胸腹水,、腦脊液參照實行,。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,,用PBS()稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心,。5.組織標本:切割標本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(),,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用,。6.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。操作步驟:1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,,在*、第二孔中分別加標準品100μl,,然后在*,、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻,;然后從*孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三,、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,,混勻。瑞普信提供WB基礎實驗代測,。西藏胎牛血清代測
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