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高速高分辨率多光子顯微鏡研究

來源: 發(fā)布時間:2021-09-19

我們要指出的是,單光子激發(fā)熒光和雙光子激發(fā)熒光,,是從熒光產(chǎn)生的機(jī)理上來區(qū)分的,。而共焦則是熒光顯微鏡的一種結(jié)構(gòu),其目的是為了,,通過共焦結(jié)構(gòu),,提高整個熒光顯微鏡的空間分辨率。所以共焦熒光顯微鏡可以根據(jù)激發(fā)光源的不同,,實(shí)現(xiàn)單光子共焦熒光成像或者雙光子共焦熒光成像,。往往一個普通的雙光子熒光顯微鏡(沒有共焦結(jié)構(gòu))其空間分辨率也可以達(dá)到單光子共焦熒光顯微鏡的水平。這樣就可以簡化整個系統(tǒng),,相對來說,,就提高了激發(fā)光源的利用率,以及熒光的探測效率,,這個也是我們提倡雙光子熒光成像的原因之一,。雙光子熒光共焦顯微鏡由于雙光子效應(yīng)和共焦結(jié)構(gòu),分辨率則會更高,,而我們通常說的共焦顯微鏡都是指單光子激發(fā)熒光的,。使用雙光子顯微鏡觀察標(biāo)本的時候,只有在焦平面上才有光漂白和光毒性,。高速高分辨率多光子顯微鏡研究

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國內(nèi)顯微鏡制造市場目前斷層嚴(yán)重,。目前我國顯微鏡行業(yè)發(fā)展缺乏技術(shù)沉淀,20年以上經(jīng)營積累的企業(yè)十分稀缺,,深度精密制造,、光學(xué)主要部件設(shè)計(jì)及工藝嚴(yán)重制約產(chǎn)業(yè)升級。目前中國顯微鏡中如多光子顯微鏡,、共聚焦掃描和電子顯微鏡等主要集中在徠卡顯微系統(tǒng),、蔡司、尼康,、奧林巴斯等國外企業(yè),。國內(nèi)具備生產(chǎn)顯微鏡能力的企業(yè)屈指可數(shù),,若國內(nèi)顯微鏡企業(yè)能打破技術(shù)壁壘,切入顯微鏡市場,,企業(yè)的生產(chǎn)經(jīng)營將騰躍至一個更高的格局,。未來國產(chǎn)多光子激光掃描顯微鏡替代空間大。目前中國使用的多光子激光掃描顯微鏡幾乎被徠卡顯微系統(tǒng),、蔡司,、尼康和奧林巴斯壟斷。國內(nèi)有能力開始生產(chǎn)多光子激光掃描顯微鏡的企業(yè)極少,,若國內(nèi)能夠制造出高性能,、高可靠性的多光子激光掃描顯微鏡,無異是會面臨極大的市場機(jī)遇,。美國清醒動物多光子顯微鏡代理商全球多光子顯微鏡主要廠商基本情況介紹,,包括公司簡介、多光子顯微鏡產(chǎn)品型號,、產(chǎn)量,、產(chǎn)值及動態(tài)等。

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隨著生物分子光學(xué)標(biāo)記技術(shù)的不斷進(jìn)步,,光學(xué)技術(shù)在揭示生命活動基本規(guī)律的研究中正發(fā)揮越來越重要的作用,,也為醫(yī)學(xué)診療提供了更多、更有效的手段,。生物醫(yī)學(xué)光學(xué)(BiomedicalOptics)是近年來受到國際光學(xué)界和生物醫(yī)學(xué)界關(guān)注的研究熱點(diǎn),,在生物活檢、光動力,、細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能檢測,、基因表達(dá)規(guī)律的在體研究等問題上取得了一系列研究成果,目前正在從宏觀到微觀上對大腦活動與功能進(jìn)行多層面的研究,。細(xì)胞重大生命活動(包括細(xì)胞增殖,、分化、凋亡及信號轉(zhuǎn)導(dǎo))的發(fā)生和調(diào)節(jié)是通過生物大分子間(如蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì),、蛋白質(zhì)-核酸等)相互作用來實(shí)現(xiàn)的,。蛋白質(zhì)作為基因調(diào)控的產(chǎn)物,與細(xì)胞和機(jī)體生理過程代謝直接相關(guān),,深入研究基因表達(dá)及蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用不僅能揭示生命活動的基本規(guī)律,,同時也能深入了解疾病發(fā)生的分子機(jī)理,進(jìn)而為尋找更有效的藥物分子,、提高藥物篩選和藥物設(shè)計(jì)的效率提供新的方法和思路,。

