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文獻(xiàn)2“混合硝酸稀土對(duì)谷氨酸產(chǎn)生菌的影響,,氨基酸雜志”發(fā)現(xiàn),,在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的稀土元素,能夠提高谷氨酸的產(chǎn)量,。申請(qǐng)人之前的**技術(shù)“一種谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法”,,在常規(guī)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn),通過添加菌體蛋白浸膏來替代酵母膏氮源,,不但節(jié)約了成本,,還能提高氨基酸發(fā)酵產(chǎn)率,一舉兩得,。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:在已有發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,,申請(qǐng)人針對(duì)微生物發(fā)酵的特點(diǎn),繼續(xù)進(jìn)行了改進(jìn),,以提高發(fā)酵效率,,據(jù)此,提出了一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的:一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,,然后間隔12h以上添加發(fā)酵培養(yǎng)基b,。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖,,酵母浸膏,,k2hpo4,mgso4·7h2o,,2-羥基乙胺,,cecl3,mnso4·h2o,,feso4·7h2o,,vb1,生物素,;將各原料攪拌均勻后,,調(diào)節(jié)ph,**,,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a,。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸,,尿素,,殼聚糖;將各原料攪拌均勻后,,調(diào)節(jié)ph,,**,,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b。推薦地,,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖50-100g/l,,酵母浸膏10-30g/l,k2hpo41-5g/l,。無血清培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的高度準(zhǔn)確性,。云南無血清培養(yǎng)基進(jìn)貨價(jià)
生產(chǎn)上一般采用冷水噴淋冷卻,冷卻到40-50℃后,,輸送到預(yù)先已經(jīng)**過的罐內(nèi),。(四)、間歇**與連續(xù)**的比較1,、歇**的***和缺點(diǎn)***是設(shè)備要求低,,不需另外設(shè)置加熱、冷卻裝置,;操作要求低,,適于手動(dòng)操作,適合于小批量生產(chǎn)規(guī)模,;適合于含有大量固體物質(zhì)的培養(yǎng)基的**,。缺點(diǎn)是培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)損失較多,**后培養(yǎng)基的質(zhì)量下降,;需進(jìn)行反復(fù)的加熱和冷卻,,能耗較高;不適合于大規(guī)模生產(chǎn)過程的**,;發(fā)酵罐的利用率較低,。2、連續(xù)**的***和缺點(diǎn)***是**溫度高,,可減少培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的損失;操作條件恒定,,**質(zhì)量穩(wěn)定,;易于實(shí)現(xiàn)管道化和自控操作;避免了復(fù)的加熱和冷卻,,提高了熱的利用率,;發(fā)酵設(shè)備利用率高。缺點(diǎn)是對(duì)設(shè)備的要求高,,需另外設(shè)置加熱,、冷卻裝置;操作較麻煩,;染菌的機(jī)會(huì)較多,;不適合于含大量固體物料的**,;對(duì)蒸汽的要求高。由此可見,,無論在理論上或者在實(shí)踐上,,與間歇**過程相比,連續(xù)**的***十分明顯,。因此,,連續(xù)**越來越多地被用培養(yǎng)基的**。湖北DMEM高糖培養(yǎng)基哪個(gè)好DMEM培養(yǎng)基在組織工程中有重要應(yīng)用,。
7)溶液應(yīng)在2℃-8℃下避光保存,。具體使用方法參照培養(yǎng)基包裝袋上的說明書。2)配制可高壓**細(xì)胞培養(yǎng)基(1)根據(jù)所需將培養(yǎng)基全部倒入一容器中,,用少量注射用水(20℃~30℃)將袋內(nèi)殘留培養(yǎng)基洗下,,并入容器。加注射用水至總體積的95%,,輕微攪拌溶解,。(2)在121℃、15psi下**15分鐘,。(3)待溶液冷卻至室溫,,加入無菌mol/LL-谷氨酰胺溶液規(guī)定體積、無菌%(w/v)碳酸氫鈉溶液規(guī)定體積,,加注射用水(20℃~30℃)至規(guī)定體積,,混勻。(4)如果必要,,用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)pH至所需值,。(5)溶液應(yīng)在2℃-8℃下避光保存。具體使用方法參照培養(yǎng)基包裝袋上的說明書,。注意事項(xiàng)1)細(xì)胞培養(yǎng)用水一般為三蒸水(經(jīng)石英蒸餾器蒸餾)或超純水,,醫(yī)*生產(chǎn)上一般為注射用水。2)建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用,,因?yàn)榘b一旦打開,,組分可能會(huì)變質(zhì)或因受潮而結(jié)團(tuán)。3)溶解干粉培養(yǎng)基時(shí)先加入終體積90%-95%的培養(yǎng)用水,,添加劑加完后再補(bǔ)足,。4)如需添加的組分較多時(shí),某一組分完全溶解后,,再添加另一組分,。5)待培養(yǎng)基完全溶解后再加入碳酸氫鈉,以免產(chǎn)生沉淀。6)所有成分完全溶解后,,培養(yǎng)基應(yīng)立即過濾或高壓**,,以免產(chǎn)生沉淀或有微生物污染。7)在過濾**時(shí),。
