對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當(dāng)降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞，可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物,！?如想申請PEI試用裝,，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,，即可參加,！?用PEI轉(zhuǎn)染時(shí)，一般和DNA的比例是?AAV包裝PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝高回報(bào)的選擇

接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細(xì)胞濃度，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí),，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí)，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多PEI相關(guān)產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物,！如想申請PEI試用裝,，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio,，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加,！AAV包裝PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝高回報(bào)的選擇MAXgene GMP是一種cGMP級PEI轉(zhuǎn)染試劑,。

美國Polysciences成立于1961年，是一家歷史久遠(yuǎn)的化學(xué)品制造公司,，產(chǎn)品guang fan應(yīng)用于各個(gè)科研領(lǐng)域,。Polysciences在聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑（PEI轉(zhuǎn)染試劑）的制造工藝上具有長達(dá)20多年的經(jīng)驗(yàn)，其經(jīng)典的PEI轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品系列包括研究級產(chǎn)品PEI 25K,，PEI MAX和Transporter 5,，以及cGMP級MAXgene GMP，被guang fan用于抗體藥物和重組蛋白,，臨床等級慢病毒和AAV病毒的大規(guī)模生產(chǎn),，為全球客戶提供成本效益高、供應(yīng)穩(wěn)定和質(zhì)量可靠的選擇,。在過去10年間,，Polysciences的PEI轉(zhuǎn)染試劑已被用于國內(nèi)外多項(xiàng)臨床申報(bào)。如想申請PEI試用裝,，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio,，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加,！

PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)勢：高質(zhì)量的R&D和cGMP等級產(chǎn)品l高轉(zhuǎn)染效率,，低細(xì)胞毒性；MAXgene符合cGMP標(biāo)準(zhǔn)和ISO13485質(zhì)量管理體系,；經(jīng)過驗(yàn)證的生產(chǎn)工藝,；全合成，無動物源成分,；高性價(jià)比,，適用于從早期研發(fā)到臨床及商業(yè)化生產(chǎn)的各個(gè)階段l嚴(yán)格控制批間穩(wěn)定性；國內(nèi)外已有多個(gè)項(xiàng)目進(jìn)入臨床階段l具備殘留檢測方法,。PEI MAX 是一款高度濃縮的粉劑,，大量科學(xué)家選擇PEI MAX ，在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑,。多年以來,，經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻(xiàn)表明，在HEK293,、CHO 和 Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,，在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高，可靠性強(qiáng),。PEI MAX是一種非GMP等級PEI轉(zhuǎn)染試劑,，適用于基礎(chǔ)科學(xué)研究及藥物研發(fā)早期階段。如想申請PEI試用裝,，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio,，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加,！PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種穩(wěn)定的具有較高的陽離子電荷密度的有機(jī)大分子,。

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法：1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。如想申請PEI試用裝,，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,，即可參加,！Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑和Pulyplus PEI轉(zhuǎn)染試劑哪個(gè)好？山東PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝可在哪里申請

PEI轉(zhuǎn)染試劑如何做殘留檢測,？AAV包裝PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝高回報(bào)的選擇

PEIMAX——高產(chǎn)工業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑-高度濃縮,，可制備大量轉(zhuǎn)染試劑Polysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine,，PEI）的產(chǎn)品，因其較高的轉(zhuǎn)染效果,，已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn),。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機(jī)大分子，每相隔二個(gè)碳原子,，即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,，使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”(protonsponge)體。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑,，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞,。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,，大量科學(xué)家選擇PEIMAX,，在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來,，經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻(xiàn)表明,，在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,，在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,，可靠性強(qiáng)。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應(yīng)器持續(xù)的高基因表達(dá)細(xì)胞體系,，實(shí)現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過度,。而且與大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染方案相比，使用PEIMAX至少可降低40%轉(zhuǎn)染成本（部分案例可降低90%轉(zhuǎn)染成本）,。如想申請PEI試用裝,，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,，即可參加,！AAV包裝PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝高回報(bào)的選擇