在分子生物學(xué)實驗中,,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性與實時監(jiān)測功能的選擇,。這種預(yù)混液不僅繼承了Phusion DNA聚合酶的高保真特性,,還通過添加熒光染料,,為實驗提供了更直觀的監(jiān)測手段,極大地提升了實驗效率和準(zhǔn)確性,。Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,,包含Phusion DNA聚合酶,、dNTPs,、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實時監(jiān)測的熒光染料。Phusion DNA聚合酶以其保真性而聞名,,其錯誤率比普通Taq酶低50倍以上,,比Pfu酶低6倍。這種高保真性使其成為基因克隆,、測序模板制備,、突變分析等高精度實驗的推薦工具。同時,,Phusion酶的延伸速度可達(dá)15-30秒/kb,,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍,提高了實驗效率,。熒光染料的加入是該預(yù)混液的一大亮點,。這種染料能夠在PCR過程中實時監(jiān)測DNA的擴(kuò)增情況,,通過熒光信號的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度。實驗人員無需額外添加染料或進(jìn)行復(fù)雜的后處理,,即可直接在PCR儀上觀察擴(kuò)增曲線,,從而實現(xiàn)快速、準(zhǔn)確的定量分析,。這種設(shè)計不僅節(jié)省了實驗時間,,還減少了人為操作帶來的誤差。此外,,Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 的2倍濃度設(shè)計進(jìn)一步簡化了實驗操作,。CRISPR-Cas12a(以前稱為Cpf1)是一種類II型V型內(nèi)切酶,偏好富含胸腺嘧啶的原間隔短回文重復(fù)序列鄰近基序,。Recombinant Rat LIX/CXCL5
SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus):高效防污染的實時定量PCR解決方案SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus) 是一種為實時熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計的2×預(yù)混液,,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料和尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技術(shù),能夠有效防止PCR產(chǎn)物污染,,提高檢測的特異性和準(zhǔn)確性,。產(chǎn)品特點高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,,有效減少非特異性擴(kuò)增,,提高檢測靈敏度。防污染設(shè)計:預(yù)混液中包含UDG酶和dUTP,,可在PCR反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,,防止交叉污染。通用性:含有ROX被動參考染料,,適用于所有qPCR儀器,,無需根據(jù)儀器調(diào)整ROX濃度??梢暬聚櫍翰糠之a(chǎn)品含有藍(lán)色示蹤染料,,加入模板后顏色變化可防止加樣錯誤。應(yīng)用場景基因表達(dá)分析:用于定量檢測基因表達(dá)水平,。病原體檢測:快速檢測病毒,、細(xì)菌等病原體的DNA。多重檢測:可在同一反應(yīng)中同時檢測多個目標(biāo)基因,。SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus) 以其高效,、特異和防污染的特點,成為分子生物學(xué)研究和臨床檢測中的重要工具,,尤其適用于需要高靈敏度和防污染的qPCR實驗,。Recombinant Cynomolgus CD83 Protein,His Tag利用His標(biāo)簽通過親和層析從細(xì)胞裂解物中純化目標(biāo)蛋白,然后可能通過離子交換層析,、等方法進(jìn)一步提純,。
dUTP(脫氧尿苷三磷酸)是一種特殊的核苷酸,,其結(jié)構(gòu)與dTTP(脫氧胸苷三磷酸)相似,但在堿基部分含有尿嘧啶而非胸腺嘧啶,。dUTP在分子生物學(xué)中具有獨特的應(yīng)用價值,,尤其是在DNA合成、PCR反應(yīng)以及基于尿嘧啶的標(biāo)記和檢測中,。產(chǎn)品特點dUTP Solution (100 mM) 是一種高純度的即用型溶液,,濃度為100 mM,能夠滿足多種實驗需求,。與傳統(tǒng)的dNTP(如dATP,、dTTP、dCTP和dGTP)不同,,dUTP中的尿嘧啶可以被特定酶識別和作用,,例如尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)。這一特性使其在某些實驗中具有不可替代的作用,。dUTP溶液經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,,確保其純度和穩(wěn)定性。其高濃度設(shè)計便于實驗人員根據(jù)具體需求進(jìn)行稀釋和使用,,同時減少了試劑添加量,,降低了污染風(fēng)險。應(yīng)用場景dUTP在分子生物學(xué)中具有多種獨特的應(yīng)用:PCR反應(yīng)中的熱啟動:dUTP常用于熱啟動PCR技術(shù)中,,通過引入尿嘧啶標(biāo)記的引物,,利用UDG酶在PCR反應(yīng)前降解引物,從而防止非特異性擴(kuò)增,。DNA標(biāo)記與檢測:dUTP可用于DNA標(biāo)記,,通過將尿嘧啶引入DNA鏈,后續(xù)可通過UDG酶或熒光標(biāo)記的抗尿嘧啶抗體進(jìn)行檢測,,實現(xiàn)對特定DNA片段的標(biāo)記和追蹤,。
