Hot-Start Taq DNA Polymerase 是一種經(jīng)過(guò)改良的Taq DNA聚合酶,,專為提高PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度而設(shè)計(jì),。它通過(guò)結(jié)合一種溫度敏感的抑制劑(如核酸適配體或抗體)來(lái)實(shí)現(xiàn)熱啟動(dòng)功能。在室溫下,,抑制劑與酶結(jié)合,,阻止Taq酶的活性,從而避免因引物錯(cuò)配或二聚體形成導(dǎo)致的非特異性擴(kuò)增,。當(dāng)反應(yīng)體系升溫至PCR循環(huán)條件時(shí),,抑制劑釋放,酶活性被啟動(dòng),,確保反應(yīng)在高溫下特異性進(jìn)行,。與普通Taq酶相比,Hot-Start Taq DNA Polymerase 的優(yōu)勢(shì)在于其提高了PCR的特異性和重復(fù)性,,同時(shí)減少了因非特異性擴(kuò)增導(dǎo)致的背景信號(hào),。這種酶還支持在室溫下配制反應(yīng)體系,無(wú)需額外的高溫啟動(dòng)步驟,,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作,。此外,Hot-Start Taq DNA Polymerase 適用于多種復(fù)雜的PCR應(yīng)用場(chǎng)景,,包括常規(guī)PCR,、多重PCR、高GC含量模板擴(kuò)增以及甲基化分析等,。例如,,某些版本的Hot-Start Taq酶經(jīng)過(guò)優(yōu)化,能夠擴(kuò)增經(jīng)過(guò)亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA,這對(duì)于表觀遺傳學(xué)研究具有重要意義,??傊琀ot-Start Taq DNA Polymerase 通過(guò)其獨(dú)特的熱啟動(dòng)機(jī)制,,為PCR反應(yīng)提供了更高的特異性和靈敏度,,是分子生物學(xué)研究和診斷應(yīng)用中的理想選擇。Pfu DNA Polymerase與Taq酶的對(duì)比:與Taq酶相比,,Pfu DNA Polymerase的錯(cuò)誤率更低,,適合高精度實(shí)驗(yàn),。Pfu DNA Polymerase
Probe qPCR Mix (2×, Low ROX):高特異性與低背景校正的qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, Low ROX) 是一種為探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液,,適用于需要低濃度ROX校正染料的qPCR儀器。該預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,、dNTPs以及低濃度ROX,能夠?qū)崿F(xiàn)高效,、特異的基因定量檢測(cè),。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,有效減少非特異性擴(kuò)增,,提高檢測(cè)靈敏度,。低濃度ROX校正:適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,如ABI 7500,、ViiA 7,、QuantStudio系列等。防污染系統(tǒng):部分產(chǎn)品含有dUTP和UNG(尿嘧啶DNA糖基化酶),,能夠有效降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,,防止假陽(yáng)性??焖俜磻?yīng):支持快速qPCR程序,,可在短時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè),提高實(shí)驗(yàn)效率,。操作簡(jiǎn)便:2×預(yù)混液設(shè)計(jì),,只需加入引物、探針和模板即可進(jìn)行反應(yīng),,減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn),。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析:用于定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平。病原體檢測(cè):快速檢測(cè)病毒,、細(xì)菌等病原體的DNA,。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析:通過(guò)探針?lè)▽?shí)現(xiàn)高特異性的基因分型。多重qPCR:可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)基因。Recombinant Human BAFF Receptor/TNFRSF13C泛素蛋白的C末端通常通過(guò)酰胺鍵與靶蛋白的氨基團(tuán)連接在一起,,最常見(jiàn)的是與靶蛋白賴氨酸的ε氨基團(tuán)相連,。
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具,。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增,、測(cè)序和診斷技術(shù)的發(fā)展,。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,,這使得它在DNA合成過(guò)程中能夠快速延伸引物,,同時(shí)在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個(gè)突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作,。此外,,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增,。近年來(lái),,科學(xué)家們通過(guò)對(duì)Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開(kāi)發(fā)出多種突變體,,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求,。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,,適用于長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增,。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開(kāi)發(fā)新型的多重PCR檢測(cè)技術(shù),,如“MeltArray”技術(shù),,實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡(jiǎn)化了DNA擴(kuò)增的流程,,還為基因診斷,、遺傳病檢測(cè)和個(gè)性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。
