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來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-05-31

隨著技術(shù)的發(fā)展,,雙光子顯微鏡的性能不斷優(yōu)化。結(jié)合其特點(diǎn),,大致可以分為兩個(gè)方面:深入和主動(dòng)改進(jìn),。為了使激發(fā)激光進(jìn)入更深的層次,可以從器件優(yōu)化和標(biāo)本改造兩個(gè)方面入手,。關(guān)于器件的優(yōu)化,,我們可以把激光束做得更細(xì),集中能量,,讓激光穿透得更深,。對于樣品,物質(zhì)的吸收和散射是影響光傳播的主要因素,。為了解決這個(gè)問題,,我們需要將樣本透明化。一種方法是用某種物質(zhì)浸泡標(biāo)本,,使其中的物質(zhì)(主要是脂質(zhì))被破壞或溶解,。另一種方法是通過電泳電解脂類,從而提高標(biāo)本的“透明度”,。雙光子顯微鏡的應(yīng)用中,,該如何選擇以及更好的使用PMT。美國ultimainvestigator雙光子顯微鏡商家

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配合雙光子激發(fā)技術(shù),,激光共聚掃描顯微鏡則能更好得發(fā)揮功效,。那么,什么是雙光子激發(fā)技術(shù)呢,?在高光子密度的情況下,,熒光分子可以同時(shí)吸收2個(gè)長波長的光子使電子躍遷到較高能級,經(jīng)過一個(gè)很短的時(shí)間后,,電子再躍遷回低能級同時(shí)放出一個(gè)波長為長波長一半的光子(P=h/λ)。利用這個(gè)原理,,便誕生了雙光子激發(fā)技術(shù),。雙光子顯微鏡使用長波長脈沖激光,通過物鏡匯聚,,由于雙光子激發(fā)需要很高的光子密度,,而物鏡焦點(diǎn)處的光子密度是比較高的,,所以只有在焦點(diǎn)處才能發(fā)生雙光子激發(fā),產(chǎn)生熒光,,該點(diǎn)產(chǎn)生的熒光再穿過物鏡,,被光探頭接收,從而能夠達(dá)到逐點(diǎn)掃描的效果,。美國ultimainvestigator雙光子顯微鏡商家雙光子顯微鏡供應(yīng)商找因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司,。

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隨著技術(shù)的發(fā)展,雙光子顯微鏡的性能得到不斷地優(yōu)化,,結(jié)合它的特點(diǎn),,大致可以分成深和活兩方面的提升。要想讓激發(fā)激光進(jìn)入更深的層面,,大致可從兩個(gè)方面入手,,裝置優(yōu)化與標(biāo)本改造。關(guān)于裝置優(yōu)化,,我們可以把激光束變得更細(xì),,使能量更加集中,就能讓激光穿透更深,。關(guān)于標(biāo)本,,其中影響光傳播的主要是物質(zhì)吸收和散射,解決這個(gè)問題,,我們需要對樣本進(jìn)行透明化處理,。一種方法是運(yùn)用某種物質(zhì)將標(biāo)本浸泡,使其中的物質(zhì)(主要是脂質(zhì))被破壞或溶解,。另一種方法是運(yùn)用電泳將脂質(zhì)電解,,讓標(biāo)本“透明度”提高。

而配合了雙光子激發(fā)技術(shù),,激光共聚掃描顯微鏡則能更好得發(fā)揮功效,。那么,什么是雙光子激發(fā)技術(shù)呢,?在高光子密度的情況下,,熒光分子可以同時(shí)吸收2個(gè)長波長的光子使電子躍遷到較高能級,經(jīng)過一個(gè)很短的時(shí)間后,,電子再躍遷回低能級同時(shí)放出一個(gè)波長為長波長一半的光子(P=h/λ),。利用這個(gè)原理,便誕生了雙光子激發(fā)技術(shù),。雙光子顯微鏡使用長波長脈沖激光,,通過物鏡匯聚,由于雙光子激發(fā)需要很高的光子密度,,而物鏡焦點(diǎn)處的光子密度是比較高的,,所以只有在焦點(diǎn)處才能發(fā)生雙光子激發(fā),,產(chǎn)生熒光,該點(diǎn)產(chǎn)生的熒光再穿過物鏡,,從而被光探頭接收,,從而達(dá)到逐點(diǎn)掃描的效果。雙光子顯微鏡能夠進(jìn)行指標(biāo)成像,;

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雙光子顯微鏡能夠進(jìn)行光裂解、光轉(zhuǎn)染和光損傷等光學(xué)操縱,。美國ultimainvestigator雙光子顯微鏡商家

在深度組織中以較長時(shí)間對活細(xì)胞成像,,雙光子顯微鏡是當(dāng)前之選。雙光子和共聚焦顯微鏡都是通過激光激發(fā)樣品中的熒光標(biāo)記,,使用探測器測量被激發(fā)的熒光,。但是,共聚焦一般使用單模光纖耦合激光器,,通過單光子激發(fā)熒光,,而雙光子使用飛秒激光器,通過幾乎同時(shí)吸收兩個(gè)長波光子激發(fā)熒光,。雙光子激發(fā)熒光的主要優(yōu)勢:雙光子比共聚焦使用的更長的波長,,所以對組織的損傷更小且穿透更深。共聚焦的成像深度一般為100微米,,雙光子則能達(dá)到250到500微米,,甚至超過1毫米。另外,,同時(shí)吸收兩個(gè)光子意味只有度聚焦點(diǎn)處能被激發(fā),,所以不會(huì)損傷焦平面之外的組織,并且生成更清晰的圖像,。美國ultimainvestigator雙光子顯微鏡商家