多光子激發(fā)在紫外成像的優(yōu)勢在可見光脈沖中能得到紫外衍射的顯微觀察像。即使不使用紫外域光源,、光學元件用可見光源,、光學元件就能得到紫外光激勵的高空間分辨率圖像。多光子在生物成像中的優(yōu)勢在生物顯微鏡觀察方面,,較早考慮的是不損壞生物本身的活性狀態(tài),,維持水分、離子濃度,、氧和養(yǎng)分的流通,。在光觀察場合,無論是熱還是光子能量方面都必須停留在細胞不受損傷的照射量,、光能量內,。多光子顯微鏡則能夠滿足此,,而且還具有很多優(yōu)點。如三維分辨率,、深度侵入,、在散射效率、背景光,、信噪比,、控制等方面,均有以往激光顯微鏡不具備,,或具有無法比擬的超越特性,。雙光子熒光顯微鏡是結合了激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發(fā)技術的一種新技術。Ultima 2P Plus多光子顯微鏡數據處理
現代分子生物學技術的迅速發(fā)展和科技的進步,,特別是隨著后基因組時代的到來,,人們已經能夠根據需要建立各種細胞模型,為在體研究基因表達規(guī)律,、分子間的相互作用,、細胞的增殖、細胞信號轉導,、誘導分化,、細胞凋亡以及新的血管生成等提供了良好的生物學條件。然而,,盡管人們利用現有的分子生物學方法,,已經對基因表達和蛋白質之間的相互作用進行了深入、細致的研究,,但仍然不能實現對蛋白質和基因活動的實時,、動態(tài)監(jiān)測。在細胞的生理過程中,,基因,、尤其是蛋白質的表達、修飾和相萬作用往往發(fā)生可逆的,、動態(tài)的變化,。目前的分子生物學方法還不能捕獲到蛋白質和基因的這些變化,但獲取這些信息對與研究基因的表達和蛋白質之間的相互作用又至關重要,。因此,,發(fā)展能用于、動態(tài),、實時,、連續(xù)監(jiān)測蛋白質和基因活動的方法非常必要。進口多光子顯微鏡焦點激發(fā)4tune光譜檢測器,,實現多光子顯微鏡的光譜型檢測,。
在生物成像中,,我司多光子顯微鏡具有清(清晰),快(快速),,深(深層),,活這四個方面。結合了多光子上轉化材料以及時間編碼的結構光超分辨技術,,實現了快速(50MHz的掃描速度),,超分辨(超衍射極限)成像。作為一種新的高速,,超高分辨率的成像系統(tǒng),MUTE-SIM可以幫助我們對快速運動的生物圖像進行分辨率高的成像,。盡管關于深度成像的應用我們沒有進一步展示,,但是結合1560nm近紅外光相對于可見光更佳的穿透性,我們相信該技術將有利于對生物組織進行高速,,超分辨,,高深度地成像,有助于生物影像學的發(fā)展,。滔博生物TOP-Bright是一家集研發(fā),,生產,銷售于一體的專注于神經科學產品及致力于向高校,、科研機構等領域提供實驗室一體化方案的高科技企業(yè),。業(yè)務服務范圍已遍布至全國各地幾百家實驗室。目前公司主營產品是享譽全球的國際品牌和產品,這些儀器設備都是科學研究所必備且不可替代的基礎儀器,。
雙光子顯微鏡工作原理是將超快的紅外激光脈沖傳輸到樣品中,,在樣品中與組織或熒光標記相互作用,這些組織或熒光標記發(fā)出用于創(chuàng)建圖像的信號,。雙光子顯微鏡被多用于生物學研究,,因為它能夠產生高分辨率的3-D圖像,深度達1毫米,。然而,,這些優(yōu)點帶來了有限的成像速度,因為微光條件需要逐點圖像采集和重建的點檢測器,。為了加快成像速度,,科學家之前開發(fā)了一種多焦點激光照明方法,該方法使用數字微鏡設備(DMD),,這是一種通常用于投影儀的低成本光掃描儀,。此前人們認為這些DMD不能與超快激光一起工作。然而現在解決了這個問題,,這使得DMD在超快激光應用中得以應用,,這些應用包括光束整形,、脈沖整形、快速掃描和雙光子成像,。DMD在樣品內隨機選擇的位置上產生5到30點聚焦激光,。 多光子顯微鏡的成熟的深部組織成像技術中。還有其他類型的圖像對比提供有關樣本的有價值信息,。
光學成像技術與分子生物學技術的結合為研究上述科學問題提供了條件與可能,。因此,在現代分子生物學技術基礎上,,急需發(fā)展新的成像技術,。在動物體內,如何實現基因表達及蛋白質之間相五作用的實時在體成像監(jiān)測是當前迫切需要解決的重大科學技術問題,。這是也生物學,、信息科學(光學)和基礎臨床醫(yī)學等學科共同感興趣的重大問題。對這-一一科學問題的研究不僅有助于闡明生命活動的基本規(guī)律,、認識疾病的發(fā)展規(guī)律,,而且對創(chuàng)新藥物研究、藥物療效評價以及發(fā)展疾病早期診斷技術等產生重大影響,。中國市場多光子顯微鏡進出口貿易趨勢,。美國在體多光子顯微鏡
多光子顯微鏡技術是對完整組織進行深層熒光成像的優(yōu)先技術。Ultima 2P Plus多光子顯微鏡數據處理
根據阿貝成像原理,,許多光學成像系統(tǒng)是一個低通濾波器,,物平面包含從低頻到高頻的信息,透鏡口徑會限制高頻信息通過,,只允許一定的低頻通過,,因此丟失了高頻信息會使成像所得圖像的細節(jié)變模糊,降低分辨率,。對于三維成像來說,,寬場照明時得到的信息不僅包含物鏡焦平面上樣品的部分信息,同時還包含焦平面外的樣品信息,。由于受到焦平面外的信息干擾,,常規(guī)熒光顯微鏡無法獲得層析圖像。三維結構光照明顯微鏡能夠提高分辨率,、獲得層析圖像,,是因為利用特定結構的照明光能引入樣品的高頻信息,當結構光的空間頻率足夠高時,,只有靠近焦面的部分才能被結構光調制,,超出這一區(qū)域,逐漸轉變?yōu)榫鶆蛘彰鳎簿褪侵挥薪姑娓浇挠邢迏^(qū)域具有相對完整的頻譜信息,,離焦后,,高頻信息迅速衰減,所以使用高頻結構光照明可以區(qū)分焦面和離焦區(qū)域來獲得層析圖像,。然后再通過軸向掃描可以獲取樣品不同深度的焦面圖像,,重建樣品的三維結構。Ultima 2P Plus多光子顯微鏡數據處理