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Recombinant Human CD72 Protein

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-08-07

dATPSolution(脫氧腺苷三磷酸溶液)是一種常用的分子生物學(xué)試劑,,通常以100mM的濃度提供,。這種溶液主要用于支持DNA的合成過(guò)程,如聚合酶鏈反應(yīng)(PCR),、DNA測(cè)序,、填入反應(yīng)、切口平移,、cDNA合成和TdT加尾反應(yīng)等,。dATP的化學(xué)結(jié)構(gòu)是2'-脫氧腺苷-5'-三磷酸,它是DNA聚合酶在DNA復(fù)制過(guò)程中用來(lái)合成DNA鏈的原料之一,。在Sanger測(cè)序中,,dATP與ddATP(雙脫氧腺苷三磷酸)一起使用,后者是dATP的一種衍生物,,缺少3'-OH基團(tuán),,用于鏈終止反應(yīng)。dATP溶液應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C的條件下以保持其穩(wěn)定性和活性,,有效期通常為兩年,。在生產(chǎn)過(guò)程中,dATP通常按照ISO9001標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行,,并在D級(jí)清潔室中進(jìn)行以確保高質(zhì)量和純度,。HPLC確認(rèn)的純度通常大于99%。dATP溶液不含qPCR,、PCR,、逆轉(zhuǎn)錄抑制劑,也不含DNase,、RNase以及人類(lèi)和大腸桿菌DNA,,以避免實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的污染。與其他Cas12蛋白相比,,F(xiàn)nCas12a蛋白的分子量較小,,大約在400-700個(gè)氨基酸之間。Recombinant Human CD72 Protein,His Tag

Recombinant Human CD72 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)主要用于從RNA模板合成鏈cDNA,,而不是直接用于線(xiàn)性RNA的放大,。然而,合成的cDNA可以作為模板用于后續(xù)的線(xiàn)性RNA放大過(guò)程,,這通常涉及以下幾個(gè)步驟:1.**cDNA合成**:使用1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)按照試劑盒的說(shuō)明進(jìn)行操作,,從線(xiàn)性RNA模板合成鏈cDNA。2.**第二鏈cDNA合成**:在某些情況下,,可能需要合成雙鏈cDNA,。這可以通過(guò)使用DNA聚合酶和第二鏈合成試劑來(lái)完成,從而獲得完整的雙鏈cDNA,。3.**線(xiàn)性RNA放大**:一旦獲得了cDNA,,可以使用體外轉(zhuǎn)錄(IVT,InVitroTranscription)技術(shù)來(lái)放大RNA。這通常涉及以下步驟:-使用含有RNA聚合酶啟動(dòng)子序列的特定引物對(duì)cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,。-使用含有RNA聚合酶識(shí)別位點(diǎn)的引物進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng),,以合成大量RNA拷貝。4.**RNA純化**:體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA需要通過(guò)適當(dāng)?shù)姆椒ǎㄈ缰鶎游龌虺恋恚┻M(jìn)行純化,,以去除DNA模板,、未反應(yīng)的核苷酸和其他雜質(zhì)。5.**RNA質(zhì)量檢測(cè)**:使用凝膠電泳或生物分析儀檢測(cè)RNA的質(zhì)量和大小,,確保RNA的完整性和純度,。Recombinant Human PTK7/CCK4 Protein,His TagSpCas9-NLS的N端和C端都融合了SV40 T抗原的核定位信號(hào),這使得Cas9蛋白與gRNA形成的復(fù)合物,。

Recombinant Human CD72 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)通常提供幾種不同類(lèi)型的引物用于啟動(dòng)cDNA的合成,。這些引物包括:1.**Oligo(dT)引物**:這種引物通常與mRNA的poly(A)尾部互補(bǔ)配對(duì),適用于從真核生物的mRNA中合成cDNA,。它能夠產(chǎn)生大量全長(zhǎng)cDNA,,特別是當(dāng)模板來(lái)源于真核生物時(shí)。2.**隨機(jī)六聚體引物(RandomHexamers)**:這些引物是一組隨機(jī)的六核苷酸序列,,可以與RNA模板的任何部分結(jié)合,,從而啟動(dòng)cDNA的合成,。它們適用于mRNA,、rRNA、tRNA和長(zhǎng)非編碼RNA等多種類(lèi)型的RNA模板,。3.**基因特異性引物(GeneSpecificPrimers)**:這些引物是針對(duì)特定基因序列設(shè)計(jì)的,,可以用于從總RNA或mRNA中合成特定基因的cDNA。它們通常用于當(dāng)需要選擇性地?cái)U(kuò)增特定基因或基因家族時(shí),。在選擇引物時(shí),,需要考慮RNA模板的來(lái)源、RNA的質(zhì)量和特性以及后續(xù)實(shí)驗(yàn)的需求,。例如,,如果RNA模板具有復(fù)雜的二級(jí)結(jié)構(gòu)或較高的GC含量,可能需要使用隨機(jī)引物以提高cDNA合成的效率,。另外,,如果后續(xù)實(shí)驗(yàn)是qPCR,可以將Oligo(dT)與隨機(jī)引物混合使用,,以提高qPCR結(jié)果的真實(shí)性和重復(fù)性,。