在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)已成為基因表達(dá)分析,、病原體檢測(cè)、基因拷貝數(shù)變異研究等領(lǐng)域的工具,。而One Step RT-qPCR Probe Kit憑借其產(chǎn)品特點(diǎn)和性能,,為科研工作者提供了一種高效、可靠的解決方案,,極大地推動(dòng)了相關(guān)研究的進(jìn)展,。一,、產(chǎn)品特點(diǎn)(一)一步法操作One Step RT-qPCR Probe Kit采用獨(dú)特的一步法反應(yīng)體系,將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在一個(gè)反應(yīng)體系中,。這種設(shè)計(jì)極大地簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程,,減少了人為操作誤差和樣本污染的風(fēng)險(xiǎn)。相比傳統(tǒng)的兩步法,,一步法節(jié)省了時(shí)間和人力成本,,還提高了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)定性,尤其適合高通量樣本的檢測(cè),。(二)高靈敏度與特異性該試劑盒采用了先進(jìn)的探針技術(shù),,結(jié)合優(yōu)化的酶體系和反應(yīng)緩沖液,能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)低豐度靶標(biāo)基因的高靈敏度檢測(cè),。其特異性探針設(shè)計(jì)確保了與目標(biāo)序列結(jié)合,,避免了非特異性擴(kuò)增的干擾,從而為定量分析提供了準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)支持,。無(wú)論是對(duì)微量樣本中的基因表達(dá)進(jìn)行定量,,還是對(duì)低濃度病原體進(jìn)行檢測(cè),One Step RT-qPCR Probe Kit都能表現(xiàn)出性能,。在目標(biāo)蛋白的C末端添加His標(biāo)簽和Avi標(biāo)簽。有助于通過(guò)親和層析進(jìn)行蛋白純化,,而Avi標(biāo)簽則可以用于生物素,。
一、產(chǎn)品特點(diǎn)高純度與穩(wěn)定性dNTPSetSolution中的每種核苷酸(dATP,、dCTP,、dGTP、dTTP)濃度均為100mM,,純度超過(guò)99%,,經(jīng)HPLC驗(yàn)證,無(wú)DNase和RNase污染,。這種高純度的dNTP溶液能夠有效減少實(shí)驗(yàn)中的非特異性擴(kuò)增,,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。獨(dú)立包裝與靈活使用該套裝將四種dNTP分別獨(dú)立包裝,,便于用戶根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求精確調(diào)整每種dNTP的濃度,,從而優(yōu)化反應(yīng)條件。這種靈活性對(duì)于復(fù)雜的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)尤為重要,,例如多重PCR和高保真PCR,。適用性dNTPSetSolution適用于多種分子生物學(xué)應(yīng)用,包括但不限于PCR,、實(shí)時(shí)熒光定量PCR,、RT-PCR,、cDNA合成和DNA標(biāo)記。其超純的成分和穩(wěn)定的性能使其能夠兼容各種DNA聚合酶,,包括高保真酶和熱啟動(dòng)酶,。二、性能優(yōu)勢(shì)高效擴(kuò)增在PCR反應(yīng)中,,dNTP的純度和濃度直接影響擴(kuò)增效率,。dNTPSetSolution能夠支持長(zhǎng)達(dá)20kb的DNA片段擴(kuò)增,表現(xiàn)出色的擴(kuò)增能力和穩(wěn)定性,。此外,,其高純度特性可以減少非特異性產(chǎn)物的生成,提高實(shí)驗(yàn)的特異性和靈敏度,。Cas12a不僅具有順式切割活性,,還具備獨(dú)特的反式切割活性,這使得它能夠無(wú)差別地裂解附近的單鏈DNA,。超快速T4 DNA連接酶
UDG在結(jié)構(gòu)上屬于單功能DNA糖基化酶,,它通過(guò)沿著DNA鏈滑動(dòng),識(shí)別尿嘧啶分子,,進(jìn)行堿基切除,。Pfu DNA Polymerase
GoldenView 吖啶橙核酸染料:安全高效的核酸可視化工具GoldenView 吖啶橙核酸染料是一種新型的核酸染色劑,可替代傳統(tǒng)的溴化乙錠(EB),,廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳和細(xì)胞染色實(shí)驗(yàn),。它與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光信號(hào),其靈敏度與EB相當(dāng),,但在安全性方面更具優(yōu)勢(shì),。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度:GoldenView與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生明亮的熒光信號(hào),雙鏈DNA在紫外光下呈現(xiàn)綠色熒光,,而單鏈DNA或RNA呈現(xiàn)紅色熒光,。安全性高:與EB不同,GoldenView在多項(xiàng)致突變性試驗(yàn)中未表現(xiàn)出致疾病性,,對(duì)皮膚和眼睛的刺激性較小,。適用范圍廣:不僅適用于DNA染色,還可用于RNA染色,,同時(shí)可用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),。應(yīng)用場(chǎng)景瓊脂糖凝膠電泳:用于檢測(cè)DNA片段和RNA條帶,尤其適合大片段DNA的檢測(cè),。細(xì)胞染色:用于區(qū)分正常細(xì)胞,、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞,常與碘化丙啶(PI)聯(lián)合使用,。細(xì)胞凋亡檢測(cè):吖啶橙可穿透細(xì)胞膜,,結(jié)合細(xì)胞核DNA,,用于熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀分析。GoldenView 吖啶橙核酸染料是一種高效,、安全的核酸染色試劑,,適用于多種實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景。其雙重?zé)晒馓匦允蛊湓诤怂犭娪竞图?xì)胞研究中表現(xiàn)出色,,是實(shí)驗(yàn)室中理想的EB替代品,。Pfu DNA Polymerase