培養(yǎng)實(shí)例2和對(duì)比培養(yǎng)例2的培養(yǎng)結(jié)果比較：蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基和1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100％；在相同條件下培養(yǎng)28d時(shí),，與1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基相比,，1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基中的幼苗長(zhǎng)勢(shì)更佳，在平均株高,、蓮座葉大小,、根長(zhǎng)、花朵數(shù)量等方面均優(yōu)于1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基,；并且,，采用上述培養(yǎng)方法，不論是1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基還是1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基,，均能獲得形態(tài)完整的花粉,，且花粉活力高達(dá)％，其特點(diǎn)在于選擇了蘭茲貝格型擬南芥作為培養(yǎng)對(duì)象,，且選擇了高度適中的培養(yǎng)盒進(jìn)行培養(yǎng),，克服了傳統(tǒng)培養(yǎng)方法無(wú)法獲得擬南芥整個(gè)生育期無(wú)菌苗的缺點(diǎn)，所獲無(wú)菌花***可直接用于花*離體培養(yǎng)等研究?jī)?nèi)容,。如圖2所示,。培養(yǎng)實(shí)例3：油菜無(wú)菌苗培養(yǎng)與培養(yǎng)實(shí)例1不同的地方在于：步驟(1)所用種子為中雙11號(hào)油菜種子，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例1,。1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：中雙11號(hào)油菜種子在1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％,，培養(yǎng)9d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯,、平均株高為,，葉色濃綠，莖稈粗壯,、平均莖中粗為,，根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為(>),、平均主根長(zhǎng)為,。如圖3所示。對(duì)比培養(yǎng)例3：將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例3,，1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。無(wú)酚紅培養(yǎng)基適用于對(duì)酚紅敏感的實(shí)驗(yàn),。江西Ham's F12培養(yǎng)基

    無(wú)動(dòng)物組分無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基的應(yīng)用三,、細(xì)胞培養(yǎng)基的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測(cè)方法澄清度水是細(xì)胞培養(yǎng)基的溶劑。細(xì)胞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分只有完全溶解于水才能被細(xì)胞吸收攝取,，細(xì)胞才能生長(zhǎng)增殖,，因此細(xì)胞培養(yǎng)基是否溶解以及培養(yǎng)液是否透明澄清直接影響培養(yǎng)基使用,。該項(xiàng)目是通過(guò)對(duì)水溶解后的細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度檢查，判斷細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度,。按中華******典2005年版二部附錄ⅨB進(jìn)行,。pH值哺乳類動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)需要合適的酸堿度，pH過(guò)高或者過(guò)低都會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。pH值的測(cè)定也可以檢查細(xì)胞培養(yǎng)基的批間差,。清大天一標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定取規(guī)定量供試品，用注射用水（水溫20℃-30℃）溶解至1L,，加入規(guī)定量碳酸氫鈉到上述溶液中,，用與細(xì)胞培養(yǎng)基溶液pH值相近的兩點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn)后的酸度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。按中華******典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行,；加入規(guī)定量的碳酸氫鈉（見(jiàn)表4-12）到上述溶液中,，按中華******典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行。干燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)細(xì)胞培養(yǎng)基具有吸濕性,，在空氣中放置水分會(huì)很快升**燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示產(chǎn)品中含濕量,。細(xì)胞培養(yǎng)基是有菌制劑，其豐富的營(yíng)養(yǎng)成分有利于微生物生長(zhǎng),，控制細(xì)胞培養(yǎng)基中的水分可以防止微生物的繁殖,，保持細(xì)胞培養(yǎng)基的養(yǎng)分。西藏F12培養(yǎng)基價(jià)格對(duì)比F12培養(yǎng)基常用于神經(jīng)細(xì)胞和其他敏感細(xì)胞系,。