式中:N0—開始**(t=0)時(shí)原有活菌數(shù),;Nt----經(jīng)時(shí)間t后殘存活菌數(shù)。k:意義同上,;t:表示理論**時(shí)間k=()logNt/N0,;比死亡速率常數(shù)K,K值大,,表明微生物容易死亡,。理論**時(shí)間的計(jì)算需要注意以下幾個(gè)問題:(1)K值因不同的微生物種類不同、不同的生理狀態(tài),、不同的外界環(huán)境,,差別很大,實(shí)質(zhì)上,,它是微生物熱阻的一種表示形式,,微生物的熱阻越大,K值也越小,??梢匀∧蜔嵝匝挎邨U菌的K進(jìn)行計(jì)算。(2)在計(jì)算過程中,,N0,,Nt如何取值?N0為**開始時(shí)培養(yǎng)基中活微生物數(shù),,可以參考一般培養(yǎng)基中的活微生物數(shù)為(1-2)×107個(gè)/ml,;Nt通常取,既**失敗的概率為千分之一,。(3)上述**時(shí)間,,通常稱之為理論**時(shí)間,只可以用于工程計(jì)算中,,在實(shí)踐過程中,,因蒸汽的壓力問題(不穩(wěn)定)、蒸汽的流量問題有很大差別,,甚至培養(yǎng)基中的固體顆粒的大小、培養(yǎng)基的粘度等因素,,都會(huì)影響**效果,,實(shí)際的設(shè)計(jì)和操作計(jì)算時(shí)間可作適當(dāng)比例的延長或縮短。在實(shí)際生產(chǎn)中,通常采用經(jīng)驗(yàn)數(shù)值:間歇**,,121℃,,20—30分鐘;連續(xù)**,,137℃,,15—30s,在維持罐中保溫8—20分鐘,。4,、**溫度的選擇在培養(yǎng)基**過程中,除了雜菌死亡,,還伴隨著培養(yǎng)基成分的破壞,。因此必須選擇既能達(dá)到**目的。MEM培養(yǎng)基在細(xì)胞培養(yǎng)中表現(xiàn)出高效的穩(wěn)定性,。
nh4)2so4264mg,、nh4h2po4288mg、mgso4·7h2o370mg,、cacl2332mg,、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg,、h3bo33mg,、cocl2·、cuso4·,、na2moo4·,、nafeedta37mg、肌醇100mg,、煙酸2mg,、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg,、甘氨酸2mg,。本發(fā)明廣適性植物**1/2培養(yǎng)基,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno31331mg,、(nh4)2so4132mg,、nh4h2po4144mg、mgso4·7h2o185mg,、cacl2166mg,、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg,、h3bo33mg,、cocl2·,、cuso4·、na2moo4·,、nafeedta37mg,、肌醇100mg、煙酸2mg,、鹽酸硫胺素7mg,、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg,。本發(fā)明的有益效果:1,、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,其能***應(yīng)用于多種植物**培養(yǎng),,培養(yǎng)效果與ms培養(yǎng)基相當(dāng)或優(yōu)于ms培養(yǎng)基,,可規(guī)模化推廣使用,。2,、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,其在不新增加易制爆試劑種類的情況下,,去除了現(xiàn)有培養(yǎng)基中含有的市場禁止流通的易制爆試劑nh4no3,,不*消除了培養(yǎng)基的安全**,也便于培養(yǎng)基的購買,、儲(chǔ)存及管理,。3、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,,其配方用適量的(nh4)2so4和nh4h2po4取代nh4no3及kh2po4,,該替換減少的鉀離子和硝態(tài)氮通過適當(dāng)增加kno3成分來補(bǔ)充,并且適當(dāng)提高鉀離子含量,,可促進(jìn)植物發(fā)芽,,有利于維管束、纖維**以及胚的發(fā)育,。MEM培養(yǎng)基含有多種必需氨基酸和維生素,,適合細(xì)胞培養(yǎng)。廣東F12培養(yǎng)基采購
使用減血清培養(yǎng)基能減少細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng),。云南無血清培養(yǎng)基進(jìn)貨價(jià)
如何正確地使用培養(yǎng)基及**大程度地保持培養(yǎng)基的營養(yǎng)以維持細(xì)胞的生長,,對(duì)每個(gè)培養(yǎng)者都很重要。培養(yǎng)基的使用依不同的培養(yǎng)基種類,、培養(yǎng)方式,、細(xì)胞種類的不同而存在差異。細(xì)胞培養(yǎng)液的構(gòu)成細(xì)胞培養(yǎng)液指細(xì)胞生長的液體環(huán)境,,一般指完全培養(yǎng)液,,添加了血清,、水解乳蛋白、各種添加劑等可以直接使用的培養(yǎng)液,。細(xì)胞培養(yǎng)基&血清模式血清對(duì)于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長和增殖的大多數(shù)細(xì)胞系來說是需要的,因?yàn)榇蠖鄶?shù)單獨(dú)的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長所需要的全部營養(yǎng),,如MEM培養(yǎng)基,,較為常用的量為5%~10%的比例,而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3%左右,,細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響,。細(xì)胞培養(yǎng)基&乳歐液模式化學(xué)合成培養(yǎng)基現(xiàn)雖已大規(guī)模使用,但在某些培養(yǎng)領(lǐng)域水解乳蛋白仍在使用,,以補(bǔ)充培養(yǎng)液中缺乏的氨基酸,、小肽物質(zhì)。較為常用的方式是用漢氏(Hanks’BSS)或歐式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白(一般為5‰濃度),,即成乳漢(歐)液,,再與化學(xué)合成培養(yǎng)基(一般為MEM)按比例混合使用(如1:1)。細(xì)胞培養(yǎng)基&各類添加劑(生長因子等)模式成分復(fù)雜的培養(yǎng)基還含有許多化合物,,包括蛋白質(zhì),、多肽、核苷,、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物,、**酸及脂類等。云南無血清培養(yǎng)基進(jìn)貨價(jià)