可見光激發(fā)Ca2+熒光探針：與紫外光激發(fā)探針相比，可見光激發(fā)Ca2+探針具有更強的染料吸收性能,，對Ca2+變化水平檢測敏感度也更高,，能夠降低對活細胞的光毒性和樣品自發(fā)熒光以及光散射的干擾，且無光譜偏移,。較常使用的可見光激發(fā)Ca2+熒光探針有Fluo-3,，F(xiàn)luo-4，Rhod-2等,，同時他們也都是非比率型指示劑,。Fluo-3是較常用的可見光激發(fā)Ca2+熒光指示劑之一，是典型的的單波長指示劑,，比較大激發(fā)波長為506nm,，比較大發(fā)射波長為526nm。它與Ca2+結合之前幾乎無熒光,，結合后熒光會增加60至100倍,，從而避免了細胞自身的熒光干擾。實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為488nm左右,，發(fā)射波長為525～530nm（圖3）,。Fluo-3可以用在激光共聚焦顯微成像或流式細胞儀中,。它還有一個升級版本Fluo-4，在相同Ca2+濃度下信號更強,。多種鈣離子指示劑和鈣成像手段的存在使研究人員能夠根據(jù)具體的實驗需要進行選擇,。深圳在體鈣成像哪里有

鈣成像技術（calciumimaging）是指利用鈣離子指示劑監(jiān)測組織內鈣離子濃度的方法。在神經系統(tǒng)研究方面,，在在體（invivo）或者離體（invitro）實驗中,，鈣成像技術被廣泛應用于同時監(jiān)測成百上千個神經元內鈣離子的變化，從而檢測神經元的活動情況）,。有了鈣成像技術,，原本悄無聲息的神經活動就變成了一幅斑斕閃爍的壯觀影像，科學家終于可以親眼看著神經信號在神經網(wǎng)絡之中往來穿梭,。因此,，這種技術一出現(xiàn)，就受到了全世界神經科學家們的追捧,，至今依然是人們觀測神經活動直接的手段,。光遺傳鈣成像生產廠家鈣成像系統(tǒng)具有單細胞分辨率的大視野的特征。

科學家利用鈣成像技術記錄大腦活動,。隨著功能光學成像技術的發(fā)展,，神經學家們已經可以研究腦區(qū)和神經元內部的工作情況。功能鈣成像技術就是其中之一,，其主要原理是將外源性熒光信號和生理現(xiàn)象耦合起來——通過熒光染料信號的改變反映細胞內游離鈣離子濃度,，以此daibiao細胞的功能狀態(tài)。目前它被廣泛應用于實時監(jiān)測一群相關神經元內鈣離子的變化,，從而判斷其功能活動,。該技術的出現(xiàn)使得科學家可以親眼目睹神經信號在神經網(wǎng)絡之中時間和空間上的傳遞穿梭,。

鈣成像的熒光指示劑鈣成像的熒光探針一般均為Ca2螯合劑EGTA,，APTRA，BAPTA的衍生物,，它們可以結合鈣離子從而顯示一個光譜響應,，使研究者可以用熒光顯微鏡來觀察細胞內的自由鈣的濃度。熒光顯微鏡可以使用普通的倒置熒光顯微鏡來進行鈣信號的測定和成像,。并可結合電生理設備,、活細胞培養(yǎng)裝置等，適用于大強度,、廣范圍的鈣信號測定,。共聚焦顯微系統(tǒng)，共聚焦以激光為光源,，且可配備氬離子光源,，可以選擇可見光激發(fā)的鈣指示劑，進行層掃，相比普通熒光顯微鏡有更好的空間分辨率,。并且共聚焦除了配備大視野掃描鏡更可配置共振掃描振鏡,，以滿足更高速成像應用的需求。雙光子顯微系統(tǒng)使用長波長來激發(fā)熒光指示劑,，具有較低的細胞毒性,，也可適用于紫外激發(fā)的鈣指示劑，且可獲得和單光子共聚焦系統(tǒng)類似的空間分辨率,。小結綜上可見,，在研究鈣信號時，可結合樣品自身特點來選擇相應的鈣指示劑,，并考慮既有的實驗設備,，來確定具體的實驗方案。同時還需進一步摸索實驗數(shù)據(jù)的校正,、控制等多種影響因素,，可獲得可靠的圖像及熒光定量數(shù)據(jù)。鈣成像技術能直接測量神經元和神經元組織中動態(tài)的鈣流動,。

指示劑是如何負載細胞,，目前有三種在神經元上填充鈣離子指示劑的方法，且都可以用于體內和體外研究,。第一種方法是利用玻璃吸管將膜滲透性鹽或葡聚糖形式的指示劑注入單個神經元中,。此方法方便實驗者控制單個神經元內的鈣離子指示劑濃度且信噪比較高。第二種是利用“批量加載”的方法將鈣離子指示劑染料負載神經元,，觀察對象為一群神經元,。盡管此方法可能導致一些膠質細胞也被指示劑所標記，但明顯提高了整體神經元的標記百分比,，使研究者得以觀察到一群神經元內動作電位相關性的活動,。第三種也較為常用，通過病毒轉染的方式使其基因編碼鈣離子指示劑,。細胞對鈣離子有一套完備的監(jiān)控系統(tǒng)以維持鈣的內穩(wěn)態(tài)平衡,。細胞鈣離子鈣成像哪里買

通過鈣成像技術發(fā)現(xiàn)神經元的活動與其內部的鈣離子濃度密切相關。深圳在體鈣成像哪里有

nVista神經元超微鈣成像系統(tǒng)是可以在自由活動的動物上進行大范圍的動態(tài)熒光成像的設備,。通過nVist,，您可以視覺化細胞活動，同步行為學,，以及長期追蹤神經環(huán)路的活動,。nVista被應用于全球的研究機構中，產生了影響力的大數(shù)據(jù)庫,。主要特征：利用GCamp鈣離子探針進行成像功能完整的數(shù)據(jù)采集軟件,，實現(xiàn)對焦,，調焦，行為同步化單細胞分辨率下,，可同時捕獲成百上千神經元活動長時間追蹤細胞,，追蹤時間可長達數(shù)月電子對焦，保證視野范圍的恒定自由動物行為學：可運用標準行為學測量方法,，行為操作箱,，迷宮，曠場等可進行皮層,，深部核團,，以及腦干，中腦等區(qū)域的成像記錄動物無需進行適應性訓練鈣離子成像+自由活動行為學1.錨定特殊細胞類型,，例如特定的receptor/promotor/geneticmarker2.單細胞的空間分辨率,，可以分析細胞在空間內的mapping和編碼信息3.動物可在大范圍的曠場內自由活動4.長時程追蹤同一細胞的放電規(guī)律變化：用于學習，記憶,，藥物成癮等研究,。5.可對腦內的深部核團進行記錄nVista神經元超微鈣成像系統(tǒng)成像效果好。神經元超微鈣成像系統(tǒng)技術參數(shù)專業(yè)的數(shù)據(jù)采集軟件Inscopix數(shù)據(jù)采集軟件可記錄成百上千個神經元細胞,。電子調焦功能,，可通過軟件實現(xiàn)物理調焦。深圳在體鈣成像哪里有