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具,。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,,極大地推動了基因擴(kuò)增,、測序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,,但缺乏3'→5'外切酶活性,,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個突出的A堿基,,便于后續(xù)的克隆操作,。此外,,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增,。近年來,,科學(xué)家們通過對Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,,以滿足不同的實驗需求,。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,,適用于長片段PCR擴(kuò)增,。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測技術(shù),,如“MeltArray”技術(shù),,實現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測多個靶點。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡化了DNA擴(kuò)增的流程,,還為基因診斷,、遺傳病檢測和個性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。在泛素化過程中,,首先泛素激起酶E1(Uba1或其他)在ATP的存在下激起泛素分子,,形成E1-泛素硫酯中間體。
dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM):助力分子生物學(xué)實驗的高效防污染解決方案在分子生物學(xué)實驗中,,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增和檢測的工具之一,。然而,PCR產(chǎn)物的殘留污染可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果,,嚴(yán)重影響實驗的準(zhǔn)確性和可靠性,。dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)作為一種高效的防污染試劑,通過與尿嘧啶DNA糖苷酶(UDG)聯(lián)合使用,,能夠有效解決這一問題,。產(chǎn)品特點高純度與穩(wěn)定性dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)采用高純度的dATP、dCTP,、dGTP和dUTP,,純度≥99%,確保實驗的準(zhǔn)確性和重復(fù)性,。該產(chǎn)品在-20℃下可穩(wěn)定保存24個月,,使用時需避免反復(fù)凍融。防污染機(jī)制該產(chǎn)品通過在PCR反應(yīng)中用dUTP替代dTTP,,使擴(kuò)增產(chǎn)物中摻入dU堿基,。隨后,UDG酶能夠特異性地降解含有dU的DNA產(chǎn)物,,從而有效去除殘留的PCR產(chǎn)物污染,。這種防污染系統(tǒng)特別適用于高通量PCR實驗和需要嚴(yán)格控制假陽性的應(yīng)用場景,。兼容性與適用性dNTP/dUTPMixture適用于多種DNA聚合酶,如Taq酶和BstDNA聚合酶等,,可用于PCR,、real-timePCR、RT-PCR,、引物延伸反應(yīng)以及cDNA合成等多種分子生物學(xué)實驗,。然而,需要注意的是,,某些具有校正活性的酶可能不適用于該混合物,,具體需參考酶的產(chǎn)品說明書。實驗人員可以根據(jù)需求選擇后續(xù)的檢測方法,,例如凝膠電泳分析,、平末端克隆或測序,無需擔(dān)心染料對結(jié)果干擾,。Recombinant Human GDF-7/BMP-12
泛素激起酶E1(Ubiquitin-activating enzyme E1)在ATP的存在下激發(fā)泛素分子,,形成E1-泛素硫酯中間體。Recombinant Rat LIX/CXCL5
在分子生物學(xué)實驗中,,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 則是提升PCR特異性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了熱啟動技術(shù)和熒光染料,,為效率,、準(zhǔn)確的基因擴(kuò)增提供了強(qiáng)大的支持。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,,包含Hot-Start Taq DNA聚合酶,、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs,、增強(qiáng)劑以及熒光染料,。其優(yōu)點在于熱啟動技術(shù)的應(yīng)用。通過在常溫下抑制Taq酶活性,,該預(yù)混液有效避免了非特異性擴(kuò)增和引物二聚體的形成,,從而提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。這種特性尤其適用于復(fù)雜模板(如高GC含量或低豐度基因)的擴(kuò)增,,以及對特異性要求較高的實驗場景,。熒光染料的加入是該預(yù)混液的另一大亮點。這種染料在PCR過程中能夠?qū)崟r監(jiān)測DNA的擴(kuò)增情況,,通過熒光信號的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度,。這種“即用型”預(yù)混液不僅節(jié)省了實驗時間,還減少了人為操作帶來的污染風(fēng)險,,尤其適合高通量的基因檢測和定量分析,。此外,該預(yù)混液的2倍濃度設(shè)計進(jìn)一步簡化了實驗操作,。實驗人員只需加入模板DNA和引物,,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差,。Recombinant Rat LIX/CXCL5