細胞電流研究,,特別在分子克隆的卵母細胞表達電流的鑒定中發(fā)揮其它技術(shù)不能替代的作用,。但也有其致命的弱點1、微電極需刺破細胞膜進入細胞,,以致造成細胞漿流失,,破壞了細胞生理功能的完整性;2、不能測定單一通道電流,。因為電壓鉗制的膜面積很大,,包含著大量隨機開放和關(guān)閉著的通道,而且背景噪音大,,往往掩蓋了單一通道的電流,。3、對體積小的細胞(如哺乳類***元,,直徑在10-30μm之間)進行電壓鉗實驗,,技術(shù)上有更大的困難,。由于電極需插入細胞,不得不將微電極的前列做得很細,,如此細的前列致使電極阻抗很大,,常常是60~-8OMΩ或120~150MΩ(取決于不同的充灌液)。這樣大的電極阻抗不利于作細胞內(nèi)電流鉗或電壓鉗記錄時在短時間(0.1μs)內(nèi)向細胞內(nèi)注入電流,,達到鉗制膜電壓或膜電流之目的,。再者,在小細胞上插入的兩根電極可產(chǎn)生電容而降低測量電壓電極的反應(yīng)能力,。

膜片鉗放大器是整個實驗系統(tǒng)中的主要,,它可用來作單通道或全細胞記錄,其工作模式可以是電壓鉗,,也可以是電流鉗,。從原理來說,膜片鉗放大器的探頭電路即I-V變換器有兩種基本結(jié)構(gòu)形式,,即電阻反饋式和電容反饋式,,前者是一種典型的結(jié)構(gòu),后者因用反饋電容取代了反饋電阻,,降低了噪聲,,所以特別適合較低噪聲的單通道記錄。由于供膜片鉗實驗的專門的計算機硬件及相應(yīng)的軟件程序的相繼出現(xiàn),,使得膜片鉗實驗操作簡便,、效率提高、效率提高膜片鉗是一種用于夾持薄膜或其他薄片材料的工具,。

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膜片鉗技術(shù)的創(chuàng)立取代了電壓鉗技術(shù),,是細胞電生理研究的一個飛躍,使得離子通道的研究,,從宏觀深入到微觀,,使昔日的“肉湯生理學(xué)(brothphysiology)”與“閃電生理學(xué)(lightningphysiology)”在分子水平上結(jié)合起來,使人們對膜通道的認識耳目一新,。當前,,生理學(xué)、生物物理學(xué),、生物化學(xué),、分子生物學(xué)和藥理學(xué)等多種學(xué)科正在把膜片鉗技術(shù)和膜通道蛋白重組技術(shù)、同位素示蹤技術(shù)和光譜技術(shù)等非電生理技術(shù)結(jié)合起來,,協(xié)同對離子通道進行較全的研究,。不少實驗室已經(jīng)將基因工程與膜片鉗技術(shù)結(jié)合起來,把通道蛋白有目的地重組于人工膜中進行研究,。設(shè)想將合成的通道蛋白分子接種入機體以替換有缺陷和異常的通道的功能而達到的目的,。膜片鉗技術(shù)已成為研究離子通道的"金標準",。單電極膜片鉗研究

用膜片鉗,輕松掌握細胞膜離子通道的電生理特性,!進口全自動膜片鉗單細胞

膜片鉗技術(shù)∶從一小片(約幾平方微米)膜獲取電子學(xué)方面信息的技術(shù),即保持跨膜電壓恒定——電壓鉗位,,從而測量通過膜離子電流大小的技術(shù),。通過研究離子通道的離子流,從而了解離子運輸,、信號傳遞等信息,。基本原理:利用負反饋電子線路,,將微電極前列所吸附的一個至幾個平方微米的細胞膜的電位固定在一定水平上,,對通過通道的微小離子電流作動態(tài)或靜態(tài)觀察,從而研究其功能,。研究離子通道的一種電生理技術(shù),,是施加負壓將玻璃微電極的前列(開口直徑約1μm)與細胞膜緊密接觸,形成高阻抗封接,,可以精確記錄離子通道微小電流,。能制備成細胞貼附、內(nèi)面朝外和外面朝內(nèi)三種單通道記錄方式,,以及另一種記錄多通道的全細胞方式,。膜片鉗技術(shù)實現(xiàn)了小片膜的孤立和高阻封接的形成,由于高阻封接使背景噪聲水平**降低,,相對地增寬了記錄頻帶范圍,,提高了分辨率。另外,,它還具有良好的機械穩(wěn)定性和化學(xué)絕緣性,。而小片膜的孤立使對單個離子通道進行研究成為可能。滔博生物TOP-Bright專注基于多種離子通道靶點的化合物體外篩選,服務(wù)于全球藥企的膜片鉗公司,快速獲得實驗結(jié)果,專業(yè)團隊,7*35小時隨時人工在線咨詢.進口全自動膜片鉗單細胞