    從而提高菌株增殖速率,，但是濃度過(guò)大會(huì)導(dǎo)致抑菌現(xiàn)象，后期菌株增殖放緩,，以產(chǎn)酸為主,，2-羥基乙胺還能夠作為陽(yáng)離子表面活性劑，使得細(xì)胞壁疏松,，提高細(xì)胞通透性,，促進(jìn)谷氨酸釋放到發(fā)酵液，從而提高了谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率,。三、通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)確定cecl3添加量為10mg/l,、2-羥基乙胺的添加量40mg/l,，在此基礎(chǔ)上，研究發(fā)酵培養(yǎng)基b對(duì)菌體濃度,、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響,。對(duì)照組1采用發(fā)酵培養(yǎng)基a進(jìn)行發(fā)酵，不采用發(fā)酵培養(yǎng)基b,，100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基a,；發(fā)酵工藝參照實(shí)施例1,。對(duì)照組2：發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加琥珀酸，其余同實(shí)施例1,。對(duì)照組3：發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加殼聚糖,，其余同實(shí)施例1。對(duì)照組4：發(fā)酵培養(yǎng)基a中添加5g/l的琥珀酸,，其余同對(duì)照組1,。實(shí)驗(yàn)組為實(shí)施例1。具體結(jié)果見(jiàn)表1,。表1組別菌濃度od600nm谷氨酸產(chǎn)量g/l糖酸轉(zhuǎn)化率％對(duì)照組：對(duì)照組1采用單一發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵,，谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率明顯低于實(shí)驗(yàn)組，各組別菌體濃度差異并不大,；對(duì)照組4在對(duì)照組1的基礎(chǔ)上添加了琥珀酸,，對(duì)菌體濃度并沒(méi)有影響，谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率也沒(méi)有明顯差異,，可能原因是,，發(fā)酵前期以菌體增殖為主,，產(chǎn)酸較少，琥珀酸對(duì)菌體增殖并沒(méi)有明顯的刺激作用,。

    **早開(kāi)發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基（minimalessentialmedium,MEM）,，其本質(zhì)為含有鹽,、氨基酸,、維生素和其他必需營(yíng)養(yǎng)物的pH緩沖的等滲混合物,。在此基礎(chǔ)上,，DMEM,、IMDM,、HAMF12,、PRMI1640等各種合成細(xì)胞培養(yǎng)基被不斷開(kāi)發(fā)出來(lái),。常用合成培養(yǎng)基的配方此處不詳細(xì)介紹,，其特性及應(yīng)用的范圍見(jiàn)表1-2,。表1-2常用合成培養(yǎng)基的特性及應(yīng)用的范圍培養(yǎng)基名稱特性及應(yīng)用范圍199細(xì)胞培養(yǎng)基添加適量的血清后，可***用于多種細(xì)胞培養(yǎng),，并用于**學(xué),、*苗生產(chǎn)等。MEM細(xì)胞培養(yǎng)基MEM（MinimalEssentialMedium）培養(yǎng)基有含Earle's平衡鹽的類型,，也有含Hanks'平衡鹽的類型；有高壓**型的,，也有過(guò)濾**型的；還有含非必需氨基酸的類型,。是**基本、適用范圍**廣的細(xì)胞培養(yǎng)基,。DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良獲得的,，各成分份量加倍,，分低糖（1000mg/L）,、高糖（4500mg/L）兩種類型,。細(xì)胞生長(zhǎng)快。附著稍差的腫*細(xì)胞,、克隆培養(yǎng)用高糖效果較好，常用于雜交*的骨髓*細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng),。IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基IMDM（Iscove’smodifiedDMEM）是由Iscove在DMEM基礎(chǔ)上改良,，增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等,。可用于雜交*細(xì)胞培養(yǎng),。MEM培養(yǎng)基常用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