T4UvsX重組酶是一種來(lái)源于T4噬菌體的酶,屬于RecA/Rad51家族的同源體,。這種重組酶在雙鏈DNA斷裂的修復(fù)以及復(fù)制叉重新啟動(dòng)的過(guò)程中扮演著重要角色,。T4UvsX重組酶能夠與其他DNA結(jié)合蛋白或輔助因子協(xié)同作用,,與單鏈DNA形成核酸蛋白復(fù)合物。該復(fù)合物通過(guò)尋找與目標(biāo)DNA互補(bǔ)的區(qū)域進(jìn)行雜交,,以完成鏈置換反應(yīng),,且此酶本身不具有核酸酶活性。產(chǎn)品應(yīng)用方面,,T4UvsX重組酶主要用于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),,如重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)技術(shù)。它在實(shí)驗(yàn)中與T4UvsY重組酶,、BsuDNA聚合酶(大片段),、T4基因32蛋白(gp32)等組分一同使用,以?xún)?yōu)化RPA擴(kuò)增反應(yīng),。T4UvsX重組酶的保存條件為-20℃,,可保存3年,或者-20℃儲(chǔ)存有效期為2年,,避免反復(fù)凍融,。其儲(chǔ)存液通常包含Tris-HCl、KCl,、DTT,、EDTA和甘油等成分,以保持酶的穩(wěn)定性和活性,。熱失活處理為60℃孵育10分鐘,。在使用T4UvsX重組酶時(shí),需要注意其保存液中甘油含量較高,,建議單獨(dú)分裝保存,,并且在操作時(shí)穿著實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套,以確保安全,。此外,,該產(chǎn)品供科研使用,不應(yīng)用于臨床診斷,。利用His標(biāo)簽通過(guò)親和層析從細(xì)胞裂解物中純化目標(biāo)蛋白,,然后可能通過(guò)離子交換層析、等方法進(jìn)一步提純,。

Recombinant Human CD72 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

PCR產(chǎn)物直接進(jìn)行電泳分析通常涉及以下步驟:PCR擴(kuò)增:首先使用PCR Master Mix和特定的引物對(duì)目標(biāo)DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增,。PCR產(chǎn)物的準(zhǔn)備:如果使用的是含有預(yù)混凝膠加載染料的PCR Master Mix(如某些Blood Direct PCR Master Mix),則PCR產(chǎn)物在擴(kuò)增后已經(jīng)含有了適合電泳的染料,。如果沒(méi)有使用含染料的Master Mix,,則需要在PCR反應(yīng)完成后向產(chǎn)物中添加適量的凝膠加載染料。電泳槽的準(zhǔn)備:清潔電泳槽,確保沒(méi)有灰塵或殘留物,。安裝電泳板和梳子,,注意密封以防緩沖液泄漏。灌注緩沖液:向電泳槽中灌注適量的電泳緩沖液,,常用的緩沖液有1X TAE或1X TBE,。PCR產(chǎn)物的加載:將PCR產(chǎn)物輕輕混合均勻,,避免氣泡的產(chǎn)生,。使用移液槍或微量移液管將PCR產(chǎn)物加入到凝膠孔中。如果PCR Master Mix中已含有染料,,通常不需要額外添加,。電泳條件的設(shè)置:根據(jù)PCR產(chǎn)物的大小和凝膠的濃度選擇合適的電壓和時(shí)間進(jìn)行電泳。例如,,較小的DNA片段可能需要較高的電壓,,而較大的片段則可能需要較低的電壓和更長(zhǎng)的時(shí)間。Pfu DNA Polymerase 具有3'-5'外切酶活性,,能夠識(shí)別并切除錯(cuò)配的核苷酸,,進(jìn)一步提高擴(kuò)增的準(zhǔn)確性。Recombinant Biotinylated Human Midkine Protein,His-Avi Tag

Recombinant Biotinylated Human MAGE-A3 (HLA-A*24:02) Protein, His-Avi Tag 是一種通過(guò)重組DNA技術(shù),。Recombinant Human CD72 Protein,His Tag

Benzonase核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒的組分經(jīng)過(guò)優(yōu)化,,以確保高靈敏度、高重復(fù)性和高準(zhǔn)確性的檢測(cè)結(jié)果,。以下是該試劑盒優(yōu)化的組分:1.**2×BenzDetectionSolution**:這是檢測(cè)中的關(guān)鍵組分,,用于提供反應(yīng)所需的緩沖環(huán)境,規(guī)格為1mL,。2.**標(biāo)準(zhǔn)品**:試劑盒中包含多個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,,包括25ng/ml、12.5ng/ml,、6.3ng/ml,、3.1ng/ml和1.5ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品,各100μL,。這些標(biāo)準(zhǔn)品用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),,從而準(zhǔn)確計(jì)算出樣品中的Benzonase殘留量。3.**樣品稀釋液**:提供1.5mL的樣品稀釋液,,用于適當(dāng)稀釋待檢測(cè)樣品,,以適應(yīng)檢測(cè)范圍。4.**反應(yīng)緩沖液(10XReactionBuffer)**:用于調(diào)整反應(yīng)體系的pH值和離子強(qiáng)度,,保證酶活的正常發(fā)揮,。5.**Benzonase底物(5XBenzonaseSubstrate)**:這是含有熒光標(biāo)記的DNA探針,用于檢測(cè)Benzonase的活性。當(dāng)?shù)孜锉籅enzonase切割后,,熒光信號(hào)增強(qiáng),,從而可以檢測(cè)到Benzonase的存在。6.**無(wú)核酸酶水(Nuclease-freeWater)**:確保在稀釋和樣品準(zhǔn)備過(guò)程中不會(huì)引入額外的核酸酶污染,。Recombinant Human CD72 Protein,His Tag