因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司 雙光子顯微鏡的基本原理是:在高光子密度的情況下,熒光分子可以同時吸收 2 個長波長的光子,在經(jīng)過一個很短的所謂激發(fā)態(tài)壽命的時間后,,發(fā)射出一個波長較短的光子,;其效果和使用一個波長為長波長一半的光子去激發(fā)熒光分子是相同的,。雙光子激發(fā)需要很高的光子密度,,為了不損傷細(xì)胞,雙光子顯微鏡使用高能量鎖模脈沖激光器,。這種激光器發(fā)出的激光具有很高的峰值能量和很低的平均能量,,其脈沖寬度只有 100 飛秒,而其周期可以達(dá)到 80至100兆赫茲,。在使用高數(shù)值孔徑的物鏡將脈沖激光的光子聚焦時,,物鏡的焦點(diǎn)處的光子密度是比較高的,雙光子激發(fā)只發(fā)生在物鏡的焦點(diǎn)上,,所以雙光子顯微鏡不需要共聚焦***,,提高了熒光檢測效率。多光子顯微鏡技術(shù)是對完整組織進(jìn)行深層熒光成像的優(yōu)先技術(shù),。

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    神經(jīng)科學(xué)重要的研究工具-多光子顯微鏡作為神經(jīng)科學(xué)重要的研究工具,,近年來發(fā)展快速,品牌也眾多,。我們通常都是在一間開著冷氣的房間里的超大防震臺上見過這樣一套設(shè)備,。臺面上復(fù)雜的光路也讓我們在使用中小心翼翼,生怕弄壞了哪里而無從修復(fù),。你是否想象過一臺放在書桌邊上就能使用的多光子顯微鏡,,一臺跟普通顯微鏡一樣操作簡便的多光子顯微鏡,一臺不用擔(dān)心會碰壞的多光子顯微鏡,,一臺可以在不同實(shí)驗(yàn)室之間搬來搬去的多光子顯微鏡,,一臺可以從任意角度進(jìn)行觀察掃描的多光子顯微鏡?滔博生物TOP-Bright是一家集研發(fā),,生產(chǎn),,銷售于一體的專注于神經(jīng)科學(xué)產(chǎn)品及致力于向高校、科研機(jī)構(gòu)等領(lǐng)域提供實(shí)驗(yàn)室一體化方案的高科技企業(yè),。業(yè)務(wù)服務(wù)范圍已遍布至全國各地幾百家實(shí)驗(yàn)室,。目前公司主營產(chǎn)品是享譽(yù)全球的國際品牌和產(chǎn)品,這些儀器設(shè)備都是科學(xué)研究所必備且不可替代的基礎(chǔ)儀器。 證實(shí)了多光子顯微鏡對皮膚和別的皮膚病的診斷的可行性,。美國共聚焦多光子顯微鏡焦點(diǎn)激發(fā)

光子顯微成像技術(shù)不是什么新技術(shù),,早在20多年前就有了,目前已經(jīng)在生命科學(xué)和材料科學(xué)中廣泛應(yīng)用,。高速高分辨率多光子顯微鏡研究

多光子顯微鏡對成像深度的改善利用紅光或紅外光激發(fā),,光散射小(小粒子的散射與波長的四次方的成反比)。不需要***,,能更多收集來自成像截面的散射光子,。***不能區(qū)分由離焦區(qū)域或焦點(diǎn)區(qū)發(fā)射出的散射光子,多光子在深層成像信噪比好,。單光子激發(fā)所用的紫外或可見光在光束到達(dá)焦平面之前易被樣品吸收而衰減,,不易對深層激發(fā)。多光子熒光成像的特點(diǎn),。深度成像∶與共聚焦相比能更好地對厚散射物質(zhì)成像,。信噪比∶多光子吸收采用的波長是單光子吸收的2倍以上,所以顯微試樣中的瑞利散射更小,,熒光測定的信噪比更高,。觀察活細(xì)胞∶離子測量(i.e.Ca2+),GFP,,發(fā)育生物學(xué)等—減少了光毒性和光漂白,,能對細(xì)胞長時間觀察。高速高分辨率多光子顯微鏡研究