    發(fā)酵培養(yǎng)基為：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l,，k2hpo42g/l,，mgso4·7h2o50mg/l，cecl30-40mg/l,，mnso4·h2o3mg/l,，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l,，生物素7μg/l,；發(fā)酵工藝同實(shí)施例1，100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基,。設(shè)置cecl3的添加濃度為0,，，如圖1-2所示,，隨著cecl3添加量的增加,，菌體濃度和谷氨酸含量均有所提升,，當(dāng)添加量為10mg/l時(shí)，菌體濃度和谷氨酸含量達(dá)到峰值,，然后出現(xiàn)下降趨勢(shì)，但是整個(gè)過(guò)程中,，糖酸轉(zhuǎn)化率沒(méi)有明顯改變（附圖未顯示）,；說(shuō)明cecl3稀土鹽能夠促進(jìn)菌株增殖,，提高谷氨酸相關(guān)合成酶的活力,，提高谷氨酸的產(chǎn)量,，但是過(guò)高的濃度會(huì)造成菌株增殖放緩和死亡，谷氨酸產(chǎn)量相應(yīng)下降。二,、通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)確定cecl3添加量為10mg/l,，在此基礎(chǔ)上,，研究2-羥基乙胺對(duì)菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響,。設(shè)置2-羥基乙胺的濃度為，5,10,20,40,80,160mg/l,，如圖3-4所示,，隨著2-羥基乙胺添加量的增加,，菌體濃度隨之增加，相應(yīng)地,，谷氨酸含量和糖酸轉(zhuǎn)化率也有所提升，當(dāng)添加量為40mg/l時(shí),，菌體濃度和谷氨酸含量達(dá)到峰值，繼續(xù)增加2-羥基乙胺的濃度,，產(chǎn)生明顯的抑菌效果，菌株密度下降明顯,；原因是,，低濃度的2-羥基乙胺可能促進(jìn)磷脂酰乙醇胺細(xì)胞壁組分的合成,。無(wú)酚紅培養(yǎng)基確保了細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。浙江Ham's F12培養(yǎng)基價(jià)格查詢

無(wú)血清培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的純凈性,。江西Ham's F12培養(yǎng)基

    nh4)2so4264mg,、nh4h2po4288mg、mgso4·7h2o370mg,、cacl2332mg,、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg,、h3bo33mg,、cocl2·,、cuso4·、na2moo4·,、nafeedta37mg,、肌醇100mg,、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg,、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg,。將本實(shí)施例中的廣適性植物**培養(yǎng)基命名為cs基本培養(yǎng)基,。實(shí)施例二,，本實(shí)施例廣適性植物**1/2培養(yǎng)基,，其每1000ml培養(yǎng)基中含有：kno31331mg、(nh4)2so4132mg,、nh4h2po4144mg,、mgso4·7h2o185mg,、cacl2166mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg,、h3bo33mg,、cocl2·、cuso4·,、na2moo4·,、nafeedta37mg、肌醇100mg,、煙酸2mg,、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg,、甘氨酸2mg,。將本實(shí)施例中的廣適性植物**1/2培養(yǎng)基命名為1/2cs基本培養(yǎng)基。上述實(shí)施例中的cs基本培養(yǎng)基,、1/2cs基本培養(yǎng)基與現(xiàn)有ms基本培養(yǎng)基及1/2ms基本培養(yǎng)基的成分對(duì)比如表1所示：表1ms,、cs、1/2ms,、1/2cs基本培養(yǎng)基成分表上述實(shí)施例中的cs基本培養(yǎng)基和1/2cs基本培養(yǎng)基,，若應(yīng)用于植物**培養(yǎng)中的固體培養(yǎng)基制作，可根據(jù)實(shí)際需要添加包含但不限于適量***,、蔗糖,、葡萄糖、白糖,、瓊脂,、植物凝膠、卡拉膠,、大量元素水溶肥等,，添加量同ms培養(yǎng)基一致，調(diào)節(jié)ph至,，121℃15min滅菌后搖勻分裝,。江西Ham's F12培養(yǎng)基