單光子激發(fā)熒光的過程,，就是熒光分子吸收一個光子,，從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，躍遷以后,，能量較大的激發(fā)態(tài)分子,，通過內(nèi)轉(zhuǎn)換把部分能量轉(zhuǎn)移給周圍的分子，自己回到比較低電子激發(fā)態(tài)的比較低振動能級,。處于比較低電子激發(fā)態(tài)的比較低振動能級的分子的平均壽命大約在 10s 左右,。這時它不是通過內(nèi)轉(zhuǎn)換的方式來消耗能量，回到基態(tài),，而是通過發(fā)射出相應(yīng)的光量子來釋放能量,，回到基態(tài)的各個不同的振動能級時，就發(fā)射熒光,。因為在發(fā)射熒光以前已經(jīng)有一部分能量被消耗,，所以發(fā)射的熒光的能量要比吸收的能量小，也就是熒光的特征波長要比吸收的特征波長來的長,。世界多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)業(yè)主要布局在德國和日本,，德國是徠卡顯微系統(tǒng)和蔡司。bruker多光子顯微鏡成像精度

    多光子顯微鏡因擁有較深的成像深度,，和較高的對比度在生物成像中有著重要的意義，但是它通常需要較高的功率,。結(jié)合時間上展開的超短脈沖可以實現(xiàn)超快的掃描速度和較深的成像深度,，但是其本身所利用的近紅外波段的光會導(dǎo)致分辨率較低。清華大學(xué)陳宏偉教授和北京大學(xué)席鵬研究員合作研究,，結(jié)合了結(jié)構(gòu)光成像和上轉(zhuǎn)化粒子,，開發(fā)了一種基于多光子上轉(zhuǎn)化材料和時間編碼結(jié)構(gòu)光顯微鏡的高速超分辨成像系統(tǒng)(MUTE-SIM)。它可以實現(xiàn)50MHz的超高的掃描速度,，并突破了衍射極限,，實現(xiàn)了超分辨成像。相較于普通的熒光顯微鏡,，該顯微鏡提升了,，并且只需要較低的激發(fā)功率。這種超快,、低功率,、多光子的超分辨技術(shù)，在分辨率高的生物深層組織成像上有著長遠(yuǎn)的應(yīng)用前景,。 美國高速高分辨率多光子顯微鏡原理全球多光子顯微鏡主要廠商基本情況介紹,，包括公司簡介,、多光子顯微鏡產(chǎn)品型號、產(chǎn)量,、產(chǎn)值及動態(tài)等,。

對兩個遠(yuǎn)距離（相距大于1-2 mm）的成像部位，通常使用兩條單獨的路徑進(jìn)行成像,；對于相鄰區(qū)域,，通常使用單個物鏡的多光束進(jìn)行成像。多光束掃描技術(shù)必須特別注意激發(fā)光束之間的串?dāng)_問題,，這個問題可以通過事后光源分離方法或時空復(fù)用方法來解決,。事后光源分離方法指的是用算法來分離光束消除串?dāng)_；時空復(fù)用方法指的是同時使用多個激發(fā)光束,，每個光束的脈沖在時間上延遲,，這樣就可以暫時分離被不同光束激發(fā)的單個熒光信號。引入越多路光束就可以對越多的神經(jīng)元進(jìn)行成像,，但是多路光束會導(dǎo)致熒光衰減時間的重疊增加,，從而限制了區(qū)分信號源的能力；并且多路復(fù)用對電子設(shè)備的工作速率有很高的要求,；大量的光束也需要更高的激光功率來維持近似單光束的信噪比,，這會容易導(dǎo)致組織損傷。

當(dāng)激光光束焦點的位置在鏡面上,，此時被反射的激光在無限空間中成為準(zhǔn)直光束,，并在OBJ2的焦平面上形成了一個激光光斑。同理,，如果橫向掃描光束,，則會形成遠(yuǎn)離傾斜鏡鏡面的焦點，這又導(dǎo)致返回的光束會聚或發(fā)散,，進(jìn)而OBJ2能在軸向不同位置形成焦點,，通過這種方式即能實現(xiàn)連續(xù)的軸向掃描。對于較小的傾斜角,，聚焦沒有球差,。該組在實驗中表征了這種將橫向掃描轉(zhuǎn)換為軸向掃描技術(shù)的光學(xué)性能，并使用它將光片顯微鏡的成像速度提升了一個數(shù)量級,，從而可以在三個維度上量化快速的囊泡動力學(xué),。該組還演示了使用雙光子光柵掃描顯微鏡以12 kHz進(jìn)行共振遠(yuǎn)程聚焦，該技術(shù)可對大腦組織和斑馬魚心臟動力學(xué)進(jìn)行快速成像,，并具有衍射極限的分辨率,。 雙光子熒光顯微鏡是結(jié)合了激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發(fā)技術(shù)的一種新技術(shù)。

    從應(yīng)用的行業(yè)來看，多光子激光掃描顯微鏡主要集中于機構(gòu),、學(xué)校及醫(yī)院對生物科學(xué)的研究,。與此同時，光學(xué)玻璃,、液晶材料,、濾光片、電子元器件等光學(xué)材料則組成了上行業(yè),。處于中游的多光子激光掃描顯微鏡行業(yè)正是受到上下**業(yè)的共同影響,，才會呈現(xiàn)出目前的市場態(tài)勢。2020年,，全球多光子激光掃描顯微鏡市場規(guī)模達(dá)到了,，預(yù)計2027年將達(dá)到，年復(fù)合增長率（CAGR）為（2021-2027）,。中國市場規(guī)模增長快速,，2020年，中國多光子激光掃描顯微鏡市場收入達(dá)到了,，預(yù)計2027年將達(dá)到,，年復(fù)合增長率（CAGR）為（2021-2027）。本報告研究“十三五”期間全球及中國市場多光子激光掃描顯微鏡的供給和需求情況,，以及“十四五”期間行業(yè)發(fā)展預(yù)測,。重點分析全球多光子激光掃描顯微鏡的產(chǎn)能、產(chǎn)量,、銷量,、收入和增長潛力，歷史數(shù)據(jù)2016-2020年,，預(yù)測數(shù)據(jù)2021-2027年,。本文同時著重分析多光子激光掃描顯微鏡行業(yè)競爭格局，包括全球市場主要廠商競爭格局和中國本土市場主要廠商競爭格局,，重點分析全球主要廠商多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)值、價格和市場份額,，全球多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)地分布情況等,。 使用雙光子顯微鏡觀察標(biāo)本的時候，只有在焦平面上才有光漂白和光毒性,。離體多光子顯微鏡價格多少

多光子顯微鏡被認(rèn)為是,、完整生物組織成像的手段之一，其成像尺度從分子級別到整個有機體,。bruker多光子顯微鏡成像精度

多光子激發(fā)掃描顯微成像系統(tǒng)的不足,。只能對熒光成像。如果樣品包括能夠吸收激發(fā)光的色團(tuán)，如色素,，樣品可能受到熱損傷,。分辨率略有降低，雖然可以通過同時利用共焦的小孔得到改善,，但是信號會有損耗,。受昂貴的超快激光器限制，多光子掃描顯微鏡的成本較高,。多光子激發(fā)顯微鏡應(yīng)用舉例,。動物和腦片神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能、動物腦皮層的成像,、胚胎發(fā)育過程的長時間動態(tài)觀測,、多光子激發(fā)光解籠、細(xì)胞內(nèi)微區(qū)鈣動力學(xué),、多光子激發(fā)自發(fā)熒光,、其它應(yīng)用。bruker多光子顯微鏡成像精度